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《山东大学》 2006年
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过氧化物酶和谷胱甘肽的单细胞分析及DNA的单分子检测

高宁  
【摘要】:第一章主要对毛细管电泳、微流控芯片和扫描电化学显微镜的单细胞分析及单细胞高通量分析作了简要的综述。在毛细管电泳单细胞分析中,涉及到单细胞进样,细胞溶膜,细胞内组分的衍生(包括柱前衍生,柱上衍生,柱后衍生)和检测技术(包括电化学法和激光诱导荧光法)。此外对细胞内衍生技术及细胞电穿孔技术在毛细管电泳单细胞分析中的应用也作了叙述。在微流控芯片单细胞分析中,着重介绍了单细胞组分分析及单细胞内生化反应的实时检测。本章也对扫描电化学显微术在单细胞分析中的应用及高通量单细胞分析也作了概述。本章共引用文献142篇。 第二章中我们提出了一种文献中未见报道的高通量电化学测定单个细胞中酶的新策略。首先利用毛地黄皂苷能溶解细胞膜上胆固醇的性质,使细胞膜上形成微孔,只有小分子物质(如酶的底物和产物)可以通过这些微孔进出细胞,而大分子物质(如酶)不能穿过细胞膜。在毛细管中加入缓冲液和酶反应的底物氢醌(H_2Q)和过氧化氢(H_2O_2)。用压力将细胞逐个连续压入毛细管,H_2Q和H_2O_2通过细胞微孔扩散进入细胞与酶发生催化反应。生成的苯醌(BQ)又扩散出细胞。细胞随着压力流向检测端移动,与此同时,在细胞周围形成产物BQ的区带,当区带到达毛细管出口时,用碳纤维电极检测。我们用这种方法成功地测定了人中性粒细胞中过氧化物酶。在32min内可连续测定39个细胞。通过分析得到方法的相对标准偏差RSD为8.7%。其中细胞不同造成的RSD约为6%。该论文发表在Anal.Chem.78(2006),3213-3220。 在第三章,我们建立了一种纳升微池中催化反应电化学检测单细胞中酶活性的方法。在这个方法中将单细胞用推片的方法导入到用简单的化学方法刻蚀的纳升微池阵列中。再将此细胞用冷冻/解冻方法溶膜。在含有单细胞溶解液的微池中加入酶反应的底物。在反应10min后插入用微米金圆盘工作电极和Ag/AgCl参比电极构建成的双电极。用伏安法测定单细胞中的酶。整个实验在自制的恒湿箱中进行。此外,文中还讨论了溶液蒸发、电极尺寸、溶液体积、电极污染、单细胞微池加样、溶液中溶解氧的影响等因素。用这种方法成功的测定了人单个中性粒细胞和急性早幼粒白血病细胞中的过氧化物酶活性。该论文发表在Anal
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:Q2-3;Q523-3

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1 胡深,庞代文,王宗礼,程介克,李之望,樊友珍,胡宏镇;毛细管电泳安培测定鼠单个交感神经细胞中儿茶酚胺类神经递质[J];分析化学;1998年06期
2 杨文初,俞爱民,陈洪渊;微量乳酸脱氢酶毛细管电泳在线反应电化学检测方法的研究[J];高等学校化学学报;2001年04期
3 胡深,庞代文,王宗礼,程介克,李之望,樊友珍,胡宏镇;毛细管电泳安培法分析单个神经细胞[J];高等学校化学学报;1996年08期
4 贝泠,胡天惠,沈恂;一种改进的分离嗜中性白细胞的方法[J];生物化学与生物物理进展;1998年04期
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1 王晓蕾;扫描电化学显微镜测定单细胞内的过氧化物酶和纳米电极的应用[D];山东大学;2003年
2 夏方诠;单细胞分析的新方法和肾上腺素细胞传感器[D];山东大学;2005年
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1 贾庆军,杨录军,刘晋祎,周燕虹,刘胜学,周紫桓,曹佳;硝酸羟胺对雄性小鼠生殖细胞和精子影响的初步研究[J];癌变.畸变.突变;2004年06期
2 安社娟;陈家;陈华洁;常薇;刘莉莉;赵艳丰;陈学敏;;反式二羟环氧苯并(a)芘相关新基因brg的全长克隆[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
3 蒋炳炎;翟瞻宇;申瑞霞;邱庆军;;微流控芯片脱模缺陷分析及其脱模装置研究[J];工程塑料应用;2010年01期
4 李常峰;蒋炳炎;申瑞霞;侯文潭;;微流控芯片超声振动注射成型模具设计[J];工程塑料应用;2010年02期
5 董玲;;微流控合成简介及其研究进展[J];合肥师范学院学报;2009年03期
6 苏建青;褚秀玲;李俊霞;付本懂;申海青;韦旭斌;;中性红染色法检测人参皂苷及其衍生物对CEF增殖的影响[J];安徽农业科学;2009年35期
7 胡智,陶永光,杨力芳,唐发清,罗非君,曾亮,易薇,曹亚;JIP影响鼻咽癌细胞增殖和凋亡的生物学效应研究[J];癌症;2002年11期
8 纪静;两种染色方法对X染色质显示效果的比较[J];青岛大学医学院学报;2003年03期
9 朱丽,侯丽雅,章维一;微混合器研究进展[J];微纳电子技术;2005年04期
