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《山东大学》 2010年
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糖尿病大鼠骨折愈合过程中BMP-7、TGF-β1、b-FGF变化的实验观察

赵锡武  
【摘要】: 背景糖尿病是以高血糖为特征的代谢紊乱,可影响骨、神经、肾等多器官组织。临床上糖尿病合并骨折患者很常见,延迟愈合或不愈合率及假关节形成率高,是临床医师面临的棘手问题。随着细胞生物学和分子生物学的研究进展,骨形态发生蛋白-7 (Bone morphogenetic protein-7,BMP-7)、转化生长因子-β1 (Transforming growth factor-β1, TGF-β1)碱性成纤维细胞因子(Basic fibroblast growth factor, bFGF)等细胞因子在骨折愈合过程中的作用日益受到重视,但对糖尿病骨折愈合过程中其含量及作用尚缺乏深入统一的认识。 目的通过测定糖尿病大鼠骨折后血清和骨折局部骨痂组织中BMP-7、TGF-β1 bFGF水平变化,探讨影响糖尿病骨折愈合的分子生物学机制,以为发现糖尿病骨折愈合新的治疗方法打下理论基础。 方法取清洁级Wistar雄性大鼠70只,体重230-270g,随机分为两组,每组35只。一组为实验组,腹腔内按60mg/kg注射链脲佐菌素(streptozotocin, STZ),破坏胰岛细胞,基础或随机血糖11.2mmol/L为糖尿病模型诱导成功;另一组为对照组,腹腔注射等量生理盐水。无菌操作下用线锯横行锯断两组大鼠左侧胫骨,复位、缝合、外固定。分别于术后第1、2、3、4、6、8周取静脉血,离心后保留血清;拍大鼠左下肢X线片观察骨折愈合情况;取骨折断端骨痂组织行HE染色光子显微镜下观察、免疫组织化学检测BMP-7、TGF-β1、bFGF;酶联免疫吸附分析法(ELISA)检测血清BMP-7、TGF-β1、bFGF,两组比较。利用SPSS 16.0统计软件进行统计,P0.05表示差异有统计学意义。 结果(1)术后第1、2、3、4、6、8周行X线片,实验组与对照组大鼠比较,骨痂生成量均减少。(2)HE染色、光子显微镜下观察实验组骨形成滞后。(3)2周BMP-7免疫组化灰度值两组间差异有统计学意义(实验组176.96±4.79;对照组139.22±6.40,P0.01);3周TGF-β1免疫组化灰度值两组间差异有统计学意义(实验组189.59±2.76;对照组166.74±1.33,P0.05);3周bFGF免疫组化灰度值两组间差异有统计学意义(实验组161.20±4.57;对照组121.59±6.23,P0.01).(4)ELISA法检测2周血清中BMP-7含量两组间差异有统计学意义(实验组1.77±0.23ng/ml;对照组3.46±0.24ng/ml,P0.01);3周TGF-β1血清含量两组间差异有统计学意义(实验组12.05±1.56ng/ml;对照组17.48±0.56ng/ml,P0.05);3周bFGF血清含量两组间差异有统计学意义(实验组2.53±0.22ng/ml;对照组4.25±0.24ng/ml,P0.01). 结论糖尿病大鼠骨折后血清及局部骨痂组织中BMP-7、TGF-β1、bFGF表达减少是导致糖尿病大鼠骨折延迟愈合的原因之一;TGF-β1、bFGF之间可能存在相互协同作用。
【学位授予单位】:山东大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R587.1;R683

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