收藏本站
《中国海洋大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

龙须菜原生质体制备、融合和再生及孢子融合的研究

王钟霞  
【摘要】:龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)是一种属于红藻门的大型海藻,是重要的经济海藻,是主要的琼胶生产原料,它所产的琼胶被广泛用于食品、医药和生物工程等领域。至今,对龙须菜基础生物学的研究已有了很多成果,阐明了遗传、杂交、品系选育、种群结构等机理;从70年代初开始对龙须菜在生长和琼胶质量等方面也进行了深入的研究;龙须菜的大规模养殖逐渐从原来的北方低温海区(渤海、黄海)扩展到了南方高温海区(东海和南海部分海域)。但是由于目前龙须菜的栽培主要是采用营养繁殖的方式,种质退化仍是面临的问题,最终会阻碍龙须菜产业的发展,因此采用现代生物技术选育生长快、品质优、抗高温的龙须菜新品系仍是一项重要的课题。 植物细胞工程技术是人们较为熟知的现代生物技术,为遗传育种提供了有效的手段。本研究即采用了三种植物细胞工程技术对龙须菜展开了研究,主要方法和结论如下: 一.原生质体制备与再生技术。龙须菜属于低等藻类,其藻体结构可简单分为基部(固着器)、茎部与尖部三部分,没有真正意义上根、茎、叶的分化,本实验考虑到龙须菜不同部位生理、生化特性的差异,研究不同部位原生质体制备和再生的差异。原生质体的制备采用酶解法,原生质体的再生培养采用MES液体培养基。实验结果显示:龙须菜三个部位的最佳酶解时间、最大产率和原生质体的再生能力是有差异的,茎部的最佳酶解时间最短,产率最高,而尖部的再生率和活力最高,最后只有尖部制备的原生质体再生成植株。本研究对龙须菜原生质体制备和再生差异的研究为龙须菜原生质体的再生提供了重要参考,也为能利用原生质体融合等细胞工程技术进行龙须菜的良种选育提供了基础性研究资料。 二.龙须菜细胞融合技术。本研究一是通过原生质体融合获得龙须菜和真江蓠(Gracilaria vermiculophylla)的体细胞杂交物种,二是通过四分孢子融合获得两个物种的远缘杂交物种,这两种手段都是建立在细胞没有细胞壁,即没有融合屏障的前提下进行的。基于孢子融合同样的原理,本研究还进行了两个探索实验,一是将龙须菜的四分孢子(单倍体)与果孢子(二倍体)进行融合,从而获得三倍体孢子;二是将果孢子自融合,以期获得四倍体孢子。研究结果显示:PEG融合液对细胞有很大的毒性作用,原生质体对PEG融合液的耐受性要强于孢子对PEG融合液的耐受性;最后只有龙须菜和真江蓠四分孢子融合后的培养物发育成幼苗,幼苗的颜色呈淡绿褐色,更接近于真江蓠;幼苗中有个别藻株具有生长速度相对较快,分支相对较多的性状,但是否为融合体发育而成的藻株还需后期的染色体计数实验来验证。本研究为获得龙须菜与其他物种的远缘杂交产物提供了多种途径,也为获得龙须菜多倍体的研究提供了一种新思路,从而为能够利用细胞融合等细胞工程技术进行龙须菜的良种选育提供了基础性研究资料。 三.龙须菜染色体制片技术。本研究采用卡宝品红染色—压片法进行龙须菜单倍体染色体数目的观察与计数。研究结果显示:龙须菜的细胞呈现多核现象,并且不同细胞内细胞核的个数是不同的,观察范围内最少的有2个,最多的能达到十几个;通过染色体计数,发现单倍体龙须菜的染色体个数集中在15或16条。本研究为能够使用染色体计数方法判断融合体提供了技术支持,同样也为能更好地利用细胞融合等细胞工程技术进行龙须菜的良种选育提供了基础性研究。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S968.439

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨起简,周禾,孙彦,杨华,刘玉芬;豌豆染色体制片技术的比较研究[J];北京农学院学报;2003年03期
2 胡适宜;;谈谈有花植物的离体受精[J];大自然;2007年04期
3 黄婷婷;叶李艺;沙勇;吐松;肖宗源;李晓民;李永忠;李锦彬;;龙须菜提取琼胶碱处理工艺条件优化[J];化学工程与装备;2010年10期
4 沈继红,林学政,李光友,侯旭光,王斌,金德敏;细胞融合构建新型微藻及融合子的筛选和鉴定[J];高技术通讯;2001年06期
5 李容柏;应用滋养和包埋技术进行籼稻原生质体培养和植株再生(英文)[J];广西科学;1998年03期
6 许星鸿;王萍;赵素珍;;制备条斑紫菜原生质体的工具酶研究[J];淮海工学院学报(自然科学版);2007年03期
7 胡海燕,卢继武,周毅,杨红生;龙须菜在鱼藻混养系统中的生态功能[J];海洋科学集刊;2003年00期
8 张长远,吴定华;秘鲁番茄茎段原生质体再生成株的研究[J];华南农业大学学报;1998年03期
9 刘选明,官春云;油菜原生质体培养与融合技术的研究进展[J];湖南农业大学学报;1997年05期
