收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

海洋半乳寡糖芯片制备及寡糖与凝集素相互作用研究

王玉峰  
【摘要】:本论文以红藻来源的半乳聚糖,κ-,τ-,λ-卡拉胶、琼胶、硫琼胶以及化学处理得到的脱硫κ-,λ-卡拉胶为原料,采用弱酸降解制备各种寡糖混合物,通过低压凝胶渗透色谱(Low pressure gel permeation chromatography, LPGPC)技术获得各系列寡糖单体37个,其中9个为首次获得。通过电喷雾离子化质谱(Electrospray ionization mass chromatography, ESI-MS)方法对所得寡糖结构和序列进行了确证。以制备的半乳寡糖为原料,通过还原胺化法将其与具有氨基的磷脂(DHPE)偶联,制备了40个拟半乳寡糖脂,其中14个为首次获得。 以制备的拟糖脂为原料,考察了四种构建糖芯片的方法,即薄层点样仪制备微型糖芯片、手动点样仪制备微型糖芯片、薄层点样仪制备min-糖芯片和全自动芯片点样仪制备高密度糖芯片的优缺点。结果表明,mini-糖芯片适合于海洋糖芯片的构建,而微型芯片适用于糖与蛋白结合实验的条件摸索。利用mini-糖芯片技术和ELISA实验方法对各半乳寡糖与RCA_(120)结合,首次研究发现RCA_(120)特异性识别非还原端为Galβ1,4anGal结构的寡糖,进一步研究还发现:(1)非还原端Gal的C-2或C-6位被硫酸基取代后,可增强其与RCA_(120)的亲和力;(2)非还原端Gal的C-4位被硫酸基取代后,会失去与RCA_(120)的亲和力,除去C-4位硫酸基后亲和力将显著升高;(3)非还原端Gal的C-3位被α-Gal取代后,对RCA_(120)亲和力无影响,但被α-L-anGal取代后,将完全失去与RCA_(120)结合能力。各半乳寡糖与RCA_(120)的亲和力顺序为:Gal6Sβ1,4anGal(L)-R Gal2Sβ1,4Gal2S6S-R Galβ1,4anGal(L)-R Galβ1,4GlcNAc-R Galβ1,4anGal(D)-R Galβ1,4Gal-R≈Galα1,3Galβ1,4Gal-R Gal4Sβ1,4anGal(D)-R≈Galβ1,3GlcNAc-R≈Neu5Acα2,6Galβ1,4GlcNAc-R≈anGal(L)α1,3Gal6Sβ1,4anGal(L)-R (R代表单糖或寡糖)。ECL特异性识别含有乳糖胺(Galβ1,4GlcNAc-R)结构单元,非还原端Gal羟基被任何其它基团取代后,都影响其亲和力,但非还原端为Galβ1,4anGal(L or D)结构的寡糖与ECL有微弱的结合力。 此外,利用构建的mini-糖芯片技术还研究了30种半乳寡糖与Galectin-3的亲和力差异。结果表明:Galectin-3除了识别常规Galβ1,4GlcNAc结构外,与琼胶七糖以上寡糖(Galβ1,4anGal(L)-R)以及三至五糖的硫琼胶寡糖(Gal6Sβ1,4anGal(L)-R)有较强的亲和力。该结果为硫琼胶寡糖作为Galectin-3抑制剂,用于新型抗肿瘤药物的开发提供了基础。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 蒋可,陈宇东,钟晋贤;高压液相色谱法分离寡糖的对氨基苯甲酸乙脂衍生物[J];中国生物化学与分子生物学报;1993年03期
2 陈洪,刘晶星;用于制备结合菌苗的细菌荚膜寡糖大小测定[J];国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册;2000年03期
3 邓斌,郑光植,沈月毛,罗建平,甘烦远;人参培养细胞中活性六糖的分离及结构鉴定[J];生物化学与生物物理学报;1996年06期
4 赵益斌;刘迪;徐贵丽;左国营;张青;;从青阳参提取的新寡糖(英文)[J];西南国防医药;2007年04期
