收藏本站
《中国海洋大学》 2010年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

金乌贼繁殖、发育及荧光标志技术的研究

郝振林  
【摘要】: 本文以金乌贼为研究对象,采用实验生态学、组织学和生理学手段,研究了金乌贼亲体培育及人控环境下的繁殖行为;性腺发育和卵子发生的组织学;幼体金乌贼的生长发育及消化酶活性的变化;视觉发育;环境条件的变化对幼体金乌贼摄食行为的影响以及利用荧光染色剂(ALC)标志金乌贼内壳的放流标志技术。主要研究结果如下: 1.以采自日照岚山头金乌贼为研究对象,观察了养殖池内金乌贼亲体的交配和产卵行为,比较了不同产卵基附卵效果的差异,分析了金乌贼胴长、体重与怀卵量之间的关系,确定了金乌贼亲体的产卵节律。结果显示:亲体金乌贼求偶、追偶、交配、产卵、扎卵等行为明显;不同产卵基附卵效果差异显著,网绳产卵基和柽柳产卵基附卵效果较好,地肤草较差;金乌贼怀卵量与胴长和体重之间相关关系不显著,怀卵量浮动于500~1500粒之间,平均怀卵量为1114粒;产卵时间较有规律,主要集中于21时至次日凌晨3时。 2.以采自日照岚山头金乌贼亲体5尾(3雌,2雄)和金乌贼幼体39尾为研究对象,研究了亲体金乌贼生殖系统的结构特性以及金乌贼幼体发生性腺分化的时间。结果表明,金乌贼属雌雄异体。雄性生殖系统包括精巢、输精管、精囊、副性腺和精荚囊。精荚囊中充满了排列紧密的成熟精荚。精荚为棒球棒状,由体腔中的精子、接合体、螺旋发射器和帽子组成。精荚纵切面显示精子以“V”字型储藏于精荚体腔内,横切面显示精子呈螺旋状储藏于精荚体腔内,且在接近体腔中心位置螺旋状尤为明显。雌性生殖系统包括卵巢、输卵管、输卵管腺以及附属腺。幼体形成卵巢的时间约为孵化后7d,此时显微镜下可观察到卵巢中包含一些着色较浅的卵母细胞。根据卵母细胞的大小、卵母细胞核的形态及卵母细胞与滤泡细胞的结构变化,将金乌贼卵子发生划分为8个时期。 3.对自然海区及养殖池内采集的金乌贼受精卵进行了人工孵化,对孵化后金乌贼幼体生长发育的生物学指标进行了测量,同时分析了酸性蛋白酶、脂肪酶等消化酶随日龄的活性变化。结果显示:受精卵孵化率受水温影响差异不显著,但受盐度影响差异显著;小水体条件下金乌贼幼体的存活率偏低为81.4%,大水体条件下,存活率较高为100%;如初期饵料充足,幼体乌贼规格整齐,放养密度较低时不会出现自残现象;金乌贼幼体生长迅速,属异速生长型;胴宽朋同长、壳宽/壳长的比值随生长呈下降趋势;此外,金乌贼幼体的酸性蛋白酶和脂肪酶活性均随日龄的增加而升高,至孵化后210d,分别达158.3 U/mL和183.2 U/mL。 4.运用显微和超显微方法对金乌贼的视觉发育进行了研究。结果表明:金乌贼视网膜内四层结构清晰可见,由外向内依次为感杆层、次级感杆层、内界层、神经纤维层。1)感杆层,感杆层由许多排列规则、紧密的顶端突起组成,顶端突起外附有微绒毛。纵切面观察发现,微绒毛呈一定角度排列于每一个顶端突起周围,但顶端却未见微绒毛;横切面观察发现,顶端突起形状多样,呈圆形、纺锤形、三角形等不同形态。微绒毛呈放射状排列在顶端突起周围,但有些部位缺少微绒毛。视网膜发育早期阶段,微绒毛较短,且排列规律性欠佳,随生长发育,微绒毛逐渐变长,排列较有规律。此外,顶端突起中含有色素颗粒和小泡,小泡源于微绒毛,微绒毛失去小泡时便会萎缩。小泡内含有色素颗粒,当到达顶端突起时便会破裂并将色素颗粒释放出来。随着色素颗粒的增多,色素颗粒常会在顶端突起底部聚集,形成集合体。2)次级感杆层,次级感杆层中细胞质含有色素颗粒、小泡、线粒体、高尔基复合体和髓样体。线粒体和高尔基复合体数量随生长发育逐渐增多,髓样体规格和数量也随生长不断增加。随生长发育次级感杆层中细胞核不断穿越极板进入内界层,进入内界层的细胞核含有较多异染色质,形状变得细长且电子亮度加深。支持细胞数量随生长发育逐渐增多,其微绒毛嵌入感杆层。3)内界层,内界层中富含线粒体、核糖体、高尔基复合体、内质网和髓样体,且数量随生长发育明显增多。4)神经纤维层,神经纤维层内含有感受细胞轴突、神经纤维、线粒体、高尔基复合体和神经胶质细胞。神经纤维层的机能随生长逐渐趋于完善。另外,测量计算得知,感杆层厚度及单位面积微绒毛表面积的总量随生长与日龄呈幂函数关系,晶状体直径随生长与日龄呈线性关系。总结发现,金乌贼的视敏度随生长发育不断增加。 5.研究了不同底质(玻璃底、沙底),光照度(2501x、O.11x),视角(视野前方、上方、下方)对金乌贼摄食行为的影响。