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《山东大学》 2006年
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中国对虾氧位—甲基转移酶基因克隆、表达分析与功能研究

李殿香  
【摘要】:病害一直是困扰水产养殖业的最大问题,研究水产养殖品种的抗病相关基因,利用其本身的抗病因子加强抗病力,发展新的免疫防治对策,取代或减少药物使用是水产养殖品种病害防治的根本。本论文从细菌刺激的中国对虾中克隆了一个氧位-甲基转移酶基因,从细菌刺激的泥鳅中克隆了一个CD59基因,并对这两个基因进行了表达模式和功能研究,结果如下: 一、首次克隆了中国对虾COMT基因 儿茶酚-氧位-甲基转移酶(Catechol-O-methyltransferase,简称COMT,E.C.2.1.1.6)是一种氧位-甲基转移酶。尽管氧位-甲基转移酶转甲基的化学机制都是一样的,但由于甲基受体分子的不同,氧位-甲基转移酶的种类也有所不同。动物有两种氧位-甲基转移酶被广为研究:一种是法呢酸-氧位-甲基转移酶(famesoic acid-O-methyltransferase,简称FAMeT):另一种就是COMT。通过对甲壳动物FAMeT的研究得知,FAMeT是催化法呢酸甲基化反应生成法呢酸甲酯的氧位-甲基转移酶,对甲壳动物的生长、卵巢发育和蜕皮具有调控作用。COMT可以催化S腺苷蛋氨酸的一个甲基转移到含儿茶酚结构的底物分子上,形成甲基化的产物,所以,COMT可以灭活儿茶酚胺类以及其它的儿茶酚型化合物,当然,也包括含有儿茶酚结构的有毒物质和临床药物。 自从1958年人的COMT被首次发现以来,COMT在脊椎动物和无脊椎动物中都有发现,然而,关于甲壳类COMT的研究还未见报道。 本文利用抑制性消减杂交技术(SSH)和SMART cDNA方法,克隆了中国对虾COMT基因,该基因全长cDNA序列已提交给GenBank,登录号为DQ091255。中国对虾COMT基因全长917bp,含有一个完整的开放阅读框,编码的成熟肽由221个氨基酸组成,其理论分子量是24572.06 Da,等电点是5.27,推测该成熟肽有10个磷酸化的氨基酸位点,不具信号肽,说明中国对虾COMT不分泌到循环的血液中,而是依赖特定氨基酸的磷酸化起调控作用。另外,推测中国对虾COMT中第18-221个氨基酸残基构成了一个保守区,该保守区属于甲基转移酶-3家族。 甲基转移酶-3家族成员很多,包括COMT、细菌氧位-甲基转移酶(简写为OMT)和咖啡酰辅酶A-氧位-甲基转移酶(简写为CCoAOMT)。通过氨基酸序列比对发现,本文克隆的中国对虾COMT基因与人和其它的哺乳动物的COMTs具有较高的的同源性,而与甲壳动物十足目的FAMeTs没有重要的序列相似性。系统发育分析也将本文克隆的中国对虾COMT基因与其它物种的COMTs归为同一类群,而与甲壳动物的FAMeTs分属不同类群,依此推论中国对虾氧位-甲基转移酶基因不属于FAMeTs,而
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q78;S917.4

【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
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中国重要会议论文全文数据库 前6条
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中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 张彦娇;盐度和温度对大菱鲆非特异性免疫力的影响及淡水螯虾相关免疫因子的研究[D];中国海洋大学;2010年
2 贾爱荣;大菱鲆4种免疫相关基因的克隆、表达分析及溶藻弧菌溶血素的研究[D];中国海洋大学;2010年
3 张琴;刺参(Apostichopus japonicus Selenka)高效免疫增强剂的筛选与应用[D];中国海洋大学;2010年
4 孟宪红;中国对虾“黄海2号”对WSSV的抗病性分析[D];中国海洋大学;2010年
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6 王丽燕;面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)对中国卤虫(Artemia sinica)抗弧菌感染的影响与酚氧化酶原在卤虫早期发育过程中表达时相的研究[D];中国海洋大学;2010年
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8 丁鉴锋;皱纹盘鲍溶菌酶及两种蛋白酶抑制因子的克隆与表达[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前7条
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中国硕士学位论文全文数据库 前1条
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【二级参考文献】
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【相似文献】
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 韩毛振;维吉尼亚链霉菌IBL14中氧甲基转移酶基因的鉴定和功能分析[D];安徽大学;2014年
2 姚燕;耐盐大豆培育分子策略的探讨[D];石河子大学;2008年
相关机构
>安徽大学
>石河子大学
相关作者
>韩毛振 >姚燕
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