收藏本站
《中国海洋大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

低温超大孔温敏水凝胶的制备、生物相容性及其作为对虾类淋巴细胞3D培养体系的可行性研究

党奇峰  
【摘要】:水凝胶由于其物理性质类似于天然组织而成为生物学和医学领域研究的热点。对水凝胶制备材料的筛选是将其应用于生物材料领域是否成功的关键因素之一。壳聚糖(Chitosan, CS)是一种优良的天然高分子材料,具有无毒性、生物相容性和生物可降解性等优点,随着温敏水凝胶在生物材料领域的发展,CS温敏水凝胶受到广泛的关注。本文以CS和α,β-甘油磷酸钠(α,β-glycerophosphate,α,β-GP)为原料,用物理交联的方法合成了CS-α,β-GP超大孔温敏水凝胶;通过改变CS与α,β-GP的比值考察了其成胶机理;通过改变凝胶制备过程中的各种参数及对该凝胶成胶前后和成胶过程中的性质测定,找出了影响该水凝胶性质的参数和规律,并根据该规律制备出具有低温凝胶性质的的适合海洋动物组织培养的CS-α,β-GP超大孔温敏水凝胶;重点考察了该水凝胶的生物相容性、体内外降解性及其作为对虾类淋巴细胞三维培养体系的可行性。 通过改变制备过程中CS与α,β-GP的比例,制备了一系列在低温下为可流动的溶胶状态,温度升高到一定值时,变为固体的凝胶状态的温敏水凝胶,SEM照片显示该凝胶具有相互连通的超大孔结构。制备过程中CS/α,β-GP比值越大,成胶温度(Tgel)越高。流变学检测结果显示CS-α,β-GP体系在振荡应变为0.1 %~100%的范围内具有线性粘弹性。低温下,体系的复合粘度较小,具有良好的注射性能,随着温度的升高,复合粘度迅速增大,可以形成原位凝胶。CS-α,β-GP体系凝胶过程中在600 nm处的吸光度(OD600)经历一个先降低后升高的过程;肉眼观察,在成胶初期为乳白色液体状态,随着时间延长,逐渐变为透明,此时体系仍为流动状态,成胶后又转变为不透明的乳白色。pH值在成胶过程中会有所下降。红外光谱,核磁P谱和热重分析都表明CS与α,β-GP通过离子交联反应生成具有温敏性的CS-α,β-GP水凝胶。 全面的了解CS-α,β-GP温敏水凝胶的性质,有助于我们在此基础上设计符合特定应用要求的水凝胶。为了充分了解制备过程中参数的变化对CS-α,β-GP性质的影响,本论文还研究了除CS与α,β-GP的比值外,包括CS分子量、脱乙酰度、溶液浓度、溶剂的种类和浓度、及体系中混有的无机盐的种类和浓度的改变对CS-α,β-GP温敏水凝胶的性质的影响。结果显示CS的动态粘滞度对CS-α,β-GP温敏水凝胶的pH值、Tgel、成胶时间、及孔径没有明显的影响。CS的脱乙酰度越高,或者CS溶液的浓度越大,制备得到的CS-α,β-GP体系的pH值也越高,Tgel越低,同一温度下的成胶时间也越短,形成的CS-α,β-GP温敏水凝胶的孔径也越小、越均匀。CS溶液的溶剂不同或CS溶液中加入NaCl、CaCl2、MgCl2、KCl,都会对CS-α,β-GP体系的pH值、OD600、Tgel、成胶时间和成胶后扫描电镜下的状态造成一定的影响。CS溶液的溶剂相同时,溶剂浓度越低,CS-α,β-GP体系的pH值越高,4℃条件下OD600越低,Tgel下的OD600越高,Tgel越低,相同温度下的成胶时间也越短。盐的浓度对水凝胶性质的影响以NaCl为例,CS溶液中加入的NaCl的浓度越高,4℃条件下OD600越低,Tgel下的OD600越高,Tgel越高,同一温度下成胶所用的时间越长。 CS-α,β-GP温敏水凝胶在水中和PBS中的平衡溶胀率(Equilibrium Swelling Ratio, ESR)受制备过程中CS与α,β-GP比值的影响,比值越大,ESR也越大。溶胀动力学结果表明CS-α,β-GP温敏水凝胶的溶胀过程很快,水分通过对流的方式进入凝胶主体。