10 孙振元;韩蕾;李银凤;;植物体细胞无性系变异的研究与应用[J];核农学报;2005年06期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 贺辉;贾春林;盛亦兵;陈本建;;草木樨愈伤组织的诱导及其原生质体的制备[J];山东农业科学;2008年04期
2 张海燕;王庆美;张立明;李爱贤;侯夫云;董顺旭;;多效唑对甘薯试管苗种质保存的影响[J];山东农业科学;2008年07期
3 李玉发;王佰众;栾天浩;刘洪欣;窦忠玉;何中国;;我国向日葵产业发展与科研工作的策略[J];山东农业科学;2010年11期
4 崔美;焦其庆;陈学森;陈晓流;;苹果叶片愈伤组织的诱导培养[J];山东农业科学;2012年03期
5 江力;孔小卫;吴晓杰;李少松;;烟草原生质体的分离纯化[J];安徽大学学报(自然科学版);2006年06期
6 项国华;;污水处理A/O生化工艺运行故障分析及对策[J];安徽化工;2010年S1期
7 宁国男;丁丹;马微娜;杨增美;姜长阳;;都儿菜组织培养及快速繁殖的研究[J];安徽农学通报;2007年18期
8 查向浩;易海艳;;二球悬铃木的组织培养和体外植株再生研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年13期
9 向太和,杨剑波,吴李君,吴家道,钟华鑫,梁海曼,颜秋生,张雪琴;水稻胚性悬浮细胞系建立的细胞学研究[J];安徽农业科学;1993年01期
10 郑乐娅,吴跃进,吴敬德,童继平;利用花药培养加速离子束介导转基因水稻后代的纯合速度[J];安徽农业科学;2001年01期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 毕玲;徐克东;刘凤栾;杨会芳;马男;赵梁军;;月季愈伤组织诱导及植株再生[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
2 蒋姝;孟金贵;崔光芬;贾文杰;王祥宁;吴丽芳;张艺萍;;植物离体诱变技术及其在百合育种中的应用研究进展[A];中国球根花卉研究进展2011[C];2011年
3 ;Dynamical Behavior in A Differential-Algebraic Algal Blooms Model[A];第二十七届中国控制会议论文集[C];2008年
4 李桂君;宋嘉隆;吴捷;;葛枣猕猴桃组培繁殖的研究[A];创新生物经济环境,培育战略新兴产业——第四届中国生物产业大会·2010海峡两岸重大生物技术产业化论坛会刊[C];2010年
5 尹艳娥;沈新强;全为民;;养殖池塘底泥反硝化菌修复的室内比较实验[A];有毒化学污染物监测与风险管理技术交流研讨会论文集[C];2008年
6 刘忠松;官春云;陈社员;;油菜芥甘种间杂交育种程序研究和种质创新[A];2004’中国作物学会学术年会文集[C];2004年
7 钟进义;林建维;钟宏;;海藻光敏色素糖蛋白对乳腺癌细胞侵润转移的抑制作用及信号调控的研究[A];第十届中国科协年会论文集(三)[C];2008年
8 尹艳娥;沈新强;晁敏;;反硝化技术对养殖池塘修复的研究[A];经济发展方式转变与自主创新——第十二届中国科学技术协会年会(第三卷)[C];2010年
9 王瑛;;离体培养技术在果树种质资源研究中的应用[A];中国科学技术协会第二届青年学术年会园艺学论文集[C];1995年
10 沙广利;宫象晖;黄粤;邵永春;李凌;束怀瑞;;苹果无融合生殖型矮化砧木研究进展[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 耿小丽;苜蓿单倍体、纯合四倍体的诱导及愈伤组织DNA含量变异的研究[D];甘肃农业大学;2010年
2 付学军;多管藻(Polysiphonia urceolata Grev)藻胆体中的藻胆蛋白特征分析[D];中国海洋大学;2010年
3 张新梅;甘蓝显性雄性不育基因Ms-cd1的精细定位[D];西北农林科技大学;2010年
4 荣立苹;东北地区野生百合种质资源及遗传多样性研究[D];沈阳农业大学;2010年
5 王洪亮;颗粒物对藻华生物的絮凝作用及其分形数值模拟研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
6 庞通;卡帕藻属和麒麟菜属的种苗选育与病害防治研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
7 王金霞;大型海藻微球体的生物反应器培养和应用基础研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2010年
8 刘福利;海带群体遗传分析及叶片长、宽性状QTL研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
