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《中国海洋大学》 2003年
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牙鲆(Paralichthys olivaceus)免疫促进机理初探

张玲  
【摘要】: 本文围绕维生素C和鳗弧菌减毒活疫苗对牙鲆生长,体成分,特异性和非特异性免疫参数的影响进行了系列研究。整个研究分为四部分,第一部分是通过在饲料中添加不同含量的维生素C,观察其对不同盐度水体中饲养牙鲆的生长,体成分及非特异性免疫参数的影响;第二部分是用不同含量的维生素C,体外处理分离自牙鲆的血液,脾脏和头肾白细胞各48小时,从白细胞呼吸爆发活性的变化来验证维生素C对牙鲆免疫细胞的免疫促进作用;第三部分是用不同含量的维生素C,在体外处理牙鲆肠黏膜白细胞48小时,根据白细胞呼吸爆发活性的变化,验证维生素C对肠黏膜白细胞免疫反应的影响;第四部分是通过鳗弧菌减毒活疫苗对牙鲆特异性和非特异性免疫参数的影响研究,验证该减毒活疫苗的免疫原性、安全性及免疫促进机理,为该减毒活疫苗在生产上的推广应用提供理论依据。 研究的主要结果如下: (1) 对于同样维生素C含量的饲料而言,不同的水体盐度(16‰、31‰和40‰)对牙鲆的生长显示了差异。在半咸水中(盐度16‰),牙鲆生长最快,而且该盐度还有利于肝脏对维生素C的积累。 (2) 饲料中添加维生素C,对鱼体成分不产生影响。 (3) 鱼体粗蛋白和水分含量不受养殖水体盐度的影响,而粗脂肪含量随养殖水体盐度升高显著降低(P<0.05)。鱼体粗灰分含量随养殖水体盐度升高有增加的趋势。 (4) 在本实验条件下,实验牙鲆血清的替代补体溶血活性(ACH_(50)),不受养殖水体盐度和实验饲料VC含量的影响。 (5) 实验鱼血清皮质醇浓度受养殖水体盐度影响较大,高盐度(40‰)的养殖水体使生长在其中的鱼产生相对较高的血清皮质醇水平(6.7ng/ml)。 饲料中添加适当水平(130mg AA/kg)的维生素C,可使实验鱼血清皮质醇水平降低。 (6) 实验鱼血清的溶菌酶活性,随实验饲料中VC含量的增加而增强,但受养殖水体盐度的影响不显著。 (7)体外处理的牙鲜血液白细胞,其呼吸爆发活性有随vC浓度(购自Sigma 公司)的升高而逐渐增强趋势。统计结果表明,当VC浓度为10 umol/L 时,呼吸爆发活性显著高于其它VC浓度。但继续增加VC浓度,白细胞的 呼吸爆发活性反而降低。 (8)体外处理的牙醉头肾白细胞,随VC浓度的升高,其呼吸爆发活性有逐渐 增强的趋势。当VC浓度为10 umol/L时,其呼吸爆发活性显著高于其他 组。但是,VC浓度继续升高,头肾白细胞的呼吸爆发活性却呈下降趋势。 (9)用不同浓度的VC在体外处理牙娜脾脏白细胞时,各处理组之间差异不显 著。 (10)用不同浓度的VC在体外处理牙娜肠勃膜白细胞后,各处理组之间差异不 显著。 (11)腹腔注射鳗弧菌减毒活疫苗,能够显著刺激牙娜肠勃膜细胞的呼吸爆发活 性。 (12)腹腔注射鳗弧菌减毒活疫苗后,牙鲜血液白细胞的呼吸爆发活性有增强的 趋势,但未达到统计学的显著水平。 (13)腹腔注射鳗弧菌减毒活疫苗,能够提高牙虾血清替代补体溶血活性。 (14)腹腔注射鳗弧菌减毒活疫苗,三个月的相对保护率大于70%。 (巧)腹腔注射鳗弧菌减毒活疫苗,15天后其血液内毒素(用EDS刁9细菌内 毒素测定系统检测血清样品中细菌内毒素的含量,堂试剂灵敏度IPg/ml) 减少到检测限之下。 (16)供试的鳗弧菌减毒活疫苗,能诱导牙鲜产生很强的免疫应答,是一种抵抗 鳗弧菌感染的有效疫苗。 本研究的创新性成果主要体现在以下几个方面: (1)提供了有关盐度和维生素C,对牙鲜生长、体成分和非特异性免疫参 数影响机理的新资料。发现适当降低养殖海水的盐度(16%0),不仅 不会对牙奸产生应激效应,而且还有利于维生素C在肝脏的积累。实 验证明,在该盐度下牙醉的生长最快。 (2)当高盐(40编)使鱼类产生应激反应时,通过在饲料中添加一定量的 维生素C,可以使应激得到缓解。 u)首次在体外用不同浓度的维生素C处理从鱼的血液、头肾、脾脏及肠 荡膜分离的白细胞,并验证了维生素C对不同部位白细胞的呼吸爆发 活性的影响。为免疫促进剂的机理研究提供了新的思路和方法。 N)首次较全面的阐明了鳗弧菌减毒活疫苗对牙解特异和非特性免疫指 标的影响结果,为这种新型疫苗在生产上的推广应用提供了基本的理 论依据。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S943

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前1条
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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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7 唐海蓉;银梅;陈仕均;;鱼类免疫组织和细胞的研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
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9 沈笑君;刘元晖;陈清如;;黄芪超微粉体药效学实验研究[A];中国颗粒学会第六届学术年会暨海峡两岸颗粒技术研讨会论文集(上)[C];2008年
10 才琳;张甄;钱丽丽;张园园;裴世春;;黄曲霉毒素B1检测ELISA条件的优化[A];2009年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会论文集[C];2009年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 李会涛;《水产饲料生产良好操作规范》(GMP)技术管理体系构建与生产示范研究[D];中国海洋大学;2010年
2 王嘉;皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino.)L-古洛糖酸-1,4-内酯氧化酶(GLO)的研究[D];中国海洋大学;2010年
