雌激素预防早产儿视网膜病变的实验研究

【摘要】：目的：观察生理浓度的雌二醇(E_2)在不同氧环境下，对培养的牛视网膜毛细血管内皮细胞(BRECs)的影响及对SD大鼠早产儿视网膜病变(ROP)模型视网膜新生血管形成的影响，探讨E_2对ROP的预防作用以及可能的作用机理。 方法：1．以培养的BRECs为模型，在正常O_2环境及缺O_2环境下，给予不同生理浓度的E_2(浓度分别为10~(-12)，10~(-10)，10~(-8)mol／L)或PBS作用不同时间(8h，24h)，RT-PCR检测血管内皮生长因子(VEGF)mRNA、低氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA、一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达。硝酸还原酶法测定NO的释放。 2．制造SD大鼠ROP模型，分别在高O_2[(75±2)％O_2]饲养(P1-7)及正常空气饲养(P8-14)阶段或全程(P1-14)中，给予皮下注射E_2(lug／rat／day，E_2溶解于乙醇，用PBS稀释为0.1mL／rat)或皮下注射溶媒(PBS)0.1mL／rat／day，每日观察新生鼠的发育情况。生后7天(P7)、14天(P14)，各组鼠分别随机取3只，腹腔麻醉后，心腔穿刺并注射墨汁，行视网膜铺片，观察视网膜血管发育情况；断头处死动物，摘除眼球，RT-PCR检测视网膜VEGFmRNA、HIF-1αmRNA、eNOSmRNA的含量；生后14天(P14)的眼球行组织切片HE染色，观察视网膜新生血管生长情况；免疫组化染色，观察VEGF蛋白的表达；透射电镜观察视网膜超微结构变化。 结果：1．BRECs VEGFmRNA、HIF-1αmRNA、eNOSmRNA的表达： 1-1．低O_2条件下BRECs的HIF-1αmRNA、VEGFmRNA、eNOSmRNA表达较正常O_2条件下明显增多(P＜0.05)，且VEGFmRNA、HIF-1αmRNA两者之间有明显的相关性(r=0.82)。 1-2．正常O_2条件下，给予不同生理浓度E_2(10~(12)，10~(-10)，10~(-8)mol／L)作用24h，显示E_2呈浓度依赖性促进BRECs的VEGFmRNA、eNOSmRNA表达(P＜0.05)。10~(-8)mol／L E_2作用8、24h，VEGFmRNA、eNOSmRNA表达量呈时间依赖性增多(P＜0.05)；E_2不影响HIF-1αmRNA的含量(P＞0.05)。 1-3．低O_2条件下，给予不同生理浓度E_2(10~(-12)，10~(-10)，10~(-8)mol／L)作用24h，

【学位授予单位】：山东大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2006
【分类号】：R774.1