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2 章春笋;徐进良;;PCR聚合物芯片研究进展及产业化前景[A];中国传感器产业发展论坛暨东北MEMS研发联合体研讨会论文集[C];2004年
3 张欣;张玉林;刘国松;;安培检测器微电流信号检测电路的设计[A];第16届中国过程控制学术年会暨第4届全国故障诊断与安全性学术会议论文集[C];2005年
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8 夏文娟;张丽霞;王日为;史作安;贾明;;毛细管电泳同时分析茶黄素类和儿茶素类化合物的方法研究[A];第四届海峡两岸茶业学术研讨会论文集[C];2006年
9 薛向尧;张平;黎海文;刘永顺;吴一辉;;PDMS氧等离子体长效活性表面处理及与Si的键合研究[A];第十届全国敏感元件与传感器学术会议论文集[C];2007年
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2 曲平;分子印迹微流控手性分离研究[D];南京大学;2010年
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7 马丹;温度敏感性PNIPAAm-g-PDMS智能表面的制备、性能研究及在细胞培养中的应用[D];浙江大学;2010年
8 晁侃;微流控系统调控电渗流和热效应数值研究[D];华中科技大学;2011年
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2 庞中华;微流控芯片注塑成型工艺规范的试验研究与质量预测[D];大连理工大学;2010年
3 敏云馨;藏獒三种组织成纤维细胞系的构建及生物学研究[D];西北民族大学;2010年
4 张宜文;基于PDMS通道内表面区域化学改性的表面张力微阀的研制[D];浙江大学;2011年
5 徐亮;面向微流控芯片的压电无阀微泵的研究[D];浙江大学;2011年
6 蔡秋莲;环烯烃共聚物微流控芯片的功能化及应用[D];兰州大学;2011年
7 李文星;蓝靛果花色苷提取及其抗肿瘤功能机理的初步研究[D];东北林业大学;2011年
8 王进;APL白血病多元微球阵列的定量方法研究[D];山东轻工业学院;2011年
9 李斯;瑞舒伐他汀对人脐静脉平滑肌细胞增殖的影响[D];河北医科大学;2011年
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1 张银志;阮起郡;孙秀兰;;高效液相色谱法检测鸡蛋中3种四环素类抗生素[J];安徽农业科学;2008年02期
2 王梦禅;钟文英;陈建秋;;盐酸金霉素及其光降解产物对淡水藻生长的影响[J];安徽农业科学;2011年07期
3 魏瑞成;裴燕;政晓丽;朱旭博;陈明;王冉;;金霉素和其代谢物胁迫对小白菜幼苗生长和抗氧化酶活性及累积效应的影响[J];草业学报;2011年05期
4 高利宏;敖林;胡冉;刘晋祎;黄明辉;杨梦苏;曹佳;;四环素致BALB/c小鼠肝脏毒性的基因表达谱研究[J];第三军医大学学报;2006年06期
5 程介克,庞代文,黄卫华,鲁馨;21世纪单细胞分析发展[J];大学化学;2003年04期
6 贺德春;许振成;吴根义;丘锦荣;秦国建;;四环素类抗生素的环境行为研究进展[J];动物医学进展;2011年04期
7 陈桂秀;吴银宝;;兽药土霉素的环境行为研究进展[J];动物医学进展;2011年05期
8 郭英凯,邵梦欣,张春煦,赵景奎;斜削碳纤维束微电极伏安法测定体液环境中的神经递质[J];分析化学;1997年05期
9 林金明,屈锋,单孝全;活性氧测定的基本原理与方法[J];分析化学;2002年12期
10 甘南琴,蔡汝秀,林智信;酶振荡“探针”研究生物活性氧的新进展[J];分析化学;2003年08期
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1 王秋林;机体氧化还原状态的研究[D];四川大学;2005年
2 孙悦;微流控芯片上单细胞分析的研究[D];浙江大学;2006年
3 侯延民;亲水有机溶剂气浮浮选分离/富集环境水中四环素类抗生素残留研究[D];江苏大学;2009年
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1 肖亮;土霉素对异育银鲫毒性和残留研究[D];华中农业大学;2008年
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1 黄益民,李稼,刘丹晶,虞欣,赵辉,张平成,白春礼;原子力显微镜对自由基损伤的红细胞膜表面精细结构的研究[J];北京生物医学工程;1999年01期
2 谢平会,刘鹰,许春向;细胞传感器[J];传感技术学报;2000年03期
3 程介克,庞代文,黄卫华,鲁馨;21世纪单细胞分析发展[J];大学化学;2003年04期
4 胡深,胡涌刚,李培标,程介克;毛细管电泳安培法检测中的在柱场放大效应[J];分析化学;1996年09期
