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《山东大学》 2006年
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杀虫剂多杀菌素菌种选育及发酵工艺优化

刘正光  
【摘要】:广谱生物杀虫剂多杀菌素是刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)发酵后的次级代谢产物,具有杀虫谱广,易降解,低残留,无抗药性,对人畜无害,环境污染少等优点,因而在农牧业上有着广阔的应用前景,有望成为我国生物农药产业一个新的经济增长点,该产品的开发具有很好的经济效益和社会效益。 本文进行了多杀菌素产生菌Saccharopolyspora spinosa的诱变选育以及发酵工艺条件的优化。运用紫外线、空间条件、微波等多种诱变因子进行菌种诱变,并用紫外线诱变结合链霉素筛选,使多杀菌素的发酵单位不断提高,最后得到一株高产菌株J-SM-523,发酵单位达到354μg/ml,比原始菌株提高了177.0%。对该菌株的遗传稳定性考查结果表明,该菌株遗传性能比较稳定。 本文对种子培养基进行了优化。优化后的种子培养基比对照培养基不仅能获得更大的生物量,而且菌种生长更早,在培养60 h左右即可移种,缩短培养时间约10 h。优化后的种子培养基为:蛋白胨2.5%,酵母膏0.3%,葡萄糖0.5%,玉米浆1.0%,可溶淀粉0.3%,麦芽糖0.4%,硫酸镁0.2%,碳酸钙0.05%。 由于种子液的菌体量增加,对发酵接种量进行了优化。发酵接种量以4%左右为最佳。接种量超过10%会导致发酵单位偏低。 本文对发酵培养基进行了优化。使用容易得到、廉价的农副产品。较适合的原材料有豆油、可溶淀粉、黄豆饼粉、药媒、玉米浆、葡萄糖和酵母粉得到的最佳培养基为:豆油2.0%、可溶淀粉2.0%、黄豆饼粉1.5%、药媒1.0%、玉米浆1.0%、葡萄糖5.0%、酵母粉0.5%,CaCO_3 0.3%,MgSO_4·7H_2O 0.1%,KHPO_4 0.02%,NaCl 0.2%。最终优化后发酵培养基发酵单位达到463μg/ml,比对照提高了42.5%。 本文最后还用5 L小罐小试,得到了5 L小罐发酵过程的菌浓、pH值、多杀菌素含量等参数随时间变化曲线。在5 L小罐中,多杀菌素发酵单位最高达到263μg/ml。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:TQ453.2

【引证文献】
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