样品在37℃下的溶胀速度要大于25℃下的溶胀速度,但最终的ESR差别不大。体外酶解实验得出在37℃下,生理pH范围内,CS-α,β-GP温敏水凝胶经胰蛋白酶和溶菌酶降解6 h后,失重率分别达到66.14 %和64.26 %。CS-α,β-GP温敏水凝胶的胰蛋白酶解动力学和SEM照片表明该凝胶的酶解过程主要是主体溶蚀的过程。 根据前面的实验结果,本论文设计了一种成胶温度为25℃,成胶过程中pH值始终保持在生理范围之内的超大孔CS-α,β-GP温敏水凝胶。通过对几种灭菌方法的比较发现,用紫外线照射的方法对CS粉末灭菌2小时,不仅能达到有效的灭菌效果,还不会影响到CS的性质。 通过小鼠皮下注射实验、急性毒性实验、溶血实验、细胞毒性实验等检测了CS-α,β-GP温敏水凝胶的生物相容性。CS-α,β-GP温敏水凝胶原位注射到小鼠背部皮下后,会迅速的形成两个突起的皮丘。注射后的实验组小鼠全部成活,饮食、活动正常,无发炎现象;在观察期内,体重与对照组相比没有明显的变化,初步说明CS-α,β-GP具有良好的生物相容性。在观察期内的11个取样时间,血液各项指标检测结果都在正常值范围之内。组织学检测表明,CS-α,β-GP温敏水凝胶的组织相容性良好。注射到小鼠体内的CS-α,β-GP温敏水凝胶会随着时间的延长在体内逐渐降解,注射后45 d,凝胶被降解成很多小块,60 d后,凝胶被完全降解。原位注射植入小鼠体内5 d和20 d的CS-α,β-GP温敏水凝胶的SEM照片显示,植入水凝胶周围的细胞紧密贴附在凝胶表面,且随着时间的延长,注射部位的白细胞、纤维细胞能浸润到凝胶的内部,近一步证明CS-α,β-GP温敏水凝胶具有良好的生物相容性。急性毒性实验结果说明CS-α,β-GP温敏水凝胶对小鼠并无明显的毒副作用。红细胞溶血实验结果表明CS-α,β-GP温敏水凝胶材料在浓度为1 %的条件下溶血率均低于5 %;蛋白吸附实验结果说明该水凝胶与蛋白质的结合属于物理结合,且处在一个较低的吸附水平,证实了其具有良好的血液相容性。MTT检测结果显示,CS-α,β-GP温敏水凝胶样品的提取液没有表现出明显的细胞毒性, MEF的相对增值率在80 %以上。CS-α,β-GP温敏水凝胶用DMEM浸泡处理3次(10 min/次)后,MEF细胞的相对增值率达到100%。 以中国对虾(penaeus chinensis)类淋巴细胞为模型,进行CS-α,β-GP温敏凝胶作为对虾细胞三维培养体系的可行性研究,结果发现培养在CS-α,β-GP温敏凝胶表面和包埋在CS-α,β-GP温敏凝胶内部的中国对虾类淋巴组织都会有细胞迁出和生长,且在培养20天后仍然具有很好的活性,传代后仍能生长。 综上所述,本论文通过改变CS与α,β-GP的比例探讨了超大孔CS-α,β-GP温敏水凝胶的成胶机理;研究了影响CS-α,β-GP超大孔温敏水凝胶性质的因素和规律;并根据该规律设计了具有低温凝胶特性的温敏水凝胶,证实了该凝胶具有良好的生物相容性,体内可降解性以及作为对虾细胞三维培养体系的可行性。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R318.08

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 张小猛,徐春玲,庞利民,张晓光,高野雅彦;成熟视网膜神经节细胞三维培养[J];吉林大学学报(医学版);2004年02期
2 翟茂林,哈鸿飞;水凝胶的合成、性质及应用[J];大学化学;2001年05期
3 吴国杰;吴炜亮;李金蔓;周家华;崔英德;;聚乙烯醇-壳聚糖水凝胶制备与溶胀行为的研究[J];广东工业大学学报;2006年03期
4 高青雨,张玉娟,俞贤达;温度及pH敏感性N-乙烯基吡咯烷酮与丙烯酸β-羟基丙酯共聚物/聚(丙烯酸)互穿网络水凝胶的合成及其性能研究[J];高分子学报;2001年03期
