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《山东大学》 2010年
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沉默Id-1基因对腺样囊性癌生物学行为影响的实验研究

陈正岗  
【摘要】: 研究目的: 1.建立能够实时监测、连续动态观察肿瘤生长、转移等生物学行为的裸鼠在体绿色荧光腺样囊性癌ACCM肿瘤模型。 2.探讨裸鼠舌体移植腺样囊性癌瘤体内注射小干扰RNA慢病毒载体进行RNA干扰的有效性和可行性以及应用慢病毒载体的可能性。 3.探讨RNA干扰技术沉默Id-1基因在体内和体外实验中对腺样囊性癌ACCM的抑制作用。 4.探讨Id-1基因的表达在腺样囊性癌ACCM的细胞增殖、侵袭、凋亡等生物学行为中的作用,探讨其作为ACCM新的靶向治疗的重要分子的可能性。 研究方法: 1. ACCM细胞用含-10%胎牛血清、青霉素100mg/ml和链霉素100mg/ml的DMEM培养基,在37℃,5%CO2培养箱培养。逆转录病毒颗粒pLEGFP-N1(病毒滴度为108 Cfu/L)用0.45μm的滤膜过滤,再加入终浓度为8μg/ml的Polybrene组成感染液。用0.25%胰蛋白酶消化收集ACCM细胞,按1×105个/孔接种于6孔板中,常规培养12-16h后,加入上述感染液,培养24 h后更换新鲜培养基,继续培养48h,经G418 (800μg/ml)筛选出阳性克隆。应用有限稀释法进行单细胞克隆筛选,并进行扩大培养,最终获得单细胞克隆细胞株(ACCM-GFP)。 2.胰蛋白酶消化收集处于对数生长期的逆转录病毒载体pLEGFP-N1感染的ACCM细胞(ACCM-GFP),用含有胎牛血清的4℃预冷的DMEM清洗3遍,最终稀释成密度为2×106个/ml,收集后40min内完成细胞注射,注射前可置于冰上暂时保存。注射部位为裸鼠舌背中线处前2/3与后1/3交界处粘膜下,注射剂量为0.1ml/只。裸鼠为6周龄,体重20-25g。 3. ACCM-GFP肿瘤细胞接种7天后,在不同的时间点,用99.9%的乙醚进行吸入麻醉,并用实体荧光成像系统进行摄像分析。以465nm蓝光激发,观察裸鼠原发灶及淋巴结等部位GFP表达情况。同时,对获得的ACCM-GFP细胞进行绿色荧光观测,并与ACCM细胞在细胞形态学、细胞增殖能力、侵袭能力以及组织学等方面进行分析比较。体外进行细胞培养,提取ACCM-GFP细胞和ACCM细胞的总RNA和总蛋白,进行RT-PCR和Western Blot检测细胞内Id-1 mRNA表达水平和蛋白表达水平,并进行分析比较。 4. ACCM-GFP细胞注射2周后,以瘤体内多角度注射慢病毒载体对ACCM-GFP肿瘤进行RNAi,隔日注射1次,连续注射3次。Id-1-siRNA-Lentivirus和NC-siRNA-Lentivirus注射量为100μl (Id-1病毒滴度为5×108TU/ml; NC病毒滴度为1×109TU/ml,应用时稀释成5×108TU/ml);复感染指数(MOI)为1:50。 5.自注射慢病毒载体后隔日测量肿瘤体积大小以观测RNAi后肿瘤生长的变化;在肿瘤RNAi后的第3、4、5、6、7、10、14天分别处死实验组(感染Id-1-siRNA-Lentivirus组)、阴性组(感染NC-siRNA-Lentivirus组)和对照组(空白对照组:未感染慢病毒载体组)裸鼠并切取组织标本,同时观测RNAi后的肿瘤在实体荧光成像系统下的图像;对切取标本进行组织总RNA提取和组织总蛋白提取,分别进行实时定量RT-PCR和Western Blot检测肿瘤组织内Id-1 mRNA表达水平和蛋白表达水平;对肿瘤RNAi后第7天的组织切取标本制备肿瘤标本蜡块,进行增殖细胞核抗原标记物Ki-67的表达检测。 6.