9 王超;紫菜光合碳同化途径相关基因的表达分析[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
10 王兴翠;生姜离体叶片植株再生体系及多倍体诱导技术研究[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
2 梁梅荣;澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br的组织培养研究[D];华中农业大学;2010年
3 樊志明;萝卜甘蓝双二倍体雄性不育性的遗传及细胞学研究[D];华中农业大学;2010年
4 宋晓娣;笋用竹的组织培养研究[D];中南林业科技大学;2009年
5 唐磊;两种观赏竹的组织培养研究[D];中南林业科技大学;2009年
6 徐谦;拟南芥原生质体诱导愈伤组织的研究[D];山东农业大学;2010年
7 李智卫;海藻对不同促生菌生长的影响及应用[D];山东农业大学;2010年
8 杨茹;大蒜原生质体融合与培养技术研究[D];山东农业大学;2010年
9 刘昕;胀果甘草原生质体游离与培养体系的研究[D];甘肃农业大学;2010年
10 张丽娟;桃儿七离体培养体系的建立与发状根诱导研究[D];甘肃农业大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 项华,赵健忠,柏林;海藻多糖的抗突变性研究[J];癌变.畸变.突变;2001年01期
2 钟进义,孙丰运,张燕滨;A-CM海洋生物制剂对小鼠S_(180)肉瘤抑制作用研究[J];癌变.畸变.突变;1998年06期
3 付世景;宗良纲;孙静克;;镉污染板蓝根生理指标的变化及其对镉积累的研究[J];安徽农业科学;2007年03期
4 匡刚桥;刘臻;鲁双庆;刘红玉;张建社;肖调义;;GenBank数据库中鳜鱼微卫星位点的筛选及特征分析[J];动物学报;2007年01期
5 肖辉海,陈良碧;植物体细胞无性系变异育种[J];常德师范学院学报(自然科学版);2003年04期
6 张全胜;丛义周;曲善村;罗世菊;;海带良种化生产的研究现状与展望[J];水产科学;2006年08期
7 陈爱玉,王勇,倪国孚;桑树原生质体培养再生植株[J];蚕业科学;1995年03期
8 赵宏波,陈发棣;植物体细胞原生质体遗传转化研究[J];西北植物学报;2004年07期
9 陈发棣,赵宏波,房伟民,郭维明;菊科植物原生质体研究进展[J];西北植物学报;2005年09期
10 杨柏云,杨宁生,钟青萍;大花蕙兰营养器官及原球茎的解剖学研究[J];西北植物学报;1995年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 李莉;长牡蛎的分子标记筛选和遗传图谱构建[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2003年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 吴惠雄;海带、龙须菜轮养技术[J];齐鲁渔业;2004年11期
2 刘朝阳;孙晓庆;;龙须菜的生物学作用及应用前景[J];北京水产;2007年03期
3 刘朝阳;孙晓庆;;龙须菜的生物学作用及应用前景[J];养殖与饲料;2007年05期
4 ;我市在南澳县举办龙须菜栽培技术培训班[J];汕头科技;2008年03期
5 赖正锋;李华东;;龙须菜的产业化栽培和保鲜技术[J];长江蔬菜;2008年11期
6 张学成,王永旭,仵小南,费修绠,辛俭;不同产地龙须菜光合色素的比较研究[J];海洋湖沼通报;1993年01期
7 许国;;南澳龙须菜形成规模化养殖[J];水产科技;2003年03期
8 叶志文,黄云鲜;龙须菜的高产栽培技术要点[J];广西园艺;2005年04期
9 李伟新;黎绍贞;黄德调;;湛江内湾龙须菜生态的研究[J];湛江海洋大学学报;1975年02期
10 隋正红,张学成;龙须菜藻红蛋白亚基基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J];高技术通讯;2001年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 朱招波;孙雪;徐年军;;外源水杨酸对龙须菜抗高温生理的影响[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
2 周伟;隋正红;丁弘叶;;主要环境因素对龙须菜生活史各阶段发育的影响[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
3 毛玉泽;杨红生;周毅;王如才;;龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)对贝类养殖环境生态调控作用的实验研究[A];贝类学会第七次会员代表大会暨第十一次学术讨论会摘要[C];2003年
