收藏本站
《中国海洋大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

海参岩藻聚糖硫酸酯酶产生菌的筛选鉴定、发酵条件优化及酶学性质研究

王春霞  
【摘要】:本文以海地瓜岩藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)为诱导底物,从山东威海好当家集团的参池底泥中筛选得到一株能够有效的利用海参岩藻聚糖硫酸酯并分泌岩藻聚糖硫酸酯酶的海洋细菌,经鉴定为革兰氏阴性菌,16S rDNA分析确定为黄杆菌科细菌,并将其命名为Flavobacteriaceae.sp HDJ3,简称HDJ3。 证实了HDJ3的产酶实力后,选择DNS法这种最为经典的还原糖的检测方法对其所产的酶活力进行定量。 为提高该细菌的产酶活力,通过单因素-响应面实验对其产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的培养基成分进行优化,得出其最佳培养基组成为(w/v):海参岩藻聚糖硫酸酯0.28%,酵母粉0.09%, NaCl 2.09%,MgSO4 0.1%,CaCl_2 0.02%,FeSO4 0.002%,K2HPO4 0.02%。单因素试验确定了该菌株的最佳培养条件为:起始pH为7.5,500mL的三角瓶装液200mL,温度为25℃,转速150rpm,发酵时间为36h。优化后,海参岩藻聚糖硫酸酯酶活力为21.67U/mL ,比优化前提高了3.43倍。 HDJ3能够稳定的产生海参岩藻聚糖硫酸酯酶,该酶主要分泌于HDJ3的细胞内。在温度25℃,pH 7.5条件下发酵36h后,发酵液经离心、超声波破碎、超滤浓缩除盐、Q-sephaorse Fast Flow阴离子交换层析后得到少量的粗分离后的酶,并对该样品进行了酶学性质的研究,经过实验确定了酶的最适反应温度是30℃,最适反应pH是7.5。酶在0-4℃时较稳定,在4℃,放置24h后酶活剩余80.56%;但热稳定性不高,20℃时保温24h后酶活剩余47.44%。酶的pH稳定性范围为pH7.0-8.0。当底物中氯化钠浓度大于3%时酶活性较高。当离子浓度为0.1mmol/L时,NH_4~+、Ba~(2+)、Ca~(2+)、Li~(2+)、Mg~(2+)离子对酶反应的作用不明显; Mn~(2+)、K~+、Ni~(2+)有一定的抑制作用;Zn~(2+)、Cu~(2+)、Fe~(2+)、Al3+表现为明显的抑制作用,分别使酶活下降了32.27%、54.22%、51.65%和53.54%。当离子浓度达到1mmol/L时,K~+、Cd~(2+)、Ni~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)、Hg~(2+)、Cu~(2+)离子表现为明显的抑制作用,Ba~(2+)、Ca~(2+)离子对酶反应稍有促进作用。利用海参岩藻聚糖硫酸酯酶对岩藻聚糖硫酸酯进行酶解,得到一定分子量的高活性的寡糖,为岩藻聚糖硫酸酯的高值化利用和分子结构的解析打下了基础。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:TQ925

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨晓林,孙菊云,许汉年,刘晓慧,张翼伸,张绍伦;褐藻糖胶的免疫调节作用[J];中国海洋药物;1995年03期
2 辛现良,耿美玉,李桂玲,管华诗,李泽琳;海洋硫酸多糖911体外对HIV-1作用的研究[J];中国海洋药物;2000年03期
3 樊绘曾;海参:海中人参——关于海参及其成分保健医疗功能的研究与开发[J];中国海洋药物;2001年04期
4 陈伟强,李丽,章慧敏;褐藻多糖硫酸酯[J];江西化工;2005年02期
5 薛长湖,陈磊,李兆杰,辛梅,林洪,于广利;岩藻聚糖硫酸酯体外抗氧化特性的研究[J];青岛海洋大学学报(自然科学版);2000年04期
6 董平;薛长湖;李兆杰;徐杰;赵雪;蔡跃飘;张永勤;;岩藻聚糖硫酸酯低聚糖的制备及其抗氧化活性研究[J];中国海洋大学学报(自然科学版);2006年S1期
7 纪明侯,徐祖洪,郭玉彩;海带褐藻糖胶的研究[J];水产学报;1980年01期
8 马莉莎;张明;;褐藻多糖硫酸酯的研究进展[J];山东医药;2009年11期
9 王长云,管华诗;多糖抗病毒作用研究进展Ⅰ.多糖抗病毒作用[J];生物工程进展;2000年01期