体外以Id-1-siRNA-Lentivirus感染ACCM细胞(MOI为1:50),感染24h、48h、72h后以流式细胞仪检测慢病毒感染效率(激发波长488nm,发射波长675nm),同时在荧光倒置相差显微镜下观测被Id-1-siRNA-Lentivirus感染的ACCM-GFP细胞,判断慢病毒感染效率;6孔板内每孔种入2×104ACCM细胞,过夜,使汇合率达到50%-80%,按照MOI为1:50加入Id-1-siRNA-Lentivirus和NC-siRNA-Lentivirus;感染4天后进行Hoechst法凋亡检测,研究RNAi Id-1基因对肿瘤细胞凋亡的影响;将ACCM细胞96孔板种板,每孔200μl,103个/孔,置37℃; 5%CO2温箱培养,待细胞贴壁,培养24小时后按照MOI为1:50加入Id-1-siRNA-Lentivirus和NC-siRNA-Lentivirus,感染1、2、3、4、5、6、7、8天分别以MTT法进行细胞活力检测,研究RNAi沉默Id-1基因对肿瘤细胞增殖活性的影响;在6孔板中用Id-1-siRNA-Lentivirus感染ACCM细胞后第5天,应用Transwell侵袭小室检测肿瘤细胞侵袭能力的变化(瑞氏染色法)。 研究结果: 1.经高浓度G418筛选培养并通过有限稀释法后获得的稳定表达GFP的单克隆ACCM细胞株(ACCM-GFP),在去除G418筛选压力后继续培养2个月以及冻存6个月复苏后,细胞仍能稳定表达GFP,仍可观测到强烈的绿色荧光信号,GFP分布于整个ACCM-GFP细胞质中。 2.组织形态学及组织病理学观测ACCM细胞与ACCM-GFP细胞无显著差异,倒置相差显微镜下观察为圆形、椭圆形或多角形上皮样细胞,大小较为一致,细胞单层贴壁生长,界限清楚。胞浆少,可见透亮度深浅不等的颗粒,核大,类圆形或不规则形,核浆比例高,核仁2-3个,清晰可见,并可见巨大融合细胞。细胞分裂相多见,并有多级核分裂,排列紧密时细胞互相镶嵌成铺路石样,密度再增高时可重叠生长,表现为接触抑制消失;ACCM-GFP细胞与ACCM细胞相比,其增殖能力无显著差异;体外培养发现其侵袭能力无显著差异;其Id-1基因的mRNA和蛋白水平表达无显著差异。 3.裸鼠舌体种植ACCM-GFP细胞成瘤率为100%;体外检测Id-1-siRNA-Lentivirus慢病毒感染效率,感染24h时,病毒的感染效率为24.89%;48h时感染效率为68.45%;72h时可高达83.5%;同时分别以以绿色和红色荧光观察被Id-1-siRNA-Lentivirus感染的ACCM-GFP细胞,通过细胞计数判断慢病毒的感染效率可高达80%。 4.活体荧光成像系统下观察ACCM-GFP裸鼠肿瘤模型,瘤体的绿色荧光信号强烈,肿瘤实性质地,呈分叶或结节状,边界呈波浪状,瘤体内可见囊腔;3周时,可以观测到颌下淋巴结转移灶,转移波及区域范围较小,但是荧光信号强烈;3周时未见肺转移及其它远处转移病灶。进行RNAi的ACCM-GFP肿瘤在465nm波长光线下激发出较弱强度的绿色荧光,在560nm波长光线下激发出高强度的红色荧光。 5.RNAi后阴性对照组与空白对照组的肿瘤生长趋势及生长速度较为一致,肿瘤体积大小无显著差异,实验组在RNAi后12d之前与阴性对照组及空白对照组比较无显著差异,第14天后肿瘤的体积虽然仍为增长上升趋势,但与阴性对照组及空白对照组比较差异非常显著(P0.01), RNAi对肿瘤生长的抑制率可达26.14%-39.17%。RNAi后增殖细胞核抗原标记物Ki-67在实验组的表达明显降低,与空白对照组与阴性对照组两两比较P0.01,差异有非常显著的统计学意义;而阴性对照组与空白对照组相比则无显著差异(P0.05)。 6.进行Id-1 RNAi的ACCM-GFP肿瘤组织Id-1 mRNA自RNAi第4天起出现表达水平下调,与阴性对照组及空白对照组比较差异有非常显著的统计学意义(P0.01), Id-1-siRNA对Id-1 mRNA的表达抑制率可达42.76%; RNAi后第4天至第14天之间的裸鼠肿瘤mRNA表达水平下调后保持相对稳定水平;RNAi第4天开始,Id-1蛋白表达水平与阴性对照组和空白对照组比较显著下降(P0.01),并且到达第6天时,蛋白表达下降至相对稳定水平。 7.