4 臧晓南;张学健;张学成;刘滨;徐涤;任雪莹;程晓洁;孟琳;;高温对野生型龙须菜与耐高温品种981龙须菜生长和生化组成的影响[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年
5 李敏;隋正红;易恒;张学成;朱明;阎斌伦;;龙须菜5.8SrDNA和ITS区的克隆分析及应用[A];庆祝中国藻类学会成立30周年暨第十五次学术讨论会摘要集[C];2009年
6 徐军田;高坤山;;阳光紫外辐射对龙须菜和石莼的影响[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年
7 李文红;姚建亭;王如才;段德麟;;龙须菜(Gracilaria lemaneiformis)选育品系及其野生型的ISSR指纹分析[A];中国海洋湖沼学会藻类学分会第七届会员大会暨第十四次学术讨论会论文摘要集[C];2007年
8 孙雪;杨官品;茅云翔;张学成;;海洋红藻龙须菜的表达序列标签的分析[A];中国藻类学会第十一次学术讨论会论文摘要集[C];2001年
9 蔡西栗;孙雪;邵旻玮;徐年军;;龙须菜对不同温度胁迫的应激生理响应[A];中国藻类学会第八次会员代表大会暨第十六次学术讨论会论文摘要集[C];2011年
10 隋正红;张学成;;龙须菜色素突变体藻红蛋白基因的克隆及分析[A];中国藻类学会第十一次学术讨论会论文摘要集[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 缪翼;龙须菜实现“零废弃”加工指日可待[N];中国渔业报;2010年
2 特约记者 林楚南;冬养海藻春收“黄金”[N];汕头日报;2006年
3 司凯姚守和;东港区龙须菜长势良好丰收在望[N];中国渔业报;2007年
4 本报记者 陈恒康;龙须菜养殖要量价而行[N];闽东日报;2007年
5 管玉如;市场前景广阔的“龙须菜”[N];广东科技报;2001年
6 本报记者 钟燕平;养殖龙须菜净化生态环境[N];农民日报;2003年
7 通讯员  许国 吴俊峰;龙须菜新品增产超10%[N];广东科技报;2006年
8 林楚南;渔民海中“寻宝”月入一万五[N];中国海洋报;2007年
9 ;渔民海中“寻宝”收入丰[N];中国渔业报;2007年
10 本报特约评论员、作家 肖复兴;吃东西有学问[N];人民日报海外版;2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙雪;龙须菜cDNA文库构建及EST和ISSR分析[D];中国海洋大学;2003年
2 毛玉泽;桑沟湾滤食性贝类养殖对环境的影响及其生态调控[D];中国海洋大学;2004年
3 隋正红;龙须菜藻红蛋白基因的研究[D];中国海洋大学;2001年
4 余江;大型海藻龙须菜对环境胁迫的响应及其在医学上的应用初探[D];暨南大学;2008年
5 程晓杰;龙须菜杂种优势株的筛选及AFLP分析[D];中国海洋大学;2008年
6 张善东;大型海藻龙须菜与赤潮微藻营养竞争的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2007年
7 徐军田;经济红藻龙须菜和海萝的光生物学研究[D];汕头大学;2008年
8 卢慧明;大型海藻龙须菜化学成分及其对中肋骨条藻化感作用研究[D];暨南大学;2011年
9 薛志欣;壳聚糖、琼胶糖的提取及其对藻胆蛋白缓释体系的研究[D];中国海洋大学;2007年
10 殷明焱;组织培养保存大型海藻种质的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王钟霞;龙须菜原生质体制备、融合和再生及孢子融合的研究[D];中国海洋大学;2011年
2 朱招波;外源水杨酸对龙须菜抗高温逆性的作用研究[D];宁波大学;2012年
3 鹿宁;高温胁迫下龙须菜抗氧化系统的研究[D];中国海洋大学;2012年
4 张璇;龙须菜高温胁迫响应的钙调素信号传导途径的研究[D];中国海洋大学;2012年
5 尤丽莉;龙须菜切段再生、原生质体分离培养及果孢子与四分孢子的收集和培养的研究[D];华南热带农业大学;2005年
6 王志远;龙须菜四分孢子的放散与发育研究[D];天津科技大学;2010年
7 顾颖慧;龙须菜热激蛋白70(HSP70)基因克隆及热激下的表达模式分析[D];中国海洋大学;2011年
8 张磊;龙须菜中活性物质的提取[D];山东轻工业学院;2012年
9 蔡西栗;龙须菜对温度和盐度逆境胁迫的生理响应[D];宁波大学;2012年
10 简建波;有机污染物对两种大型经济海藻的光合生理效应[D];汕头大学;2010年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026