收藏本站
《中国海洋大学》 2011年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

花生耐低温种质筛选及相关差异表达基因鉴定

唐月异  
【摘要】:花生是世界重要的油料作物和经济作物,特别在广大发展中国家,是重要的食用植物油和食用蛋白源。温度是影响花生生长发育,限制花生种植地理分布的重要因素之一。筛选耐低温花生种质,并分离耐低温相关基因对于培育高产稳产的耐低温型花生品种,进一步提高花生单产,扩大花生种植面积,具有十分重要的意义。 本研究首先利用55份花生种子进行低温吸胀萌发试验,统计露白率及芽长/种长,筛选耐低温种质,并通过近红外光谱技术测定油酸、亚油酸、棕榈酸、脂肪、蛋白质及蔗糖含量,分析花生种子吸胀期间耐低温性与各项品质性状之间的相关性。结果表明:参试花生种质在低温胁迫条件下,露白率≥80%的种质有3份、80%露白率≥70%的种质有3份、70%露白率≥60%的种质有5份、露白率60%的种质有43份(占总数78.18%);芽长/种长0.5的种质有3份、0.5芽长/种长0.4的种质有5份、0.4芽长/种长0.3的种质有3份、芽长/种长0.3的种质有43份。其中,多粒型种质A4的耐低温性最强,露白率为95%、芽长/种长为1.50。种子的露白率与芽长/种长呈极显著正相关、与脂肪含量呈显著正相关,芽长/种长与亚油酸含量呈显著正相关、与油酸含量呈显著负相关,但这两项指标与百仁重相关性均不显著。 将耐低温性最强的花生种质A4,分别进行2℃吸胀处理和田间正常播种时的温度15℃进行吸胀处理,取吸胀1h,6h和24h的花生样品,提取花生种子的总RNA,并分离与纯化mRNA,采用PCR-SelectTM cDNA Subtraction Kit构建3个低温胁迫下的抑制差减杂交文库(SSH cDNA文库),分别标记为A库、B库和C库。3个文库分别随机挑选500个克隆进行测序,成功测序的条数分别为336,429和466。经序列组装,A库获得8个unigenes,其中7个contig和1个singlet;B库获得18个unigenes,其中14个contig和4个singlet;C库获得193个unigenes,其中73个contig和120个singlet。通过BLAST2GO软件与GenBank中的非冗余蛋白数据库(non-redundant protein database)进行比对和功能注释,其中,A库7个unigene有相关同源信息,B库14个unigene有相关同源信息,C库132个unigene有相关同源信息。基因功能主要涉及到转录调控、能量代谢、胁迫防御、细胞结构、细胞保护、信号转导和生物合成等方面。 从3个文库中获得的重组克隆中,根据比对和注释的结果,挑选了14个感兴趣的基因,验证其在正常温度处理下和低温胁迫处理下,基因的差异表达情况。用荧光实时定量PCR的方法进行验证,采用2-ΔΔCt的方法,每个反应重复3次取平均值。经验证,这14个基因在2℃低温胁迫处理条件下的表达量是对照处理15℃情况下的2.85-12.85倍不等。 选取4个经验证确实与植物耐低温相关的基因,利用RACE的方法获得全长序列,它们是LEA(胚胎发育晚期丰富蛋白)基因、Oleosin(油质蛋白)基因、NAC转录因子以及MYB转录因子。其中,MYB基因是首次在花生上分离出来。经序列分析发现,本实验中所克隆LEA序列长度为1526bp,编码155个氨基酸;Oleosin序列长度为760bp,编码176个氨基酸;NAC序列长度为1406bp,编码301个氨基酸;MYB序列长度为1365bp,编码344个氨基酸。并用生物信息学软件分别预测了其编码蛋白的物理化学性质,功能结构域,活性位点以及二级、三级结构。这些工作为通过gene knock-in和gene knock-out方法对这些基因进行功能分析乃至通过分子育种手段培育花生耐低温品种奠定基础。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S565.2