相关体外实验研究中,感染Id-1-siRNA-Lentivirus的ACCM细胞体积缩小,膜皱缩,细胞核皱缩呈致密浓染、核凝聚变小,染色较深;染色质破裂成大小不等的碎片,或呈块状,并有边集现象,核染色强度变淡,呈现典型的细胞凋亡表现。计数相同视野内发生细胞凋亡的细胞数目,实验组与空白对照组及阴性对照组之间的差异有显著统计学意义(p0.01). Transwell侵袭小室检测细胞侵袭能力,实验组中感染Id-1-siRNA-Lentivirus的ACCM细胞穿过微孔膜的细胞数与空白对照组和阴性对照组比较显著降低(P0.01)。MTT法检测细胞增殖能力,接受Id-1-siRNAi的ACCM细胞第5天起生长速度明显减慢,实验组对细胞抑制率大约为40%-50%。 结论: 1.同一ACCM细胞可以相继接受2次以上的逆转录病毒感染,其基因组可以多次嵌入外源病毒基因而本身的基因表达和生物学特性不受影响。Id-1基因的mRNA表达和蛋白表达在ACCM细胞和ACCM-GFP细胞中基本一致。 2. ACCM-GFP荧光肿瘤模型可以长期稳定地表达GFP,有利于长期无创、实时和动态地观测肿瘤的生长变化、浸润、侵袭、远处转移以及治疗效果等,同时也为早期肿瘤变化的观测提供了可能,可以及时捕捉到早于临床症状出现的变化。是研究腺样囊性癌的最佳肿瘤模型之一。 3.本实验应用的慢病毒载体具有高感染效率、表达稳定和较高的生物安全性等特点。 4.特异性Id-1-siRNA可以显著降低Id-1基因在腺样囊性癌ACCM肿瘤组织中的mRNA和蛋白表达;对肿瘤的生长和细胞的增殖有明显的抑制作用;可以显著抑制肿瘤细胞的侵袭能力;并且可以促进肿瘤细胞的凋亡。 5.Id-1基因在腺样囊性癌肿瘤中与细胞的增殖能力、侵袭能力等生物学行为呈正相关;Id-1基因是治疗腺样囊性癌的理想的靶基因。 6.慢病毒载体介导的RNAi具有稳定、高效、给药方式接近临床等优势,是一种有效的肿瘤基因治疗技术,在腺样囊性癌的基因治疗中具有非常好的应用前景。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R73-3

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 何荣根,张晓珊,周晓健,王峥,张秀丽,邱蔚六,韩玉昇,张荣兴;涎腺腺样囊性癌 Acc-2和 Acc-3细胞系的建立及其形态学观察[J];华西口腔医学杂志;1988年01期
2 顾玲;步荣发;袁晔;布静秋;高飞;;31例上颌窦腺样囊性癌临床分析[J];口腔医学研究;2006年04期
3 王新军;涎腺腺样囊性癌转移的研究进展[J];同济大学学报(医学版);2003年03期
4 陈晓星;倪金良;郝波;张国新;施瑞华;王学浩;;胰腺癌组织Survivin与Ki-67的表达及其意义[J];世界华人消化杂志;2005年22期
5 黄敏娴,马大权,孙开华,俞光岩,郭传滨,高峰;涎腺腺样囊性癌预后因素的探讨[J];中华口腔医学杂志;2000年06期
6 关晓峰,杨捷琳,朱乃硕,王英明,李瑞武,郑兆鑫,霍克克;腺样囊性癌高、低转移细胞株基因表达谱差异性及转移相关基因研究[J];中华口腔医学杂志;2004年02期
7 关晓峰,邱蔚六,何荣根,林国础,周晓健;肺高转移性涎腺腺样囊性癌细胞株的筛选[J];中华口腔医学杂志;1996年02期
8 段小军,杨柳,周跃,唐康来,王东武;荧光蛋白表达对小鼠成纤维细胞系NIH3T3体外增殖能力的影响[J];中华烧伤杂志;2005年05期
9 伍志坚,吴小兵,曹晖,牛东滨,王宏,侯云德;表达绿色荧光蛋白的重组腺病毒伴随病毒的产生[J];中华实验和临床病毒学杂志;2001年03期
10 段小军;杨柳;周跃;辛榕;李起鸿;;增强型绿色荧光蛋白标记技术对骨折后骨髓间充质干细胞的迁移示踪[J];中国修复重建外科杂志;2006年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 龚仁国;Id-1和TSP-1在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义[D];四川大学;2007年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈兰英,赵桢,王晓涛,屈二军,陈建南;HSP70基因在人胃癌、食道癌及宫颈癌中高表达和癌变关系的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年04期