5 卓仁禧,张先正;温度及pH敏感聚(丙烯酸)/聚(N-异丙基丙烯酰胺)互穿聚合物网络水凝胶的合成及性能研究[J];高分子学报;1998年01期
6 刘锋,卓仁禧;温度及pH敏感水凝胶的合成及其在生物大分子控制释放中的应用[J];高分子材料科学与工程;1998年02期
7 任静,哈鸿飞;聚两性电解质及其水凝胶的研究进展[J];高分子通报;2000年03期
8 吴国杰;崔英德;;壳聚糖/聚醚半互穿网络水凝胶的合成与力学性能的研究[J];功能材料;2005年09期
9 刘郁杨,范晓东,曹哲;β-环糊精/环氧氯丙烷水凝胶中水的存在状态及其溶胀特性[J];功能高分子学报;2001年02期
10 李伟,孙建中,周其云;适用于酶包埋的高分子载体材料研究进展[J];功能高分子学报;2001年03期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 陈森;生物质热解特性及热解动力学研究[D];南京理工大学;2005年
2 吕颖慧;壳聚糖脂复合物纳米微粒的构建及其生物学效应[D];中国海洋大学;2006年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 高树理,柴孟贤,张明习;透波复合材料的研究进展[J];工程塑料应用;2000年05期
2 陈晓媛,王港,黄锐;毛细管中聚合物熔体不稳定流动的研究进展[J];工程塑料应用;2003年03期
3 李小兰;王久芬;黄福生;;PBT-PHB热致性液晶共聚酯的合成研究[J];工程塑料应用;2005年11期
4 李春华;齐暑华;张剑;王东红;武鹏;;导电高分子在电磁屏蔽材料中的应用[J];工程塑料应用;2005年11期
5 沈彦涵;王启飞;戚嵘嵘;刘翘楚;周持兴;;丙烯酸共聚物增容PA6/(E/VAL)共混体系的研究[J];工程塑料应用;2007年01期
6 高亚萍;;阻燃电缆绝缘材料聚氯乙烯热解特性研究[J];工程塑料应用;2007年03期
7 宁方林;蒋智强;黄险波;刘思扬;;PC/PBT合金体系热老化行为研究[J];工程塑料应用;2009年08期
8 阳范文;赵治国;何浏炜;;几种聚乙烯毛细管流变性能的研究[J];工程塑料应用;2011年01期
9 卢晶;林强;;DCC缩合酯化法合成水杨酸壳寡糖酯[J];安徽农业科学;2010年04期
10 张秀丽;刘庆慧;;对虾原代细胞培养研究现状[J];安徽农业科学;2010年10期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 邹勇;黄雅钦;夏宇正;;明胶与天然聚合物复合制备创伤敷料的研究进展[A];第五届中国功能材料及其应用学术会议论文集Ⅱ[C];2004年
2 程贤甦;林俊鸿;马海峰;;片式聚吡咯铝电解电容器的研究进展[A];第六届中国功能材料及其应用学术会议论文集(2)[C];2007年
3 曾东海;熊国宣;;有机磁性结构型化合物的研究进展[A];第六届中国功能材料及其应用学术会议论文集(3)[C];2007年
4 孙慧;林建明;吴季怀;;聚丙烯酸钾/羧甲基纤维素钠半互穿网络水凝胶的两步水溶液合成及其药物释放[A];第六届中国功能材料及其应用学术会议论文集(5)[C];2007年
5 林健;牟国栋;杨雪;;木质素磺酸钙接枝聚丙烯酸吸水树脂制备研究[A];第七届中国功能材料及其应用学术会议论文集(第2分册)[C];2010年
6 柳明珠;詹发禄;刘守信;卞凤玲;;智能高分子材料[A];甘肃省化学会成立六十周年学术报告会暨二十三届年会论文集[C];2003年
7 陈莉;董晶;张金树;;温度敏感型高分子复合材料的制备及性能研究[A];复合材料:生命、环境与高技术——第十二届全国复合材料学术会议论文集[C];2002年
8 苗晓光;;智能调温负离子牛奶蛋白纤维的试制研究[A];第十届陈维稷优秀论文奖论文汇编[C];2007年
