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《山东大学》 2009年
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利多卡因对内毒素诱导的大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1表达的影响

周长青  
【摘要】: 目的通过观察不同浓度的利多卡因对LPS诱导的体外培养大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1 mRNA表达和蛋白释放的影响,探讨利多卡因的抗炎作用机制,为脓毒症的临床治疗提供理论参考。 方法取雄性Wistar大鼠腹腔巨噬细胞,置6孔细胞培养板中培养3~5天后,用LPS刺激,采用不同浓度的利多卡因进行干预。共分为5组。5组细胞均弃原培养液,用不含血清的培养液洗涤2遍后:(1)空白对照组(C组)加入无血清的RPMI-1640培养液2.0ml;(2)阳性对照组(LPS组)加入无血清的RPMI-1640培养液1.980ml和浓度为10ng/ul的LPS 20ul,使LPS的终浓度为100ng/ml;(3)利多卡因1-3组(Lido1-Lido3组)在加入无血清的RPMI-1640培养液1.960ml和浓度为10ng/ul的LPS 20ul后,再分别加入浓度为0.2ug/ul、2ug/ul、20ug/ul的利多卡因20ul,LPS的终浓度为100ng/ml,利多卡因的终浓度分别为2ug/ml、20ug/ml、200ug/ml。5组细胞均于孵育箱中培养24h后收取细胞和细胞培养物上清。采用RT-PCR和ELISA分别检测细胞HMGB1 mRNA的表达和细胞培养物上清HMGB1蛋白浓度。 结果RT-PCR与ELISA结果显示,与阳性对照组(LPS组)比较,不同浓度利多卡因组HMGB1 mRNA表达和HMGB1蛋白释放均有不同程度减少,且呈剂量依赖性。利多卡因组1与LPS组的差异无统计学意义(P>0.01),而利多卡因2组及利多卡因3与LPS组及利多卡因1组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。利多卡因2与利多卡因3组之间HMGB1 mRNA表达的差异也有统计学意义(P<0.01),但抑制HMGB1蛋白释放的差异则无统计学意义(P>0.01)。 结论终浓度为20ug/ml,200ug/ml的利多卡因可明显抑制LPS诱导的体外培养大鼠腹腔巨噬细胞HMGB1 mRNA的表达和蛋白释放。这可能是利多卡因抗炎作用的机制之一。早期利多卡因治疗可能改善脓毒症的发生发展,但详尽的作用机制仍有待进一步研究。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:R96

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【参考文献】
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