5 王雪松,郑芸,方积年;降血糖多糖及寡糖的研究进展[J];药学学报;2004年12期
6 郭丽民;张汝学;贾正平;;寡糖的药理作用和机制研究进展[J];中成药;2006年09期
7 郑兴东,王雪琦,高霄飞,赵小林,由振东,路长林,何成;抑郁症大鼠各脑区甘丙肽含量的变化及盐酸氟西汀对其的影响[J];第二军医大学学报;2002年06期
8 张汝学,樊俊杰,贾正平,孔令媛,马慧萍,李茂星,任俊,王娟;地黄中寡糖的提取分离工艺研究[J];解放军药学学报;2005年01期
9 王延鹏;迟延青;姬胜利;;抗病毒的寡糖药物[J];生命的化学;2007年06期
10 易永芬,陈代伦,苗德林,林晓;胃癌细胞寡糖结构的变化与淋巴结转移的关系[J];诊断病理学杂志;1999年04期
11 杜昱光;化学与生命学科交叉新领域——糖生物学与寡糖工程[J];中国微生态学杂志;2000年05期
12 王维通,陈琪娟,柴文刚;寡糖的荧光标记高效液相色谱分析[J];中国生物化学与分子生物学报;1988年02期
13 黄丽萍,刘宗明;几丁寡糖、壳寡糖的应用与开发[J];中国微生态学杂志;1998年03期
14 许清泓,刘家志;浅谈功能食品的监督[J];口岸卫生控制;1999年01期
15 王筱兰,魏东芝,陈少欣,俞俊棠;半乳糖寡糖在体内和体外对双歧杆菌生长的影响[J];中国微生态学杂志;2000年01期
16 甄攀;粉防己多糖的提取工艺优选[J];张家口医学院学报;2004年05期
17 李翊,王海青;卡拉胶寡糖对放射损伤小鼠T细胞功能和亚型的影响[J];中华放射医学与防护杂志;2005年01期
18 杨钊;范莹;;氚标记褐藻胶来源甘露糖醛酸寡糖的方法[J];中国海洋药物;2008年04期
19 王淑静;林慧敏;;寡糖抗肿瘤作用的研究进展[J];医学理论与实践;2010年05期
20 胡卫娜;;寡糖——海洋的馈赠[J];中国科技奖励;2010年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 ;Investigation of Efficient Constructing Gal(1-3)[NeuAc(2-6)]GlcNAc(2-6)Man[A];2011年全国药物化学学术会议——药物的源头创新论文摘要集[C];2011年
2 阴泽杰;唐瑜;;一个基于AD1674的数据采集系统[A];第8届全国核电子学与核探测技术学术年会论文集(二)[C];1996年
3 王卓;金月;王秀武;;壳寡糖和果胶寡糖及其螯合铜对动物铜吸收的比较研究[A];“基因、进化与生理功能多样性”海内外学术研讨会暨中国生理学会第七届比较生理学学术会议论文摘要[C];2009年
4 沈文;王金富;龚一峰;;功能性寡糖的生物学活性与制备分析方法[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
5 王金富;沈文;李红燕;;寡糖对动物的营养和保健作用[A];动物生理生化学分会第八次学术会议暨全国反刍动物营养生理生化第三次学术研讨会论文摘要汇编[C];2004年
6 李健军;孙静;王仲孚;黄琳娟;;果胶多糖的降解及活性寡糖片段分析[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
7 孔英;石英;陈巍;燕秋;朱正美;;Le~Y寡糖抗原的分泌与小鼠胚胎发育和着床相关[A];第九次全国生殖生物学学术研讨会论文摘要集[C];2003年
8 林英庭;;寡糖在反刍动物营养中的作用[A];2009山东饲料科学技术交流大会论文集[C];2009年
9 王威廉;杨鉴;梁竹关;;电子信息类专业中开展ASIC教学的思考[A];电子高等教育学会2004年学术年会论文集[C];2004年