9 ;Sodium Alginate Improves the Characterristics of Methylcellulose-Based Thermo-Sensitive Hydrogels[A];Proceedings of a Combination of the 4th China/USA Joint Chemical Engineering Conference and the 3rd China/Japan Joint Chemical Engineering Symposium[C];2005年
10 陈国华;晋治涛;王娟;孙明昆;;羧甲基壳聚糖水凝胶对环境的敏感性质及其包覆药物缓释性能的研究[A];中国化学会第十一届胶体与界面化学会议论文摘要集[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李佳;g-HA/PLA生物复合材料的制备与性能研究[D];哈尔滨工程大学;2009年
2 张静;油酰壳聚糖纳米粒作为抗肿瘤药物载体的研究[D];中国海洋大学;2010年
3 傅深渊;竹材液化、树脂化反应动力学及其生成物的性能[D];北京林业大学;2011年
4 余世锋;低温和超低温预冷下大米淀粉凝沉特性及应用研究[D];哈尔滨工业大学;2010年
5 钟发春;聚氨酯/聚硅氧烷IPN阻尼弹性体研究[D];中国工程物理研究院;2001年
6 徐晖;聚甲基丙烯酸—泊洛沙姆水凝胶的研究[D];沈阳药科大学;2001年
7 范浩军;侧链液晶聚酰亚胺的合成、表征及性能研究[D];四川大学;2001年
8 朱秀玲;高性能聚芳酰胺类材料的设计、合成及性能研究[D];大连理工大学;2002年
9 陈晓婷;阻燃性液晶共聚酯及其与PET的原位复合物[D];四川大学;2002年
10 苑同锁;导电聚合物的合成及其红外反射性能在节能材料中的应用[D];四川大学;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 唐京禧;农业废弃物热解特性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 喻伟;免疫磁珠的制备及其初步应用[D];华中农业大学;2010年
3 朱孔远;生物质与煤共热解实验研究[D];河南理工大学;2010年
4 王伟挺;基于ATRP技术与“click”反应制备环形聚N-异丙基丙烯酰胺及其热敏性研究[D];长春理工大学;2010年
5 邬迪华;芳香聚酰胺复合膜的表面温敏性修饰[D];浙江理工大学;2010年
6 吕诚业;羊皮革的吸水性能研究[D];郑州大学;2010年
7 霍萃萌;黄腐酸基β-环糊精醚的合成及对Cu~(2+)、Cd~(2+)的吸附性能[D];郑州大学;2010年
8 魏巍;极低酸中稻壳水解特性及转化乙酰丙酸的实验研究[D];郑州大学;2010年
9 王艳;城市污泥及其与煤混烧的燃烧特性研究[D];长沙理工大学;2010年
10 康传真;镶嵌壳聚糖微球的壳聚糖温敏水凝胶的制备及作为药物释放载体的应用研究[D];中国海洋大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 杨荣杰,韩颂军;辐射交联聚乙烯醇水凝胶研究[J];北京理工大学学报;1997年04期
2 杨剑,滕凤恩;纳米材料综述[J];材料导报;1997年02期
3 张作法,时连根,李有贵,毛香娟;家蚕壳聚糖的研究进展[J];蚕桑通报;2004年03期
4 刘世英,吴清基,王鹤忠,陈仲林;医用甲壳质与壳聚糖纤维的开发现状及前景[J];产业用纺织品;1994年03期
5 吴李国,章悦庭,胡绍华;聚乙烯醇水凝胶的制备及应用进展[J];东华大学学报(自然科学版);2001年06期