10 王长云,管华诗;多糖抗病毒作用研究进展Ⅱ.硫酸多糖抗病毒作用[J];生物工程进展;2000年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王庭欣,秦淑贞,赵文,蒋东升,马晓彤,边庆荣;海带多糖对环磷酰胺诱发小鼠骨髓细胞微核率的抑制作用[J];癌变.畸变.突变;1999年02期
2 田兆丰;裘季燕;刘伟成;李永丹;刘德文;;植物及大型真菌抽提物抗植物病毒活性的研究[J];安徽农业科学;2007年24期
3 丁怀宇;;条斑紫菜绿斑病发病进程研究[J];安徽农业科学;2008年11期
4 杨宝灵;姜健;王冰;马堃;马秦;;海胆微量元素的光谱测定[J];安徽农业科学;2009年02期
5 孙居锋;李洪娟;;抗病毒植物有效成分研究[J];安徽农业科学;2009年07期
6 康静;闫清华;陈红歌;;1株产岩藻多糖酶淡水菌的筛选及鉴定[J];安徽农业科学;2009年13期
7 张秀坤;李八方;张朝辉;庄永亮;侯虎;陈丽;;岩藻聚糖硫酸酯的生物活性及作用机理研究进展[J];安徽农业科学;2009年27期
8 周向军;高义霞;;3,5-二硝基水杨酸比色法测定荠菜多糖含量的研究[J];安徽农业科学;2009年35期
9 康静;张品品;冯冲;陈红歌;;荧光假单胞菌岩藻多糖酶的生产和酶学性质研究[J];安徽农业科学;2010年18期
10 董俊芳;宋青春;陈秀敏;;农药三唑磷对刺参成参的急性毒性研究[J];安徽农业科学;2011年35期
中国重要会议论文全文数据库 前9条
1 谌素华;王维民;;褐藻岩藻聚糖硫酸酯调血脂活性研究进展[A];“科技创新与食品产业可持续发展”学术研讨会暨2008年广东省食品学会年会论文集[C];2008年
2 马世昱;严成钊;袁勤生;;羊栖菜中褐藻糖胶的组分分析研究[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
3 范克伟;;浅谈抗病毒中药研究概况[A];福建省农业工程学会2009年学术年会论文集[C];2009年
4 费星;王维民;;超滤在海洋活性多糖提取中的应用[A];2007中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨中国中部地区农产品加工产学研研讨会论文集[C];2007年
5 ;Screening for Anti-virus Substance from Plant Extracts[A];中国植物病理学会2004年学术年会论文集[C];2004年
6 王君敏;胡元亮;王德云;张靖;刘静;;硫酸化修饰提高枸杞多糖增强免疫活性的研究[A];中国畜牧兽医学会2010年学术年会——第二届中国兽医临床大会论文集(上册)[C];2010年
7 相子春;蒋岩;郭顺星;;天然产物中抗HIV药物筛选方法研究进展[A];第一届全国中西医结合防治艾滋病学术研讨会论文汇编[C];2003年
8 姜波;关紫烽;;傅立叶变换红外光谱法快速鉴别海参质量[A];第十二届全国分子光谱学学术会议论文集[C];2002年
9 曹会娟;王新峦;何蓉蓉;栗原博;;中药抗流感的实验研究进展[A];2012年中国药学大会暨第十二届中国药师周论文集[C];2012年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 柳风祥;中药提取物免疫调节作用的研究及多糖的提取分离鉴定和分子量测定[D];山东农业大学;2009年
2 陈士国;几种海洋动物酸性多糖的结构和活性研究[D];中国海洋大学;2010年
3 常耀光;海参岩藻聚糖硫酸酯及其酶解产物的制备、结构与活性研究[D];中国海洋大学;2010年
4 金波昌;池塘养殖刺参(Apostichopus japonicus)食物来源的稳定同位素法研究[D];中国海洋大学;2010年
5 李兆杰;壳聚糖快速制备技术及降血脂、免疫增强活性研究[D];中国海洋大学;2010年
6 董秀萍;海参、扇贝和牡蛎的加工特性及其抗氧化活性肽的研究[D];江苏大学;2010年
7 张月杰;刺参岩藻多糖对神经干/前体细胞的增殖作用及其机制研究[D];山东大学;2010年
8 赵欢;刺参Apostichopus japonicus (Selenka)对温度胁迫响应分子机理的基础研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
9 王天明;刺参Apostichopus japonicus (Selenka)夏眠分子机理的基础研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2011年
