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应用表面增强拉曼光谱检测水中抗生素的研究

孔德地  
【摘要】:自1928年第一种抗生素被发现以来,抗生素被广泛应用于人类、禽畜和水生动物细菌性疾病的控制。与此同时,抗生素被发现对人类健康和环境有很多的危害。很多的抗生素对人类都有毒性反应,而且大量的使用抗生素会产生抗药性,世界各国纷纷出台政策禁止或限制抗生素的使用。但抗生素在水产养殖业的滥用情况屡禁不止,如能实现对养殖水中的抗生素残留的有效检测,对这一现象的监管监控将更容易实施。目前常用的抗生素残留检测方法因各自存在缺陷使其使用受到限制,我国制定的检测标准中常用的高效液相色谱法灵敏度高,但操作繁琐耗时长,不适用于大量样品的快速分析和现场检测。表面增强拉曼光谱是一种可以探测到单分子水平的检测手段,具有信息含量丰富、灵敏度高、准确率高、无需样品预处理、可以实现现场探测等优点,有望实现对养殖水中抗生素的实时快速检测。 本文将表面增强拉曼光谱应用到抗生素的检测,对水产养殖中禁用或限用但又屡禁不止的氯霉素、环丙沙星、恩诺沙星三种抗生素进行了SERS检测。首先采用微波加热法制备了银溶胶,研究了加热时间对银溶胶增强效果的影响,确定最佳时间为五分钟;改变银溶胶的pH值,确定了当pH=2时对罗丹明的增强效果最好;但使用银溶胶对抗生素进行检测未获得有效信号。采用自组装法制备银溶胶膜,将经过三氨丙基三甲氧基硅烷(APTMS)硅烷化后的石英片浸泡在不同pH值的银溶胶中镀膜,结果表明当以pH=4的银溶胶镀膜时获得的银溶胶膜的增强效果最好;制备了不同镀膜次数的银溶胶膜,对抗生素进行检测,确定了5次的银溶胶膜具有最高的增强效果,这也与五次的银溶胶膜在激发波长处(532nm)具有最高的等离子共振吸收强度相对应。将使用过的银溶胶膜清洗后再次进行探测,重复两次后其增强效果未有明显降低,表明该银溶胶膜具有很好的重现性。最终确定了制备银溶胶膜的最佳参数为:pH=4的银溶胶,镀膜次数为5次。 以银溶胶膜为基底,分别利用显微拉曼光谱仪和QE65000光谱仪对不同浓度的三种抗生素的标准溶液进行SERS检测。利用显微拉曼光谱仪可以检测到的最低浓度分别为40ppb、5ppb、40ppb,优于目前所能检索到文献的结果;利用QE65000光谱仪可以检测到的最低浓度分别为1ppm、0.1ppm、1ppm。利用QE65000光谱仪对三种抗生素的海水溶液和标准溶液进行了检测,研究了海水对光谱探测的影响,海水溶液的最低检测浓度约是标准溶液的2-10倍;将银溶胶膜浸泡在海水中2.5小时其增强效果未有明显降低,表明了该银溶胶膜具有很好的稳定性。对抗生素的养殖水溶液进行了光谱探测,研究了养殖水及饵料对光谱探测的影响,抗生素养殖水溶液光谱强度比标准溶液低,可以探测到的最低浓度约是标准溶液的5倍。 研究结果表明,本文制备的银溶胶膜具有较高的灵敏度、重现性和稳定性,在抗生素检测领域具有较高的应用价值,为未来养殖水中抗生素残留的快速检测打下实验基础。


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