2 程烽;盛燕;施静艺;陈漪;徐潮;刘智;梁军;潘春明;朱忠勇;宋怀东;;重叠延伸PCR法构建UGRP1基因启动子的点突变表达载体[J];癌变.畸变.突变;2007年01期
3 温居一;张积仁;李鹏;张军;王斌;;NADH对二乙基亚硝胺所致L02人肝细胞株p53基因突变和c-erbB2基因表达的影响[J];癌变.畸变.突变;2009年05期
4 金艺凤;李铁臣;王莹;刘东华;孙珍贵;;ERCC1和XPD单核苷酸多态性与非小细胞肺癌铂类化疗敏感性的关系[J];癌变·畸变·突变;2010年05期
5 王继英;武英;郭建凤;呼红梅;张印;;莱芜黑猪保种群促卵泡素β亚基和雌激素受体基因、基因型变化情况[J];山东农业科学;2007年01期
6 陈静;胡晓辉;苗华荣;张建成;禹山林;;花生SRAP-PCR技术体系的优化[J];山东农业科学;2008年05期
7 陈长宝;朱树华;周杰;;改良CTAB法提取成熟肥城桃果实的总RNA[J];山东农业科学;2009年05期
8 葛宏华,肖亚中,姚建平;人心室肌球蛋白轻链1基因的克隆及其体外的表达与纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2004年06期
9 侯新东;盛桂莲;张桦;腊萍;;质粒DNA提取方法的探讨[J];安徽农学通报;2006年13期
10 朱美霞,孟艳玲,陈良兵;大豆与棉花抗性基因类似物的同源性比较及其进化分析[J];安徽农业科学;2005年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱林;江昌俊;叶爱华;李叶云;余梅;邓威威;;茶树ATP硫化酶和硒半胱氨酸甲基转移酶基因植物表达载体的构建[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 徐波;张莉;李启云;王景会;姜媛媛;杨贞耐;;牛凝乳酶成熟肽基因在大肠杆菌中的表达[A];中国奶业协会年会论文集2008(下册)[C];2008年
3 刘冬光;廖娟红;于清龙;陈颖钰;陈焕春;郭爱珍;;融合蛋白Rv3872/CFP-10/ESAT-6的制备及在牛结核诊断中的初步应用[A];中国奶业协会年会论文集2009(上册)[C];2009年
4 张海龙;田兆丰;董志;张晏如;张飞云;;多花黑麦草斑驳病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达[A];2010植物免疫机制研究及其调控研讨会论文集[C];2010年
5 闫云君;蔡勇;杨江科;;基于易错POR技术的短小芽胞杆菌(Bacillus pumilus)脂肪酶YZO2的定向进化[A];节能环保 和谐发展——2007中国科协年会论文集(一)[C];2007年
6 李玫;廖宝文;;红树林湿地烷烃降解菌的分离筛选[A];第十三届中国科协年会第16分会场-沿海生态建设与城乡人居环境学术研讨会论文集[C];2011年
7 郭奕斌;陈路明;孟亚仙;王晶晶;杜传书;潘敬新;;一个广东四川家庭的IDS基因新突变[A];第六届全国优生科学大会论文汇编[C];2006年
8 于占东;赵双宜;何启伟;王翠花;牟晋华;刘春香;;抗芜菁花叶病毒转基因大白菜的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
9 龚束芳;杨涛;车代弟;;偃麦草根茎非质体蛋白质修饰冰晶能力的观察[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
10 王英;滕齐辉;曹慧;胡锋;崔中利;;淹水和旱作水稻土中细菌群落多样性的空间分布[A];第四次全国土壤生物和生物化学学术研讨会论文集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 殷慧群;猪诱导性多潜能干细胞的建立[D];安徽农业大学;2010年
