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《中国海洋大学》 2012年
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底栖硅藻诱导仿刺参(Apostichopus japonicus)幼体附着变态的初步研究

孙景春  
【摘要】:仿刺参的苗种生产中幼体附着变态率低以及滑板症等问题都制约了仿刺参养殖业的发展,因此提高仿刺参育苗的效率是促进仿刺参养殖业健康发展的关键因素之一。而底栖硅藻含有丰富的营养物质,在水产养殖业中可以作为鲍鱼、海参、海胆等名贵海洋经济浮游幼体附着变态的诱导物,以及附着后幼体生长所必需的饵料。因此,底栖硅藻的质量与密度是海产底栖经济动物育苗成功的关键因素之一,也影响苗种的生长速率与存活率。然而目前关于底栖硅藻诱导对仿刺参幼体附着变态影响的报道较少。 本实验从自然海区和海参养殖池中分离筛选具有强附着力的底栖硅藻,并鉴定种类和分析生长规律。利用单种底栖硅藻附着形成不同密度梯度的底栖硅藻附着基,用于诱导仿刺参幼体的附着变态,通过附着变态率分析不同底栖硅藻对仿刺参幼体附着变态的诱导效果,同时探讨了混合底栖硅藻、底栖硅藻与细菌混合形成的附着基对仿刺参幼体附着变态的诱导效果。最终筛选出具有高诱导活性的底栖硅藻种类,以及分析不同混合方式对仿刺参幼体附着变态的协同诱导效果。 主要研究结果如下: 1.底栖硅藻的分离与纯化本实验通过单细胞分离法等方法,共筛选得到底栖硅藻100余株,为12个种类。利用其中9种底栖硅藻进行实验,并鉴定出其中7种底栖硅藻的种类,分别是:Nitzschia sp.、 Bacillariophyta sp.1、Bacillariophyta sp.2、Bacillariophyta sp.3、Bacillariophyta sp.4、Bacillariophyta sp.5、Bacillariophytasp.6。 2.9种底栖硅藻诱导仿刺参幼体附着变态的效果 利用9种底栖硅藻诱导仿刺参幼体附着变态,结果表明:在幼体移入72小时后,Nitzschia sp.等4种底栖硅藻附着基的诱导效果明显优于空白组,Bacillariophyta sp.2等2种底栖硅藻附着基诱导效果不明显,Bacillariophytasp.4等3种附着基诱导效果低于空白组。其中,诱导效果最好的底栖硅藻种类是Nitzschia sp.,在其细胞密度为(3.40±0.60)×10~3、(9.41±1.36)×10~4与(2.25±0.06)×10~5cells/cm~2时,幼体附着变态率分别达到56.67±5.77%、85±12.91%与67.5±17.08%,显著高于空白组13.33±5.77%(P<0.05)。多数情况下,随着底栖硅藻的密度增加,幼体的附着变态率提高,但部分实验组出现下降趋势,提示诱导仿刺参幼体附着变态时,底栖硅藻的密度存在一定的适宜范围。 3.底栖硅藻混合诱导仿刺参幼体附着变态的效果 根据单种底栖硅藻诱导附着变态实验结果,将筛选得到的高诱导活性底栖硅藻Nitzschia sp.与Bacillariophyta sp.、低诱导活性底栖硅藻Bacillariophytasp.4与WH14分别按比例混合制成附着基,诱导仿刺参幼体的附着变态,实验结果显示:在幼体移入72小时后,混合底栖硅藻附着基的诱导效果受硅藻种类与密度影响而有所差异。其中细胞密度分别在(1.41±0.13)×10~5与(1.24±0.18)×10~5cell/cm~2条件下的底栖硅藻Nitzschia sp.与Bacillariophytasp.1混合,其幼体附着变态率可由单种底栖硅藻诱导的67.5±17.08%与40.00±20.00%上升到86.67±5.77%,协同诱导效果不明显;而低诱导活性的底栖硅藻混合后,其协同诱导效果明显(P<0.05),提示低诱导活性底栖硅藻间混合时,由于细胞密度增加等原因可显著提高附着变态率,具有显著的协同效果。 4.底栖硅藻、细菌混合诱导仿刺参幼体附着变态效果 根据单种底栖硅藻诱导附着变态实验结果,分别将有高诱导活性底栖硅藻Bacillariophyta sp.1、低诱导活性Bacillariophyta sp.4与具有高诱导活性的细菌Pseudoalteromonas sp.混合制成附着基,诱导幼体附着变态,实验结果显示:在幼体移入72小时后,混合底栖硅藻、细菌混合附着基的诱导效果同样因底栖硅藻和活性细菌的种类和密度不同而有所差异,其中在细胞密度为(2.71±0.49)×10~5cell/cm~2和(5.39±0.53)×10~6cell/cm~2条件下的底栖硅藻Bacillariophyta sp.4与活性细菌Pseudoalteromonas sp混合,其幼体附着变态率可由单种底栖硅藻的10.00±0.00%和活性细菌的46.67±15.28%上升到80.00±8.16%,其协同诱导效果明显(P<0.05)。 综上所述,实验表明:底栖硅藻对仿刺参幼体附着变态具有诱导活性,通过将筛选出的特定活性藻株运用于苗种生产中的附着基构建,可以有效地提高仿刺参幼体的附着变态效率,进而为仿刺参苗种生产技术的优化提供有效技术途径。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:S968.9

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