5 黄玉文,封满良,章竹君;反相流动注射化学发光法测定葡萄糖[J];分析化学;1997年01期
6 邵元华;扫描电化学显微镜及其最新进展[J];分析化学;1999年11期
7 梅二文,顾文芳;近场扫描光学显微图象与光谱技术[J];分析科学学报;1999年01期
8 袁倬斌,李向军,李珺,张君;单细胞成像观测研究进展[J];分析试验室;2004年04期
9 程介克,王宗礼;微柱分离用于单个细胞分析[J];高等学校化学学报;1997年07期
10 张志全,佟月红,孙鹏,邵元华;应用扫描电化学显微镜研究水/1,2-二氯乙烷界面上离子诱导的电子转移反应[J];高等学校化学学报;2001年02期
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1 曾令兰,罗端德,蔡淑清,刘薇,杨渝珍,郭劲松;感染流行性出血热病毒的正常人骨髓细胞膜脂和酶生物活性的研究[J];中国病毒学;1996年01期
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3 王筠默;;人参皂甙对培养肝癌细胞的作用[J];国外医药.植物药分册;1981年06期
4 刘玺成;;红细胞内2,3-二磷酸甘油酸的测定及其在儿科临床的意义[J];国际儿科学杂志;1982年03期
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6 于青;肖翊华;刘文芳;;Ca~(2+)—CaM系统在HPGMR育性转换中作用的初步研究[J];武汉大学学报(理学版);1992年01期
7 周世恭;稀土铈在超微结构细胞化学中的应用[J];植物学通报;1993年04期
8 韩锦峰;贾琪光;宫长荣;林学梧;;二氧化碳对烤烟烘烤的促进作用[J];河南科技;1986年02期
9 齐义鹏,陈一平,贾平;木霉纤维素酶内源抑制剂的发现与初步研究[J];科学通报;1983年18期
10 袁静明;酶工程的一项新技术—固定化细胞[J];山西大学学报(自然科学版);1980年02期
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1 黄学阳;林鸿国;王建春;李彦彬;仉玮;刘明;黄羽;蔡炳勤;;疏肝活血法对下肢缺血模型大鼠血管内皮祖细胞影响的实验研究[A];2010年中国中西医结合周围血管疾病学术交流会论文集[C];2010年
2 王建春;黄学阳;林鸿国;李彦彬;仉玮;刘明;黄羽;蔡炳勤;;疏肝活血法对下肢缺血模型大鼠血管内皮祖细胞影响的实验研究[A];中华中医药学会周围血管病分会2010年学术大会论文集[C];2010年
3 孟智宏;;针刺对脑梗死模型鼠心肌组织cAMP、cGMP的影响[A];中国针灸学会临床分会第八次学术大会论文集[C];2000年
4 柯于鹤;屈松柏;;丹参对缺血性心肌损伤保护的非循环机制[A];第六次全国中西医结合心血管会学术会议论文汇编[C];2002年
5 孙华;张崇玉;;甜菜碱的渗透调节功能及其应用研究进展[A];2008山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2008年
6 罗伯托.刚萨雷斯;牛欣;;基于现代医学基础的正气的诠释[A];全国第十二次中医诊断学术年会论文集[C];2011年
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1 记者 杨骏;长期紧张人易老[N];新华每日电讯;2003年
2 吕群;使用降脂药注意副作用[N];卫生与生活报;2003年
3 尚艳娥;方便面产品主要指标[N];中国质量报;2001年
4 ;标准解读[N];中国质量报;2003年
5 吕群;保列治可治脱发[N];健康报;2004年
6 广西南宁奥立食品生化有限公司供稿;低聚果糖 21世纪健康食品配料的新宠儿[N];中国食品质量报;2003年
7 本报记者 渝文;基因污染危及生命根本[N];中药报;2001年
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1 刘金锋;组织靶向肝素-SOD及季铵化壳聚糖-SOD结合物的制备及其对ROS诱导损伤的作用与机制研究[D];山东大学;2009年
2 刘红霞;嘌呤衍生物及环磷酯前体药物的合成和生物活性研究[D];中国海洋大学;2012年
3 陈明;定常流加载系统的设计制作及流体切应力对体外培养破骨细胞的影响[D];四川大学;2005年
4 肖仔君;Acetobacter sp. CCTCC M209061细胞催化潜手性酮不对称还原反应的研究[D];华南理工大学;2010年
5 刘江疆;基于微通道内表面张力控制和驱动的分析新方法研究[D];清华大学;2010年
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1 黄欣;脉冲微波对细胞增殖影响的研究[D];华东师范大学;2010年
2 盛丽莉;NaCl和Ce~(3+)对银杏悬浮细胞生长和黄酮代谢的影响[D];南京林业大学;2012年
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