3 杨瑞梅;单链抗体介导狂犬病毒shRNA靶向制剂的研究[D];甘肃农业大学;2010年
4 宋翠平;H5N1禽流感和鹅Ⅰ型副粘病毒分离株的生物学特性及感染性的研究[D];中国海洋大学;2010年
5 郭新军;拟黑多刺蚁肌细胞增强因子2与肌钙蛋白Ⅰ亚基基因的克隆及其在发育中的表达研究[D];陕西师范大学;2010年
6 生书晶;何首乌芪合酶基因(FmSTS)的克隆、鉴定及转化拟南芥研究[D];华南理工大学;2010年
7 梁东;苹果山梨醇代谢相关基因的分子特性研究[D];西北农林科技大学;2010年
8 朱彦涛;甘蓝型油菜Polima CMS和陕2A CMS的形态和生化特征及其胞质遗传物质的比较研究[D];西北农林科技大学;2010年
9 温武军;鲤抗菌肽基因的克隆及其功能研究[D];山东师范大学;2011年
10 王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶(CBHⅠ、CBHⅡ)和内切葡聚糖酶(EGⅠ)的分子改造[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 高红梅;ETEC对断奶腹泻仔猪胃肠道紧密连接蛋白ZO-1的影响[D];华中农业大学;2010年
2 王树云;斑点叉尾鮰病毒ORF6和ORF10基因的原核表达及其功能的初步研究[D];华中农业大学;2010年
3 汪艳杰;水稻polycomb基因家族甲基化状态初步检测[D];华中农业大学;2010年
4 王伟;恶臭假单胞菌表面展示细菌漆酶及对染料的脱色性能[D];华中农业大学;2010年
5 黄辉;哈维弧菌表面抗原的克隆和真核表达[D];华中农业大学;2010年
6 段龙川;产毒素多杀性巴氏杆菌重组沙门氏菌基因工程疫苗的研究[D];华中农业大学;2010年
7 龚瑞;粘附素ClfA和Cna对金黄色葡萄球菌乳腺炎的免疫保护研究[D];华中农业大学;2010年
8 刘源;猪胸膜肺炎放线杆菌双组分调控系统ΔnarQ/narP突变株构建及功能研究[D];华中农业大学;2010年
9 李善文;蟾蜍灵对大鼠肾小球系膜细胞增殖及凋亡的影响[D];南京医科大学;2009年
10 辛宁;PDX-1真核表达载体构建及其在大鼠骨髓间充质干细胞中的表达[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 郭俊明,陶莎,周俊宜,庄菁,谢金卫,罗超权;应用抑制性消减杂交方法分析结肠癌相关基因[J];癌症;2001年07期
2 伍志坚,吴小兵,侯云德;系列腺病毒伴随病毒载体的构建及表达β-半乳糖苷酶的研究[J];病毒学报;2000年01期
3 杨柳,段小军,戴刚,唐康来,谭祖键,周强,李起鸿;人间充质干细胞体外成骨诱导培养及其生物学特性变化[J];第三军医大学学报;2002年05期
4 邢雪荣,顾晓明,秦瑞峰,金岩;涎腺腺样囊性癌89例临床分析[J];第四军医大学学报;2002年03期
5 刘江伟,李开宗,窦科峰,马福成,王映梅;胰腺癌组织survivin和COX-2表达的相关性[J];第四军医大学学报;2004年07期
6 关晓峰,李瑞武,王玉新,葛淑芬;维甲酸对涎腺腺样囊性癌实验性肺转移的抑制作用研究[J];口腔颌面外科杂志;1997年03期
7 伍志坚,吴小兵,侯云德;具有AAV载体包装功能的重组HSV的产生[J];科学通报;1999年05期
8 吴轶群,张伟国,田臻,张志愿;E-cadher in-caten in复合体在涎腺腺样囊性癌中的表达[J];上海口腔医学;1999年03期
9 王丽辉,童坦君;神经生长因子[J];生物化学与生物物理进展;1992年01期
10 李晓军,秦浚川;细胞分化抑制因子(Id)研究进展[J];生物化学与生物物理进展;2004年10期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王翔;胡治平;卢伟;唐湘祁;张洁;李婷;曾六旺;;TGFβ1基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J];重庆医科大学学报;2009年01期