【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 翟立娜;;黑花生管理技术[J];现代农村科技;2011年14期
2 程乐庆;程鹏云;贺秀萍;;花生品种比较试验初报[J];农家参谋(种业大观);2009年07期
3 车引;;花生无公害栽培技术[J];农家之友(理论版);2011年02期
4 孙春梅;李军华;;三个特色花生新品种[J];乡村科技;2010年06期
5 彭斐;;花生油涨势难抑[J];乡村科技;2011年07期
6 郑雪峰;;花生高产栽培技术[J];农家参谋(种业大观);2011年06期
7 马寅斐;何东平;王文亮;刘丽娜;徐同成;陶海腾;杜方岭;;我国花生品种加工特性与品质评价技术研究进展[J];中国食物与营养;2011年06期
8 陈亚琴;蔡平元;宋汝国;蔡成坤;;花生品种及使用有机肥与产量及蛴螬发生危害的关系[J];上海农业科技;2011年04期
9 邱志坚;陈秋香;;花生新品种贺油系列种植适应性试验[J];农业研究与应用;2011年04期
10 严海燕;宗成志;景聪慧;单世华;;花生黄曲霉抗性与类受体蛋白激酶的相关性分析[J];华北农学报;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 许红民;王强;白雪娟;钟定荣;曹秀堂;张金萍;丁彦青;姚开泰;;大肠癌差异表达基因的筛查[A];中华医学会病理学分会2005年学术年会论文汇编[C];2005年
2 夏艳勋;林矫矫;赵传壁;陈益;贺桂芬;;日本血吸虫性别差异表达基因的筛选及研究[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第七次研讨会论文集[C];2008年
3 山蓝;王葆利;张继澍;;柿果实成熟期间差异表达基因的研究[A];中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)[C];2003年
4 李吕力;李晓峰;罗永坚;王敏莉;肖继东;;重症肌无力患者免疫相关基因差异表达的基因芯片研究[A];中华医学会第十三次全国神经病学学术会议论文汇编[C];2010年
5 杜雪梅;柳哓兰;崔玉芳;宋良文;孙启鸿;;基因表达谱芯片分析放射性肺损伤早期差异表达基因[A];第七届全军防原医学专业委员会第五届中国毒理学会放射毒理专业委员会学术会议论文汇编[C];2004年
6 朱明姬;姜日花;李增勋;;抑制性削减杂交技术筛选神经鞘氨醇磷酸胆碱对人真皮成纤维细胞差异表达基因[A];中华医学会第十二次全国皮肤性病学术会议论文集[C];2006年
7 杨宇飞;邬冬华;;中药抗癌症恶病变基因芯片研究[A];2002中医药博士论坛——中医药的继承、创新与发展[C];2002年
8 周津;刘芝华;王秀琴;丁芳;周传农;赵峻;张汝刚;吴旻;;抑制消减杂交与反Northern结合分离食管癌差异表达基因的初步研究[A];面向21世纪的科技进步与社会经济发展(下册)[C];1999年
9 夏丁;陈志强;朱旋;叶章群;;特发性高草酸尿症大鼠肝脏差异表达基因的筛选研究[A];第十六届全国泌尿外科学术会议论文集[C];2009年
10 赵晓龙;王宣春;董雪红;胡仁明;;采用cDNA微阵列杂交技术对糖尿病肝脏基因表达谱的研究[A];2006年中华医学会糖尿病分会第十次全国糖尿病学术会议论文集[C];2006年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 王锡荣;寿光蔬菜电子市场推出花生品种[N];新农村商报;2009年
2 山东省昌乐县农业局 贾登三;选留好花生种四关键[N];河北科技报;2010年
3 本报记者 宁钦广 通讯员 杨洁 安静;“因地制宜 空间有序”种花生[N];山东科技报;2011年
4 邓卫华 潘林青;“一亩花生四亩粮”好景不再[N];国际商报;2011年
5 石家庄辛集市植保站 陈书乔;浅谈花生烂果的原因及对策[N];河北农民报;2011年
6 辽宁省阜新蒙古族自治县老河土乡党委书记 吴国民 阜新蒙古族自治县老河土乡乡长 姜长友;老河土:打造全国花生第一乡[N];中国县域经济报;2011年
7 梁春英 司洋 本报记者 沈旭;黑土地上的花生科技特派团[N];锦州日报;2011年
8 YMG记者 姜晓 通讯员 崔潇文 李大宏;莱阳花生项目位列其中[N];烟台日报;2011年
9 湖南省土肥所花生课题组 李林;介绍一个高油花生品种湘花120[N];湖南科技报;2004年
10 本报通讯员 周晓冬 赵炳长;情系花生三十载[N];黄冈日报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 唐月异;花生耐低温种质筛选及相关差异表达基因鉴定[D];中国海洋大学;2011年
2 王方;胎肝细胞对HBV感染应答基因的初步分离和鉴定[D];第三军医大学;2004年
3 陈学峰;水稻杂种与亲本之间差异表达基因的分离克隆及表达研究[D];武汉大学;2004年
4 肖琳;转化生长因子β1刺激肝星状细胞差异表达基因研究[D];新疆医科大学;2006年
5 张文玲;鼻咽癌发病不同阶段分子标志物的鉴定及差异表达基因相互作用网络的构建[D];中南大学;2009年
6 李建祥;氡染毒动物差异表达基因的高通量筛选[D];苏州大学;2007年
7 邱洁;人类肥胖相关新基因LYRM1的生物学特性及功能研究[D];南京医科大学;2009年
8 简华刚;皮肤创伤愈合相关差异表达基因的克隆、筛选及鉴定[D];重庆医科大学;2002年
9 袁红雨;水稻幼苗中褐飞虱应答基因的克隆及功能分析[D];武汉大学;2003年
10 赵建;α-amanitin的分离鉴定及其致病机理研究[D];四川大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 杨娜;盐碱胁迫下大豆根和叶的表达谱分析[D];吉林农业大学;2011年
2 蒋峥;乳腺癌基因芯片实验数据分析与挖掘[D];重庆医科大学;2011年
3 高艳平;蓖麻成熟期胚抑制消减cDNA文库构建及其差异表达基因分析[D];华中农业大学;2009年
4 郝震锋;免疫抑制小鼠阿萨希丝孢酵母菌皮肤感染差异表达基因的初步筛选[D];第三军医大学;2004年
5 吴扬;应用cDNA-AFLP技术分离安吉白茶阶段性返白过程的差异表达基因[D];湖南农业大学;2010年
6 谢文娟;泡球蚴感染小鼠肝脏基因表达谱的分析[D];新疆大学;2010年
7 张惠;沙门氏菌诱导家蝇幼虫SSH文库构建及差异表达基因分析[D];吉林农业大学;2011年
8 林凯;正加速度(+Gz)重复暴露致大鼠脑损伤差异表达基因的筛选[D];第三军医大学;2002年
9 王玉鹏;基于基因芯片的基因表达模式分析[D];厦门大学;2007年
10 王宇;大鼠脊髓损伤与修复相关基因:生物信息学分析及SCIRR10分子特性[D];吉林大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026