10 李拖平;王娜;杜丽娟;郭梅;;植物酸性寡糖对高脂血脂症小鼠血脂代谢的影响[A];2008年全国糖生物学学术会议论文摘要[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 王玉峰;海洋半乳寡糖芯片制备及寡糖与凝集素相互作用研究[D];中国海洋大学;2011年
2 张春翌;Gal3ST-2和Sulfo-Le~x影响人肝癌细胞黏附和增殖的分子机制研究[D];复旦大学;2009年
3 李艳;酵母半乳糖代谢基因多重转录调控机制的研究[D];山东大学;2010年
4 李才顺;基于异位表达系统的水稻报告基因表达模式系的创建及控制水稻开花期基因RID1的功能研究[D];华中农业大学;2009年
5 高良才;神经肽在动物抑郁症发生发展中的作用研究[D];华东师范大学;2009年
6 潘晓东;若干寡糖的功能特性及对肠道生理生态调控机制的研究[D];浙江大学;2009年
7 陈虎;JE-Java芯片系统关键技术的研究与设计[D];中国人民解放军国防科学技术大学;2000年
8 郝林华;牛蒡寡糖的制备与结构分析及其对植物生长和抗病性的研究[D];中国海洋大学;2004年
9 郭钦;食品级酿酒酵母高效分泌/展示表达系统构建[D];浙江大学;2009年
10 陈海敏;琼二糖寡聚体特效降解、标记分析、结构特征与生物活性的研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2004年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 李育蓉;Gal-9/Tim-3通路介导免疫调节的机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年
2 雷小春;甘丙肽重构基因GAL(intronII)的克隆以及甘丙肽小鼠NA神经元特异表达基因载体的构建[D];山西医科大学;2010年
3 郑毅;靶向性抗肿瘤VEGF-α-Gal融合蛋白的原核表达及其体外活性[D];重庆医科大学;2011年
4 王强;鸡Gal-2成熟肽cDNA片段在毕赤酵母中的分泌表达与抑菌活性研究[D];安徽农业大学;2010年
5 童德胜;控制蛹期发育的家蚕GAL4/UAS双元系统的建立及江苏省蚕桑生产调查[D];苏州大学;2011年
6 余小勇;SA-β-Gal引起腰椎软骨终板退变机制的实验研究[D];南昌大学;2011年
7 郭荫广;肿瘤特异性锚定型α-gal模拟表位真核表达质粒的构建及功能研究[D];重庆医科大学;2010年
8 邓彦彦;基于GAL数模混合控制的并联直流电源研究[D];浙江大学;2006年
9 田正妙;振动检测仪的软件设计与实现[D];西安电子科技大学;2007年
10 马丹;石油产品蒸馏仪的自动化测控研究[D];华中科技大学;2007年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 本报记者 彭俐;高玲(Gal):主持京味《咚咚腔》的以色列人[N];北京日报;2010年
2 记者 阎红;寡糖生物农药 人吃了也没事[N];大连日报;2008年
3 本报记者 滕继濮;“海洋特征寡糖”:大海的礼物[N];科技日报;2010年
4 通讯员 王毅 梁纯生 记者 王建高;“海洋特征寡糖技术与开发”获国家技术发明一等奖[N];科技日报;2010年
5 本报记者 王红;寡糖工程技术开发正逢时[N];中国化工报;2004年
6 本报记者 王红;寡糖工程技术开发正逢其时[N];农资导报;2005年
7 祁金华;System i、p整合背后的真相[N];网络世界;2008年
8 记者 张一玲;“海洋寡糖”获国家技术发明一等奖[N];中国海洋报;2010年
9 ;生长促进剂——寡糖[N];中国畜牧兽医报;2009年
10 本报记者 陈彬 孔德芳;大系统变小芯片 小芯片有大天地[N];科技日报;2006年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978