2 王晓通;李雷;钱倩;谢玉波;肖强;;转录因子E2F-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[J];广西医科大学学报;2010年02期
3 熊石龙;王前;郑磊;包杰;黄宪章;刘竞争;曾方银;裘宇容;;慢病毒携带shRNA对内皮细胞组织因子表达的抑制作用[J];中南大学学报(医学版);2008年08期
4 熊石龙;王前;包杰;郑磊;曾方银;裘宇容;;人组织因子RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J];检验医学;2008年02期
5 王霞莉;赵岐刚;司磊;;survivin基因靶向RNAi慢病毒载体的构建及意义[J];山东医药;2008年20期
6 宋达疆;黄晓元;杨兴华;肖目张;王双;;髓系触发受体-1基因RNAi慢病毒载体的构建及功能初步检测[J];中南大学学报(医学版);2009年10期
7 赵岐刚;司磊;田小侠;朱桂锋;王笑峰;刘霞;;慢病毒靶向携带Survivin siRNA抗肺腺癌的体内研究[J];现代生物医学进展;2010年02期
8 李祥勇;张美红;林观平;周克元;;靶基因Bi-1RNAi重组慢病毒载体的构建与鉴定[J];广东医学院学报;2010年05期
9 李伟霞;李咏梅;李光明;杜文才;张斌;程彬;朱泽;;构建用慢病毒载体介导的RNAi敲除ABCG2的Caco-2细胞模型[J];天津医科大学学报;2010年03期
10 孙梅;李金东;姜睿;高楠;金成彦;罗树立;王荣有;张兴义;;大鼠CD80基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[J];中国免疫学杂志;2009年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 曾东风;陈幸华;孔佩艳;徐葳;张曦;;PINCH-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定[A];第13届全国实验血液学会议论文摘要[C];2011年
2 宋达疆;黄晓元;任利成;杨兴华;肖目张;王双;;TREM-1基因RNAi慢病毒载体的构建及功能初步检测[A];中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编[C];2009年
3 褚文辉;赵海平;杨福合;邢秀梅;李春义;;梅花鹿Col X基因的RNAi重组慢病毒载体的构建及鉴定[A];2010中国鹿业进展[C];2010年
4 刘照亮;王彪;郭国祥;单秀英;王美水;庄福连;病理科;张声;;Tie2基因的RNAi慢病毒载体的构建及其干预恶性黑色素瘤细胞的体外研究[A];中华医学会整形外科学分会第十一次全国会议、中国人民解放军整形外科学专业委员会学术交流会、中国中西医结合学会医学美容专业委员会全国会议论文集[C];2011年
5 苏玉虹;张俊峰;;在哺乳动物细胞内诱导持续性的RNAi研究策略[A];中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛论文集[C];2010年
6 黄宪章;王前;郑磊;陈晓;熊石龙;包杰;丁海明;黄妩姣;庄俊华;;人CDK2基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
7 刘桂林;王志宇;张珊珊;;RNAi技术及其在抗禽流感病毒感染中的应用[A];全国动物生理生化第十一次学术交流会论文摘要汇编[C];2010年
8 宋少康;董雅娟;牛召珊;朱孟芝;柏学进;;RNAi技术及其研究应用进展[A];中国畜牧兽医学会动物繁殖学分会第十五届学术研讨会论文集(上册)[C];2010年
9 左洪亮;李海怡;高璐;钟国华;;RNAi作用机制及其在害虫防治领域的应用前景[A];公共植保与绿色防控[C];2010年
