氧化应激与男性不育相关因素系列研究
【摘要】:第一部分 氧化应激对精子运动能力、膜功能及精子线粒体膜电位等的影响
目的:观察氧化应激对正常精子的运动能力、存活率、膜完整性以及膜脂类过氧化反应等因素的影响,以及氧化应激对精子线粒体膜电位的变化。
方法:采用简易上游法选择具有正常生理功能的人精子作为正常精子模型,应用FeSO_4/H_2O_2体系产生活性氧(ROS),与精子模型孵育后,运用计算机辅助精液分析(CASA)系统,分别观察30min、60min精子运动方式参数的变化。应用伊红-Y染色法观察ROS对精子存活率的影响,低渗膨胀法检测精子膜完整性,巴氏染色法检测精子顶体完整率。应用硫巴比妥酸法(TBA)测定精子悬液中膜脂类过氧化反应产物丙二醛(MDA)含量。利用新型荧光探针JC-1标记精子线粒体,在流式细胞仪上检测JC-1荧光强度的变化。
结果:
1.与对照组相比,正常精子模型与ROS孵育30min后,除H_2O_20.05mmol/L浓度组之外,各组VCL、VSL、VAP均明显下降,BCF、MAD、STR等无明显改变。高浓度组ALH、LIN与对照组比较明显下降。
2.随着氧化剂浓度的增高(H_2O_20.5-5mmol/L),存活率、低渗膨胀率明显下降,与对照组比较有显著性差异,并且具有剂量依赖性。孵育60min后,各上述指标较30min值下降,但二者无显著性差异。
3.除H_2O_20.05mmol/L组外,各组MDA含量与对照组比较有显著性差异。
【关键词】:精子 计算机辅助精子分析 氧化应激 流式细胞术 线粒体 膜电位 体外受精 精子DNA完整性 受精率 抗氧化作用 弱精子症 大鼠模型 【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:R698.2
【目录】:
- 中文摘要5-10
- 英文摘要10-15
- 符号说明15-17
- 第一部分 氧化应激对精子运动能力、膜功能及精子线粒体膜电位等的影响17-40
- 前言17-18
- 材料与方法18-23
- 结果23-28
- 讨论28-32
- 结论32-33
- 附图33-35
- 参考文献35-40
- 第二部分 体外受精周期中精子 DNA完整性与受精率的相关研究40-62
- 前言40-42
- 材料与方法42-50
- 结果50-54
- 讨论54-57
- 结论57-58
- 附图58-60
- 参考文献60-62
- 第三部分 补肾活血中药对弱精子症大鼠抗氧化作用的研究62-77
- 前言62-63
- 材料与方法63-69
- 结果69-70
- 讨论70-73
- 结论73-74
- 参考文献74-77
- 附综述 活性氧与男性不育77-86
- 致谢86-87
- 攻读学位期间发表的学术论文目录87-88
- 学位论文评阅及答辩情况表88
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