10 聂永心;黄伞子实体多糖的分离纯化、结构鉴定及生物活性的研究[D];山东农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张袁;温特曲霉PZ322产岩藻多糖酶的液态发酵条件研究[D];安徽农业大学;2010年
2 白楠;凡纳滨对虾Litopenaeus vannamei、仿刺参Apostichopus japonicus免疫增强剂使用频率和免疫疲劳的研究[D];中国海洋大学;2010年
3 李晓林;海参虫草复剂对糖尿病大鼠肾脏保护作用及其机制的研究[D];中国海洋大学;2010年
4 杜以帅;酶解海藻产物对刺参(Apostichopus japonicus)肠道菌群和免疫相关因子的影响[D];中国海洋大学;2010年
5 宗成利;硫酸岩藻寡糖和鼠李寡糖的合成[D];中国海洋大学;2010年
6 李刚;刺参(Apostichopus japonicus)主要营养成分和生理变化对养殖水体中关键环境因子的响应研究[D];中国海洋大学;2010年
7 徐端红;莪术油注射液体外对猪细小病毒抑制作用研究[D];新疆农业大学;2010年
8 刘伟伟;抗病毒中药的固有免疫调节机理研究[D];成都中医药大学;2010年
9 霍晓青;抗新城疫病毒中药活性组分筛选的研究[D];河北农业大学;2011年
10 毛华;马尾松花粉多糖及其酯化物对脾细胞“Ca~(2+)”_i及细胞因子调控的研究[D];山东师范大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 林光恒,刘明星,孙国琼;阻遏诱变剂镉在海洋生物中传递的物质及作用机理的研究(Ⅲ)海参提取液[J];癌变.畸变.突变;1998年01期
2 钟进义,张燕滨,孙丰运;A-CM海洋生物制剂的抗突变性研究[J];癌变.畸变.突变;1999年01期
3 胡人杰,于苏萍,姜卉,王士贤;刺参酸性粘多糖与可的松联用方案对小鼠肿瘤的抑制作用[J];癌症;1997年06期
4 程忠玲;海带中褐藻多糖硫酸酯的提取及抗凝血活性的测试[J];承德石油高等专科学校学报;2003年03期
5 何云海;汪秋宽;刘红丹;;用复合酶酶解提取海带岩藻聚糖硫酸酯的工艺研究[J];大连水产学院学报;2006年01期
6 刘辉明 ,蔡传光 ,占介明;海参治疗再生障碍性贫血10例[J];广西中医药;1984年02期
7 钟正贤,黄树莲,周桂芬,陈学芬,陈晓军;海赐宝口服液的药理作用[J];中国海洋药物;1994年04期
8 张尔贤,俞丽君,肖湘;鼠尾藻多糖清除氧自由基作用的研究——Ⅰ. 对O_2与OH抑制活性的评价[J];中国海洋药物;1995年01期
9 张全斌,徐祖洪;褐藻多糖硫酸酯化学研究的进展[J];中国海洋药物;1996年04期
10 张尔贤,俞丽君;鼠尾藻多糖清除氧自由基作用的研究 Ⅱ UVc鼠尾藻对多糖抗氧化作用的影响[J];中国海洋药物;1997年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 姚兰;蒋文强;杨海涛;;酸法提取海带中岩藻聚糖硫酸酯的研究[J];食品研究与开发;2006年07期
2 张婷;汪秋宽;刘建伟;谢智芬;史永富;何云海;;用弱碱性阴离子树脂分离纯化海带岩藻聚糖硫酸酯工艺的研究[J];大连水产学院学报;2008年02期
3 刘承颖;王维民;;半叶马尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的提取工艺研究[J];食品科技;2008年05期
4 董平;薛长湖;李兆杰;徐杰;赵雪;蔡跃飘;张永勤;;岩藻聚糖硫酸酯低聚糖的制备及其抗氧化活性研究[J];中国海洋大学学报(自然科学版);2006年S1期
5 谌素华;王维民;;褐藻岩藻聚糖硫酸酯生物活性研究进展[J];食品工业科技;2009年06期
6 何云海;汪秋宽;苏唱;;用复合酶酶解—热水浸提法提取裙带菜孢子叶粉岩藻聚糖硫酸酯的工艺研究[J];大连水产学院学报;2007年01期
7 何云海;汪秋宽;张婷;史永富;;海带岩藻聚糖硫酸酯酶解工艺及分离和纯化研究[J];沈阳农业大学学报;2007年02期
8 刘承颖;王维民;;半叶马尾藻中岩藻聚糖硫酸酯的提取纯化及抗氧化研究[J];食品研究与开发;2008年11期
9 史永富;汪秋宽;张甜翠;;鼠尾藻中岩藻聚糖硫酸酯提取工艺及纯化研究[J];现代食品科技;2009年05期
10 谌素华;王维民;刘辉;李春莲;刘承颖;;马尾藻岩藻聚糖硫酸酯纯化及降血脂功能研究[J];食品与发酵工业;2010年05期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 常耀光;薛长湖;唐庆娟;王静凤;武晓琳;;海地瓜岩藻聚糖硫酸酯乙醇型胃溃疡预防活性的研究[A];2010年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