6 韩怀芬,钱俊青,王平;甲壳胺-明胶共混体系的研究[J];东海海洋;2001年02期
7 田菲,鲁开化,艾玉峰,田蕾;聚丙烯酰胺凝胶的组织相容性实验[J];第四军医大学学报;1999年11期
8 翟茂林,哈鸿飞;水凝胶的合成、性质及应用[J];大学化学;2001年05期
9 徐健,金鑫荣;天然高分子甲壳素/壳聚糖在生物和医药方面的应用[J];大学化学;1994年03期
10 陈建,左武松;壳聚糖的应用研究综述[J];淮北煤炭师范学院学报(自然科学版);2004年02期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 康传真;程晓杰;陈西广;;壳聚糖及其衍生物温敏水凝胶研究进展及其应用[J];天然产物研究与开发;2010年05期
2 胡晓兵;王志维;;温敏水凝胶Dex-PCL-HEMA/PNIPAAm的生物学性能[J];现代医药卫生;2010年04期
3 章永望;赵会英;张娜;;新型可注射温敏水凝胶的制备及其释药性能[J];北京化工大学学报(自然科学版);2007年05期
4 韩雪;刘洪臣;王东胜;苏方;鄂玲玲;吴霞;;可注射壳聚糖温敏水凝胶对犬骨髓基质细胞生物学行为的影响[J];上海口腔医学;2011年02期
5 吉秋霞;邓婧;于新波;徐全臣;许晓燕;;壳聚糖基温敏水凝胶对牙周常见致病菌的抑制作用[J];上海口腔医学;2009年04期
6 魏亚超;刘皈阳;;温敏水凝胶在药物缓控释技术中的应用[J];中国新药杂志;2011年09期
7 赵江;蒋国强;孙佳丽;张阔;丁富新;;释药用壳聚糖温敏凝胶体内外形态与溶蚀降解研究[J];高校化学工程学报;2010年03期
8 孙佳丽;林莹;蒋国强;昝佳;丁富新;;载有溶菌酶微球的凝胶埋植剂的释药特性[J];清华大学学报(自然科学版);2008年03期
9 孙佳丽;林莹;蒋国强;昝佳;丁富新;;载有溶菌酶微球的凝胶埋植剂的释药特性[J];清华大学学报(自然科学版)网络.预览;2008年03期
10 沈海蓉,钟明康,李中东;智能水凝胶在药物控释系统中的应用[J];中国药学杂志;2004年07期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 李景峰;郑启新;郭晓东;全大萍;;新型可注射温敏水凝胶复合BMP-2活性肽修复大鼠[A];中华医学会第三次骨质疏松和骨矿盐疾病中青年学术会议论文汇编[C];2011年
2 孙大辉;崔艳;疏官胜;马荣堂;张梅;;聚乙二醇(PEG)/聚乙烯醇(PVA)温敏水凝胶的制备及温敏特性研究[A];2009中国功能材料科技与产业高层论坛论文集[C];2009年
3 张雪雁;顾其胜;;壳聚糖温敏凝胶的制备及其影响因素[A];2006年上海市医用生物材料研讨会论文汇编[C];2006年
4 赖毓霄;全大萍;官习鹏;廖凯荣;;PNIPAAm-b-PLA共聚物的合成及其水凝胶化性质[A];2005年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2005年
5 周惠云;陈西广;刘成圣;;壳聚糖温敏水凝胶药物载体的制备及特性研究[A];中国化学会第26届学术年会功能高分子科学前沿分会场论文集[C];2008年
6 赵瑾;马玉净;蔡京哲;赵蕴慧;袁晓燕;;烷基化壳聚糖温敏凝胶研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
7 魏杰;贾俊峰;鲁敬雄;洪华;吴凡;刘昌胜;;用于骨再生的微/大孔磷酸钙镁多级孔支架的研究[A];生物材料与再生医学的现状与未来——2010年第十届上海地区医用生物材料研讨会论文摘要汇编[C];2010年
8 张和平;;表征一种具有特殊大孔Al_2O_3小球的孔结构[A];中国颗粒学会2002年年会暨海峡两岸颗粒技术研讨会会议论文集[C];2002年
