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《山东大学》 2010年
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抗心肌肌球蛋白抗体与慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重构的关系及卡托普利、氧化苦参碱的干预研究

方艳妮  
【摘要】: 目的: 通过建立慢性病毒性心肌炎(CVMC)小鼠的实验动物模型,观察实验小鼠心脏结构、心功能的变化及血清中抗心肌肌球蛋白抗体(AMA)的表达水平及其间相关性,探讨抗心肌肌球蛋白抗体与CVMC小鼠心肌重构的关系;比较卡托普利和氧化苦参碱对CVMC小鼠上述指标的干预效果,以期为CVMC的心肌保护寻求更多更好的选择。 方法: 将111只4周龄BALB/c健康雄性小鼠随机分为6组:正常对照1组(1组)(n=8),正常对照2组(2组)(n=8),慢性病毒性心肌炎1组(3组)(n=20),慢性病毒性心肌炎2组(4组)(n=25),卡托普利干预组(5组)(n=25)及氧化苦参碱干预组(6组)(n=25)。以柯萨奇病毒B3株(CVB3)重复增量腹腔注射3、4、5、6组小鼠(第0、14、28天,剂量分别为0.20、0.25、0.30mL)建立慢性病毒性心肌炎模型,正常对照组小鼠同期腹腔注射等体积生理盐水。42天将1组、3组小鼠称重后,每只腹腔注射3%水合氯醛(0.01~0.015ml/g),麻醉后通过心脏超声测定实验小鼠心脏结构参数,包括心率(HR)、左室舒张末期内径(LVDD)、左室收缩末期内径(LVSD)、主动脉血流峰值速度(Vp),并计算射血分数(EF)及左室缩短分数(FS),然后断髓处死2组小鼠,行心肌苦味酸天狼猩红染色评估慢性病毒性心肌炎模型制备情况。42天后,第5组小鼠给予卡托普利100mg/kg·d,第6组小鼠给予氧化苦参碱100mg/kg·d,均灌胃给药,每天1次,共28天;第2组和第4组小鼠同期给予等体积生理盐水灌胃。70天将所有小鼠麻醉后行心脏超声检查,指标同前。检查后摘眼球取血,断髓处死小鼠,称取小鼠心脏质量,计算心脏体质量比值(HW/BW);分别以苏木素-伊红(HE)、苦味酸天狼猩红行心肌组织及心肌胶原组织特异性染色,运用图像分析软件计算心肌组织中胶原容积积分(CVF,%);酶联免疫法(ELISA)检测实验小鼠血清中AMA的表达,以光密度值(OD值)(?)+2s为阳性组,(?)+2s为阴性组,比较两组实验小鼠心脏结构参数的变化。 结果: 1.两CVMC组小鼠的HW/BW、LVDD及LVSD较同期正常对照组增大,HR明显增快,而Vp、FS及EF较正常组明显降低。卡托普利干预组及氧化苦参碱干预组小鼠各项指标均比CVMC2组明显改善,而但两干预组小鼠各项指标相比无显著差异。 2.CVMC组小鼠心肌HE染色显示心肌纤维排列疏松,间质成纤维细胞明显增生。卡托普利干预组及氧化苦参碱干预组小鼠心肌组织病理变化均比CVMC2组明显改善。 3.两正常对照组小鼠苦味酸天狼猩红染色心肌细胞间隙仅可见少量红色纤细的胶原;同期CVMC小鼠心肌胶原明显增生、变粗,并且将心肌细胞分割呈网筛状。且其CVF较同期正常对照组小鼠明显升高。而卡托普利干预组、氧化苦参碱干预组小鼠心肌CVF均较CVMC2组显著降低,但二者之间却无明显差异。 4. CVMC小鼠血清AMA OD值较正常对照2组明显升高(P0.01),卡托普利及氧化苦参碱干预后,实验小鼠血清AMA OD值较CVMC明显降低(P0.05),但两干预组比较无统计学意义。 5.血清AMA阳性组实验小鼠与AMA阴性组实验小鼠相比较,HW/BW、CVF明显增高(P均0.01),LVDD、LVSD明显增大(P均0.01),HR明显增快(P0.01),Vp、FS及EF则明显减小(P均0.01) 6.血清AMA与HW/BW、CVF呈正相关(rHW/BW=0.881,P0.01;rCVF=0.953,P0.01),与Vp、FS及EF呈负相关(rVp=0.818,P0.01;rEF=0.743,P0.05;rFs=0.802,P0.01),与LVDD、LVSD及HR无明显相关(rLVDD=0.504,P0.05;rLVSD=0.589,P0.05;rHR=0.295,P0.05)。 结论: 1.根据心脏超声、HW/BW、心肌组织病理变化及胶原测定结果,实验第42天时,小鼠已具备慢性病毒性心肌炎的临床及病理特征,说明此时慢性病毒性心肌炎小鼠实验模型制备成功,·证实慢性病毒性心肌炎小鼠存在心肌重构。 2.慢性病毒性心肌炎小鼠血清AMA表达增高,与抗体阴性组相比,抗体阳性组HW/BW、CVF、LVDD、LVSD增加,Vp、EF、FS减少;随着AMA表达的增高,HW/BW增加,CVF增高,Vp、EF、FS明显减少,提示血清中AMA与慢性病毒性心肌炎小鼠心肌重构有一定的关系。 3.卡托普利及氧化苦参碱干预后,HW/BW、CVF、LVDD、LVSD及AMA表达均较慢性病毒性心肌炎组降低,Vp、EF、FS则较慢性病毒性心肌炎组增高,提示卡托普利及氧化苦参碱可下调AMA的表达,同时可减少慢性病毒性心肌炎小鼠心肌损伤,抑制心肌重构。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R542.21

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【引证文献】
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