结果表明:不同底质条件下,金乌贼的摄食行为表现出显著差异,沙底条件下,金乌贼表现出明显的隐蔽行为;金乌贼具有较高的视敏度,在光照强度2501x与0.11x条件下摄食行为差异不显著;金乌贼摄食视野上方食饵的成功率较摄食视野下方或前方时低约20%;在光照度2501x条件下,胴背长43mm、48mm、56mm的金乌贼对食饵反应距离分别为:130.0cm、135.5cm、143.1cm,光照度降至0.11x时,分别为:115.0 cm、120.6 cm、126.3 cm. 6.以金乌贼为实验对象,利用荧光物质一茜素络合指示剂(Alizarin Complexone ALC)浸泡金乌贼幼体,对其内壳进行标志,所用荧光染色剂浓度为6.0~8.0×10-3%,浸泡染色时间24h。将标志组和对照组的金乌贼幼体分别暂养于1.5m×1.5m×1.5m水泥池30d,后将暂养的幼体放养于面积为2667m2的室外土池,并在60d后,将平均胴背长达91.4mm(对照组)、87.6mm(标志组)金乌贼幼体移入室内水泥池越冬,整个实验历时210d。实验期间,分别在标志后15、30、45、60、90、210d对金乌贼进行随机取样,解剖出内壳观察标志色保留状况并对金乌贼生长发育及存活率进行测量。结果显示,标志金乌贼的成活率为100%;方差分析显示,标志组和对照组金乌贼的生长发育差异不显著(P0.05);210d后内壳骨针部仍清晰保留初染时的半椭圆形淡紫色圆圈;本实验所采用的ALC内壳标志方法操作容易,可一次性大量进行标志处理,鉴别简单,无需借助其它仪器,肉眼便可直接观察到标志色,并且标志色保持率高,保留时间长,是一种理想的金乌贼放流标志方法。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S968.9

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 周维武,王世党,宋宗岩,王海涛,苏海岩;金乌贼人工育苗中应注意的问题[J];河北渔业;2005年03期
2 周维武,王世党,宋宗岩,王海涛,苏海岩;金乌贼人工育苗中应注意的问题[J];齐鲁渔业;2005年06期
3 邱高峰,堵南山,赖伟;日本沼虾雄性生殖系统的研究:Ⅲ.输精管内精荚的结构与形成[J];动物学报;1997年01期
4 韩松;郑小东;李琪;于瑞海;;金乌贼(Sepia esculenta)精子超微结构和低温损伤电镜观察[J];海洋与湖沼;2010年04期
5 赵厚钧,魏邦福,胡明,杜贞玺,吴廷山,王茂琴,张秀梅,韦柳枝;金乌贼受精卵孵化及不同材料附着基附卵效果的初步研究[J];海洋湖沼通报;2004年03期
6 周维武,王世党,宋宗岩,王海涛,苏海岩;金乌贼人工育苗技术要点[J];科学养鱼;2005年06期
7 赵连翠,蔡生力;对虾精荚和精子的研究进展[J];海洋科学;2005年02期
8 王珩;蝎人工饲养技术问答(四)[J];农村养殖技术;2002年02期
9 郑小东,杨建敏,王海艳,王如才;金乌贼墨汁营养成分分析及评价[J];动物学杂志;2003年04期
10 周维武;;金乌贼池塘养殖技术要点[J];科学养鱼;2007年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 肖述;郑小东;王昭萍;于瑞海;田传远;王如才;;金乌贼生长过程中海螵蛸的超微结构研究[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年
2 韩松;郑小东;林祥志;李琪;;金乌贼精子超微结构和超低温冷冻损伤研究[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年
3 肖述;郑小东;王如才;王昭萍;;金乌贼海螵蛸有机基质的分析研究[A];贝类学会第七次会员代表大会暨第十一次学术讨论会摘要[C];2003年
4 郑小东;杨建敏;王海艳;王如才;;金乌贼墨汁营养成分分析及评价[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学分会第十次学术讨论会论文集[C];2001年
5 丁银娣;王群;;红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)精荚形成组织学研究[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