9 吴琪琳;顾书英;张志海;潘鼎;;试制一种表面富含大孔的新型粘胶基活性碳纤维[A];第五届中国功能材料及其应用学术会议论文集Ⅲ[C];2004年
10 李洁莹;陈金龙;费正皓;张全兴;;大孔吸附树脂对苯氧乙酸的吸附行为研究[A];中国化学会第12届反应性高分子(离子交换与吸附)学术研讨会会议论文摘要预印集(一)[C];2004年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 王云志;华夏四大孔庙[N];中国老年报;2000年
2 贺敏;梅山矿采矿场改进凿岩工艺[N];中国冶金报;2007年
3 李有仁;开拓旋律铿锵奏响[N];中国矿业报;2003年
4 邓钰;浅谈智能包装材料与应用[N];中国包装报;2010年
5 潘林梅;大孔树脂吸附技术在中药复方制剂应用中需注意的问题[N];中国中医药报;2005年
6 王迅;紫金山铜矿:强化井巷施工质量管理[N];地质勘查导报;2007年
7 戴善奎 余向华;“地球名探”张建东[N];四川日报;2006年
8 ;出台三制度 严把质量关[N];中国黄金报;2007年
9 蔡凭忠 韦幸生;铜坑矿水平孔凿岩技术试验成功[N];中国有色金属报;2007年
10 记者 雷和平通讯员 权斌;一个“重生”农信社的管贷经[N];金融时报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 党奇峰;低温超大孔温敏水凝胶的制备、生物相容性及其作为对虾类淋巴细胞3D培养体系的可行性研究[D];中国海洋大学;2011年
2 黄健;水凝胶理论及表面强化交联应用研究[D];浙江大学;2005年
3 吉秋霞;原位可注射壳聚糖基温敏水凝胶缓释体系的构建及其在牙周病治疗领域的应用研究[D];中国海洋大学;2009年
4 王前明;基于新颖桥分子基团的稀土发光杂化材料体系的设计、构筑、组装[D];同济大学;2007年
5 沈红;抗磺胺药抗体的制备与免疫分析法的研究[D];中国农业大学;2005年
6 章亚东;环己烯环氧化催化剂的合成、表征及其催化性能研究[D];郑州大学;2003年
7 周鑫;新型蛋白质色谱介质的研究[D];天津大学;2003年
8 龚波林;单分散树脂及其在生物大分子分离中的应用[D];西北大学;2003年
9 李坤平;大孔树脂吸附黄芩黄酮和布渣叶黄酮的应用基础研究[D];广州中医药大学;2010年
10 丁之恩;西洋参干制机理及茎叶果深加工的研究[D];中南林学院;2002年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 宋霞;倍他米松微球/壳聚糖透明质酸钠温敏水凝胶复合体系的构建与其缓释性能考察[D];兰州大学;2012年
2 魏亚超;磁性温敏水凝胶的制备和应用[D];河北北方学院;2011年
3 赵庆生;壳聚糖温敏水凝胶及其膜制剂性能研究与生物学评价[D];中国海洋大学;2009年
4 康传真;镶嵌壳聚糖微球的壳聚糖温敏水凝胶的制备及作为药物释放载体的应用研究[D];中国海洋大学;2010年
5 王晔;壳聚糖水溶性衍生物及其温敏水凝胶细胞活性、相容性评价[D];中国海洋大学;2007年
6 徐天宇;聚乙烯醇/聚乙二醇新型温敏水凝胶的制备及性能研究[D];吉林大学;2012年
7 刘雯;纳米金/聚N-异丙基丙烯酰胺复合纳米水凝胶的合成表征及应用[D];厦门大学;2009年
8 张鸿儒;PNIPA/Fe_3O_4复合水凝胶的辐照制备与表征[D];郑州大学;2009年
9 赵佩;可注射型壳聚糖温敏水凝胶负载利福平微球的研究[D];兰州大学;2010年
10 于典;以PNIPAm系凝胶为载体的复合相变材料的制备和研究[D];中南大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026