2 何云海;汪秋宽;张婷;刘丹;任丹丹;;超声波辅助酶解法提取海带岩藻聚糖硫酸酯的研究[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
3 王春霞;段高飞;唐庆娟;常耀光;薛长湖;;细菌Flavobacteriaceae sp. CZ1127产海参岩藻聚糖硫酸酯酶的发酵条件优化[A];2010年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨华南地区农产品加工产学研研讨会论文摘要集[C];2010年
4 何云海;汪秋宽;赵丹;高飒;任丹丹;;裙带菜岩藻聚糖硫酸酯分离纯化及结构分析[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年
5 张婷;汪秋宽;刘建伟;史永富;何云海;谢智芬;;弱碱性阴离子树脂分离纯化海带岩藻聚糖硫酸酯工艺的研究[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
6 谌素华;王维民;;褐藻岩藻聚糖硫酸酯调血脂活性研究进展[A];“科技创新与食品产业可持续发展”学术研讨会暨2008年广东省食品学会年会论文集[C];2008年
7 吴元锋;毛建卫;刘士旺;尤玉如;李亚飞;;裙带菜中岩藻聚糖硫酸酯的提取、组分分离及分析[A];中国食品科学技术学会第五届年会暨第四届东西方食品业高层论坛论文摘要集[C];2007年
8 任丹丹;汪秋宽;张甜翠;何云海;刘远平;;海带岩藻聚糖硫酸酯对小鼠肉瘤S_(180)的抑制作用[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年
9 赵雪;薛长湖;李八方;;自由基降解海带岩藻聚糖硫酸酯及其清除自由基活性机理的研究[A];2008年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2008年
10 张珣;王静凤;杨玉红;常耀光;薛长湖;;海参岩藻聚糖硫酸酯抑制小鼠肿瘤转移及其作用机制的研究[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
中国重要报纸全文数据库 前2条
1 柯继;海洋食品精深加工项目取得阶段性进展[N];中国食品报;2010年
2 丁志习;山东海洋食品精深加工获新突破[N];中国渔业报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前3条
1 陈安进;不同分子质量海带岩藻聚糖硫酸酯抗血栓活性及机理研究[D];中国海洋大学;2012年
2 蔡跃飘;海带岩藻聚糖硫酸酯的结构研究[D];中国海洋大学;2005年
3 王莹;岩藻聚糖硫酸酯酶产生菌的筛选、酶学性质研究及酶解产物抗氧化活性预测系统的建立[D];中国海洋大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 张翠玉;Flavobacteriaceae sp.CZ1127产岩藻聚糖硫酸酯酶的分离纯化、性质研究及应用[D];中国海洋大学;2013年
2 刘旭;海藻渣中岩藻聚糖硫酸酯的提取、纯化及其体外活性研究[D];安徽农业大学;2013年
3 郭欣;超声处理对海洋岩藻聚糖硫酸酯分子链及结构和抗氧化活性影响的研究[D];浙江大学;2014年
4 董诗竹;海带低分子量岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性研究[D];中国海洋大学;2011年
5 王春霞;海参岩藻聚糖硫酸酯酶产生菌的筛选鉴定、发酵条件优化及酶学性质研究[D];中国海洋大学;2011年
6 李芳;不同分子量海带岩藻聚糖硫酸酯消化吸收、免疫及抗病毒活性的比较研究[D];中国海洋大学;2012年
7 曲桂燕;五种褐藻岩藻聚糖硫酸酯提取纯化及其功能活性的比较研究[D];中国海洋大学;2013年
8 周林林;海带渣中岩藻聚糖硫酸酯提取条件和硫酸基含量测定方法研究[D];中国海洋大学;2013年
9 王景峰;萱藻岩藻聚糖硫酸酯的制备及其抗血栓活性的研究[D];中国海洋大学;2013年
10 武晓琳;分子量对海参岩藻聚糖硫酸酯活性和消化吸收的影响研究[D];中国海洋大学;2011年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026