6 康现江;程立均;穆淑梅;郭明申;赵晓瑜;;中华绒螯蟹精子膜蛋白的提取分离及部分生化性质研究[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
7 丁银娣;王群;;红螯螯虾雄性生殖系统的生化组成及精子代谢[A];中国动物学会甲壳动物学分会、中国海洋与湖沼学会甲壳动物学分会2004年甲壳动物学分会会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2004年
8 陈新军;刘必林;;世界头足类资源开发利用现状及其潜力[A];中国工程院第77场工程科技论坛·2008水产科技论坛——渔业现代化与可持续发展论文集[C];2008年
9 江星;陈道海;;拟目乌贼(Sepia lycidas Gray)繁殖行为学观察[A];中国南方十六省(市、区)水产学会渔业学术论坛第二十六次学术交流大会论文集(下册)[C];2010年
10 李太武;赖伟;堵南山;;三疣梭子蟹雄性生殖系统的超微结构研究[A];动物学专辑——上海市动物学会1996年年会论文集[C];1996年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 韩光亮 杨同玉 刘刚;金乌贼繁育技术获突破[N];青岛日报;2010年
2 津文;金乌贼人工繁育及增殖放流技术获通过[N];中国渔业报;2011年
3 中水;黄海所攻克金乌贼人工繁育及养殖技术[N];中国渔业报;2008年
4 记者 上官继东;金乌贼全人工育苗我国首获成功龄[N];中国食品质量报;2010年
5 唐何月;天津首次放流人工繁育金乌贼[N];中国渔业报;2010年
6 王君霞;金乌贼全人工育苗在我国首获成功[N];中国海洋报;2010年
7 马学信 王云中 王泗杰;山东增殖放流力度大[N];中国渔业报;2006年
8 本报记者;市发改委组织8家企业赴青岛烟台开展项目对接活动[N];闽东日报;2008年
9 齐鲁;山东省渔业专家建议:休渔期应延长一个月[N];中国海洋报;2007年
10 本报记者 马洪香 通讯员 夏洪雁;青岛九三:“送创新科技进企业”助产业升级[N];联合日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前7条
1 郝振林;金乌贼繁殖、发育及荧光标志技术的研究[D];中国海洋大学;2010年
2 管卫兵;锯缘青蟹Scylla serrata(Forsk(?)l)生殖系统结构与功能及精荚的人工移植研究[D];厦门大学;2003年
3 马文明;罗氏沼虾雄性生殖系统特异性蛋白(TAP)的分子特征和生理功能研究[D];浙江大学;2010年
4 张建设;曼氏无针乌贼养殖生物学特性和血细胞免疫功能研究[D];厦门大学;2007年
5 李诗豪;对虾性别相关基因筛选及其在性别分化中的表达调控研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2012年
6 郑小东;中国沿海乌贼类遗传变异和系统发生学研究[D];青岛海洋大学;2001年
7 李根亮;中华绒螯蟹精子核非浓缩的表现遗传机制[D];河北大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 韩松;金乌贼(Sepia esculenta)繁殖行为及交配模式的分子鉴定[D];中国海洋大学;2010年
2 王晓华;金乌贼角质颚、内壳与生长的关系及染色体研究[D];中国海洋大学;2012年
3 赵厚钧;金乌贼受精卵孵化及增殖附卵基质的试验研究[D];中国海洋大学;2004年
4 黄文虎;克氏原螯虾的精巢、输精管及精荚组织学与精巢周年变化研究[D];华中农业大学;2012年
5 叶德锋;曼氏无针乌贼精子包装、传递及储存研究[D];浙江海洋学院;2011年
6 李来国;长蛸生殖系统组织学和精卵发生的细胞学研究[D];宁波大学;2010年
7 王光昭;拯救民主——雷蒙·阿隆民主思想研究[D];天津师范大学;2002年
8 韦柳枝;山东日照近海金乌贼生物学研究[D];中国海洋大学;2005年
9 郝振林;金乌贼的行为习性及标志技术的研究[D];中国海洋大学;2007年
10 杨晓菁;抗冻蛋白基因的克隆及其在罗氏沼虾中的整合[D];华中师范大学;2004年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026