3 张彦娇;盐度和温度对大菱鲆非特异性免疫力的影响及淡水螯虾相关免疫因子的研究[D];中国海洋大学;2010年
4 王燕;两株海洋病原菌的分离鉴定、致病机理研究及三株海洋新菌的分类鉴定[D];中国海洋大学;2010年
5 张琴;刺参(Apostichopus japonicus Selenka)高效免疫增强剂的筛选与应用[D];中国海洋大学;2010年
6 吴成龙;皱纹盘鲍抗氧化基因的克隆及其在营养调控下表达的研究[D];中国海洋大学;2010年
7 刘营;不同饲料对刺参(Apostichopus japonicus)生长及能量收支的影响及机制[D];中国海洋大学;2010年
8 孟宪红;中国对虾“黄海2号”对WSSV的抗病性分析[D];中国海洋大学;2010年
9 赖晓芳;中国对虾应答WSSV侵染相关基因的研究[D];中国海洋大学;2010年
10 王丽燕;面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)对中国卤虫(Artemia sinica)抗弧菌感染的影响与酚氧化酶原在卤虫早期发育过程中表达时相的研究[D];中国海洋大学;2010年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 周勇;草鱼出血病转基因植物疫苗表达载体的构建[D];华中农业大学;2010年
2 杨凯;溶氧水平对黄颡鱼生长、代谢及氧化应激的影响[D];华中农业大学;2010年
3 李兵;RNA干扰抑制草鱼呼肠孤病毒复制的细胞模型[D];华中农业大学;2009年
4 刘伟;中华鲟幼鱼饲料中适宜替代鱼粉蛋白源和脂肪源研究[D];华中农业大学;2010年
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8 李英;环境因子变化对凡纳滨对虾蜕皮同步性和生理特征影响的实验研究[D];中国海洋大学;2010年
9 杨辉;三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)投喂技术的研究[D];中国海洋大学;2010年
10 赵霞;不同养殖密度对两种鲆鲽鱼类生长及免疫指标的影响[D];中国海洋大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 华益民,林浩然;营养状况对幼年鲤鱼肝脏IGF-ⅠmRNA表达的影响[J];动物学报;2001年01期
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10 赵东海;饲料蛋白水平对鳜鱼实验种群胃肠道消化酶活性的影响[J];河北渔业;2004年02期
中国博士学位论文全文数据库 前6条
1 王正丽;免疫增强剂对牙鲆(Paralichthys Olivaceu)免疫力和抗病力的影响[D];中国海洋大学;2004年
2 常青;半滑舌鳎仔稚鱼营养生理与开口饲料的开发研究[D];中国海洋大学;2006年
3 陈京华;微生物发酵、外源酶制剂和促摄食物质对牙鲆(Paralichthys olivaceus)利用豆粕蛋白的影响[D];中国海洋大学;2006年
4 张璐;鲈鱼和大黄鱼几种维生素的营养生理研究和蛋白源开发[D];中国海洋大学;2006年
5 邓君明;动植物蛋白源对牙鲆摄食、生长和蛋白质及脂肪代谢的影响[D];中国海洋大学;2006年
6 迟淑艳;低鱼粉饲料中添加微胶囊蛋氨酸或晶体蛋氨酸对军曹鱼和凡纳滨对虾生长性能的影响[D];中国海洋大学;2009年
中国硕士学位论文全文数据库 前7条
1 王优军;几种非营养无公害添加剂对大菱鲆的效应和机理研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
2 蔡英华;几种大豆抗营养因子对牙鲆(Paralichthys olivaceus)生长和消化生理的影响[D];中国海洋大学;2006年
3 张鑫磊;半滑舌鳎胚胎发育及幼鱼营养需求的研究[D];中国海洋大学;2006年
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6 李顺才;中药添加剂对大菱鲆摄食生长与非特异性免疫影响的研究[D];河北师范大学;2007年
7 赵贵萍;不同豆粕水平的饲料中添加一种酵母培养物(益康XP)对大菱鲆生长、组织学结构以及肠道菌群的影响[D];中国海洋大学;2008年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前2条
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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【相似文献】
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6 刘思阳;藤尾芳久;池田实;;牙鲆人工种苗群体的分子遗传学结构[A];中国动物科学研究——中国动物学会第十四届会员代表大会及中国动物学会65周年年会论文集[C];1999年
7 李红岩;张士璀;;有机磷农药对牙鲆鳃细胞系FG-9307的体外细胞毒性[A];中国细胞生物学学会医学细胞生物学、免疫细胞生物学和发育生物学专业委员会学术研讨会论文摘要汇编[C];2002年
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7 连建华;性别控制技术与选择标记在牙鲆育种中的应用研究[D];中国海洋大学;2004年
8 王祥;猪乙型脑炎减毒活疫苗与基因免疫研究[D];华中农业大学;2001年
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中国硕士学位论文全文数据库 前10条
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6 张丽萍;维生素E和维生素C添加剂量及方法对牛肉品质的影响[D];新疆农业大学;2005年
7 戚炜;缺血预处理和维生素C对大鼠骨骼肌缺血再灌注损伤的保护作用[D];天津医科大学;2003年
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