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《山东大学》 2010年
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神经病理性疼痛大鼠脊髓背角NF-κB及其下游相关因子表达的实验研究

张丽  
【摘要】: 目的:观察大鼠脊髓背角中NF-κB及其下游相关因子TNF-α、iNOS在坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)疼痛模型中表达的变化规律。 方法:健康雄性SD大鼠104只,体重220~280g,随机分为手术组(CCI组)和假手术组(Sham组)(n=52),CCI组采用结扎坐骨神经干的方法建立坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)模型,而Sham组仅暴露坐骨神经干,不予结扎。于CCI前1 d、CCI后1、4、7、14、21 d各时间点测定机械痛阈及热痛阈后立即处死大鼠,取腰髓,采用Western blot检测NF-κB的表达水平;采用实时荧光定量PCR和免疫荧光双标的方法分别测定NF-κB、TNF-a和iNOS的mRNA含量和蛋白表达。 结果: 1.行为学变化:CCI组大鼠术侧热痛阈及机械痛阈在术后第1d开始出现下降(P0.05),分别于术后4d和7d痛阈下降达到最低(P0.01),以后逐渐恢复,但至21d仍处于较低水平(P0.05)。 2.Western blot检测NF-κB的表达水平:CCI组大鼠术侧脊髓中NF-κB表达于术后4-7d显著增高,而CCI组健侧及Sham组术侧脊髓未有明显变化。 3.实时荧光定量PCR分别测定NF-κB、TNF-a和iNOS的mRNA表达:NF-κB和(?)NF-a mRNA水平于CCI后4 d开始增加(P0.05),7d达到高峰(P0.01),随后TNF-a迅速下降,而NF-κB于CCI后21天仍维持于较高水平(P0.05)。CCI组大鼠术侧脊髓中NF-κB水平和TNF-a的表达增加,明显高于对侧和Sham组,而iNOS于各组脊髓中的表达未见明显变化。 4.免疫荧光双标检测NF-κB、TNF-a和iNOS的蛋白表达:术后第7天的免疫荧光双标显示NF-κB和TNF-a在术侧脊髓背角存在共定位表达,与sham组相比,CCI组术侧脊髓背角可见大量的双标阳性细胞,而在CCI组和sham组中均未发现有明显的iNOS阳性细胞表达。 结论: 大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤可以导致神经病理性疼痛的发生,并能诱导大鼠脊髓背角NF-κB活化并能上调TNF-a的表达,参与神经病理性疼痛的调控过程;而脊髓背角iNOS的表达可能不参与神经病理性疼痛的调控过程。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R741

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【参考文献】
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