10 熊石龙;王前;郑磊;包杰;黄宪章;刘竞争;曾方银;裘宇容;;慢病毒携带shRNA对内皮细胞组织因子表达的抑制作用[A];中华医学会第七次全国检验医学学术会议资料汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 编译 李勇;RNAi药物研究或再升温[N];中国医药报;2011年
2 医学博士 科学松鼠会成员 致桦;美丽的干扰[N];中国经营报;2010年
3 徐铮奎;RNA干扰剂即将浮出市面[N];医药经济报;2004年
4 吕兴晨;创新催生产业 科技改变民生[N];人民政协报;2011年
5 蒋立明;建立研发基地 开发高新技术[N];绍兴日报;2009年
6 余志平;打开功能基因组学与未来治疗学的大门[N];中国医药报;2004年
7 李彬;今年技术发展呈八大趋势[N];科技日报;2005年
8 记者 吴伟农;世界十大科技突破[N];新华每日电讯;2001年
9 本报记者 韦绍锋 邢少文 康义文 康义瑶(实习) 驻地记者 胡勇;生物医药“海归”之惑[N];医药经济报;2004年
10 黄爱萍 徐积明;寻找“超日赶美”的突破口[N];苏州日报;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈正岗;沉默Id-1基因对腺样囊性癌生物学行为影响的实验研究[D];山东大学;2010年
2 张明芳;RNAi沉默Notch1、Notch2对人胶质瘤U251细胞增殖的影响及其机制[D];福建医科大学;2010年
3 罗远材;PKR/EIF2α信号传导通路与宫颈癌关系研究[D];天津医科大学;2010年
4 唐茂盛;MNU灌肠诱导大鼠结肠癌模型的构建及RNAi干扰CD133基因对结肠癌的影响研究[D];第二军医大学;2010年
5 连海峰;RNAi抑制NRP2表达对胃癌细胞SGC7901生长及侵袭转移的实验研究[D];重庆医科大学;2010年
6 王玉梅;人PTEN基因RNAi和RESC慢病毒载体的构建及其功能的相关性研究[D];郑州大学;2011年
7 杨志峰;应用慢病毒载体介导RNA干扰在MCF-7细胞中剔降IKKα基因和制备转基因小鼠模型的研究[D];第二军医大学;2006年
8 李长锋;靶向Survivin的RNAi联合放射治疗肺腺癌的研究[D];吉林大学;2010年
9 曾辉;RNAi敲除SMAC基因对肺癌细胞生长及顺铂耐药性影响的实验研究[D];华中科技大学;2011年
10 沈玉光;RNAi沉默MMP-2基因对食管癌细胞增殖影响的体内实验研究[D];天津医科大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张国峰;慢病毒载体介导的RNAi抑制牛整联蛋白亚基αv基因表达的研究[D];中国农业科学院;2011年
2 刘照亮;Tie2基因RNAi慢病毒载体的构建及其干预恶性黑色素瘤细胞的体外研究[D];福建医科大学;2011年
3 陈国利;RNAi对乳腺癌乙酰肝素酶表达的体内外实验研究[D];福建医科大学;2011年
4 毛贺辉;shRNA抑制FAK表达治疗大肠癌转移的体外实验研究[D];福建医科大学;2010年
5 赵留芳;RNAi介导survivin抑制鼻咽癌CNE-2裸鼠移植瘤的实验研究[D];昆明医学院;2011年
6 刘霞;腺病毒载体介导的RNAi抑制肺间质纤维化大鼠TGF-β1基因表达的研究[D];郑州大学;2010年
7 马玥;靶向hTERT的肝特异性RNAi载体的构建与鉴定[D];郑州大学;2010年
8 盛鹏程;绵羊Myostatin基因shRNA慢病毒载体的构建与鉴定[D];山东农业大学;2011年
9 赵颖杰;慢病毒介导的RNA干扰靶向TNF-α治疗小鼠胶原诱导性关节炎的研究[D];青岛大学;2009年
10 魏衍全;慢病毒介导shRNA稳定持续抑制口蹄疫病毒增殖的两类细胞系的建立[D];中国农业科学院;2011年
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