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《山东大学》 2010年
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卡维地洛对体外柯萨奇病毒B3致心肌细胞凋亡与Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

席俊芳  
【摘要】: 目的: 研究卡维地洛对体外柯萨奇病毒B3(CVB3)致心肌细胞凋亡的抑制作用与机制 方法: 采用差速贴壁法培养原代Wistar乳鼠心肌细胞,实验组分为正常对照组、病毒组、卡维地洛组及美托洛尔组,正常对照组加入不含血清的DMEM培养液,后三组于CVB3感染心肌细胞后分别加入不含血清的DMEM培养液、无血清培养基配制的卡维地洛、美托洛尔溶液。培养72h后,依次应用倒置相差显微镜观察各组心肌细胞的形态、搏动速率,电镜观察心肌细胞形态学改变;分别采用黄嘌呤氧化酶法测定心肌细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、硫代巴比妥酸法测定心肌细胞培养液中丙二醛(MDA)含量、化学发光免疫法检测心肌细胞培养液中肌钙蛋白T(cTnT)水平、流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡率及免疫细胞化学法检测心肌细胞内Bcl-2及Bax蛋白表达水平。 结果: 1.倒置相差显微镜下可见病毒组心肌细胞的数量明显减少,细胞团缩、变圆、成堆,搏动范围明显变小,搏动节律不规则、速率明显降低。 2.电镜显示病毒感染的心肌细胞肌原纤维紊乱,z线模糊不清,细胞质内可见较多髓样小体,肿胀的线粒体,嵴变短、断裂,核周池肿胀,胞质内大量空泡形成,核膜内陷、核染色质浓缩、集边、凝集成团块状。 3.病毒组心肌细胞搏动速率(36.40±12.76)明显低于正常对照组(135.20±13.97)(P0.05),卡维地洛组心肌细胞搏动速率(96.00±11.22)明显高于病毒组(P0.05)。 4.卡维地洛组心肌细胞凋亡率(21.1±4.00)明显低于病毒组(38.4±7.12)及美托洛尔组(32.67±1.02)(P均0.05)。 5.与病毒组比较,卡维地洛组心肌细胞培养液中SOD活性(57.37±11.84 vs.41.12±2.45)显著升高(P0.05),MDA含量(2.19±1.63 vs.7.13±1.68)及cTnT水平(5.19±1.81 vs.10.86±0.9)均明显降低(P均0.05)。 6.美托洛尔组与病毒组相比较,心肌细胞培养液中SOD活性(42.77±6.31 vs.41.12±2.45)、MDA含量(6.76±2.74 vs.7.13±1.68)及cTnT水平(10.77±1.34 vs.10.86±0.9)均无显著差异(P均0.05)。 7.与病毒组及美托洛尔组比较,卡维地洛组心肌细胞内Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达减弱。结论: 卡维地洛对于体外CVB3感染的心肌细胞具保护作用,其机制可能与其抗氧化活性、上调心肌细胞内Bcl-2蛋白表达及下调Bax蛋白表达有关。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R965

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