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甘油酯型鱼油的制备及活性研究

李金章  
【摘要】:n-3型PUFA(如EPA、DHA)在深海鱼油中含量丰富,其生理功能已经明确,具有预防心脑血管疾病、增进视觉系统及神经系统功能、抗癌、抗炎等重要作用。n-3型PUFA的甘油三酯型产品和磷脂型产品以其天然性受到了人们的青睐,但天然存在的甘油三酯鱼油中n-3型PUFA含量偏低,磷脂型鱼油的来源又受到限制,因此,将PUFA富集到甘油三酯和磷脂中受到了人们的广泛关注。在其活性方面,已有研究表明n-3型PUFA的甘油三酯型产品在消化吸收及生物利用度方面优于其乙酯型产品,但迄今未见将甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)、乙酯(EE)、磷脂(PL)型鱼油在同一实验体系中进行系统比较研究的报道,并且研究者们大多集中于研究高EPA、DHA摄食(1%-5%)对机体的影响,未见更低剂量EPA、DHA摄食的报道。本文首先以酶法制备了高EPA、DHA含量的TG型和磷脂型鱼油,然后在低EPA、DHA摄食条件下,研究了不同类型EPA、DHA脂质(TG、FFA、EE、PL)的活性。 本论文首先用一系列脂肪酶催化甘油三酯与乙酯酯交换(转酯法)反应,以产物甘油三酯的EPA、DHA含量为指标,最终优选出一种反应效果良好的脂肪酶(K酶)。以该酶为催化剂,在填充床反应器中,催化低含量PUFA鱼油与PUFA酸解反应。通过单因素试验研究了蠕动泵位置、储液池温度、反应液流速、底物摩尔比、反应时间、加酶量、反应温度对酸解反应的影响,最终确定了最佳工艺条件:蠕动泵安置在填充床下游,储液池温度与反应温度一致,反应液流速1ml/min,底物摩尔比2:1(FA/TG),反应时间72h,加酶量6%(酶/甘油酯,m/m),反应温度55℃。 随后,用一系列脂肪酶催化大豆磷脂与PUFA酯交换(酸解法)反应,以产物磷脂的EPA、DHA含量为指标,最终优选出一种反应效果良好的脂肪酶(lecitase ultra)。以lecitase ultra为催化剂,通过单因素试验,研究了不同因素对反应产物EPA、DHA含量的影响,最终建立了最佳的反应条件:采用溶剂(正己烷)体系,反应温度45℃,底物浓度40%(磷脂/正己烷,g/ml),加酶量200%(酶/磷脂,m/m),加水量50%(水/磷脂,ml/g),底物摩尔比(FA/PL)8,反应时间48h。 最后,制备了固定EPA/DHA比值的TG、FFA、EE、PL型鱼油,研究了低剂量不同形式鱼油短期喂食和长期喂食对小鼠脂质代谢及组织内DHA含量的影响,并比较了膳食总脂肪的高低对摄食鱼油效果的影响。结果表明:鱼油的减肥效果不仅受膳食总脂肪含量的影响,而且与其结构形式有关,磷脂型DHA的减肥效果较TG型优异。受膳食总脂肪含量的影响,摄食低剂量不同形式鱼油对动物血脂的降低程度不同,高脂膳食条件下鱼油的降血脂效果需要长时间才能产生积累效应。短期摄食低剂量不同形式的鱼油显著提高了小鼠肝脏DHA含量,而脑DHA含量的变化明显受膳食总脂肪含量的影响。


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