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《中国海洋大学》 2003年 硕士论文
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皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)营养免疫学初步研究

万敏  
【摘要】: 本文主要研究了维生素A、D、E和硒(Se)对皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)免疫能力的影响以及皱纹盘鲍对硒的营养需求,摘要如下: 一、疾病一直是阻碍水产养殖业发展的一个很严重的问题。近年来由于疾病(如脓疱病、溃烂病等)的困扰,使我国重要的鲍鱼养殖品种—皱纹盘鲍的养殖发展受到严重的制约,并造成了较大的经济损失。疾病问题是由病原、宿主及环境三个方面共同作用造成的,所以除了做好养殖环境保护外,提高养殖动物本身的免疫力是保持海水养殖持续健康发展的一个重要途径。人们早已认识到营养在动物体抵抗疾病中的重要作用,营养元素的缺乏或过量都会改变动物体对疾病的抵抗力和易感性。关于水产动物营养与免疫的研究主要集中在鱼类,甲壳类也有一些报道,而对于贝类营养与免疫的研究几乎未见报道。本文根据已有的关于营养免疫学的研究报道,简单总结了所研究的几种营养素(包括维生素A、D、E和硒)及各种免疫指标(血细胞总数、细胞吞噬能力、抗氧化酶、酚氧化酶、溶菌酶等)的研究进展。 二、利用双因素实验设计研究了在饲料中添加维生素E(0,50IU/kg)和硒(0,0.2,0.6,1.5mg/kg)对皱纹盘鲍免疫状态的影响。同时用鲜海带(Laminaria japonica)作为对照组饲料。成鲍(初始体长6-7cm)随机分成9组,每组设3个重复(每个重复7只鲍鱼),在循环系统中饲喂120天之后,测定各种细胞免疫和体液免疫指标,包括血细胞总数、细胞吞噬能力、酚氧化酶(PO)活力、溶菌酶活力、凝集效价和血清总蛋白含量。结果表明:硒和维生素E能显著影响皱纹盘鲍血细胞总数(P<0.05);在吞噬指标(PI,Phagocytic Index),吞噬率(PR,Phagocytic Ratio)和酵母吞噬率(MY,Mean incorporated number of Yeast)三个反映细胞吞噬能力的指标中,Se能显著影响PR水平(P<0.05)。对于所有的细胞免疫的指标,不 摘要 添加硒和VE组的鲍鱼显示出了最低值。饲料中的se和VE对酚氧化酶 (PO)、溶菌酶、凝集效价和血清总蛋白含量等体液免疫指标都有显著的 影响。但是同时我们发现,在所有测定的免疫指标中,Se和VE仅仅对于 血清总蛋白含量表现出了显著的交互作用。总之,饲料中的硒和VE能够 有效的影响皱纹盘鲍的免疫状态。当添加50IU/k 9 VE和0.2一0.6 mg/kgse 时能够使皱纹盘鲍处于良好的免疫状态。 三、利用双因素实验设计研究了在饲料中添加维生素E(0,501U瓜g)和 硒(0,0.2,0.6,1 .sm叭g)对皱纹盘鲍血清中过氧化氢酶(CAT)、超氧 化物歧化酶(S OD)、谷肤甘肤过氧化物酶(GPX)、谷胧甘肤还原酶(GR)、 谷肤甘肤转移酶(GST)这5种抗氧化酶活力的影响。结果表明:硒对皱 纹盘鲍血清5种抗氧化酶活力都有显著影响(P0.05),而VE仅对GPX 和GR的活力有显著影响(P0 .05)。对CAI,、GRX和GR的活力的影响, VE和Se具有显著的交互作用。GPX/SOD、GR/GPX、CAT/SOD这3个重 要的抗氧化指标都表明,当饲料中含有50IU/kg的维生素E时,添加 0.6m叭g左右的硒能使皱纹盘鲍血清中的抗氧化酶系统总体达到相对平 衡,从而能有效的抵抗氧化损害。 四、利用双因素设计研究了饲料中的VE(0,50IU/kg)和硒(0,0.2,0.6, 1.5m叭g)对皱纹盘鲍幼鲍生长、存活、软体部成分组成及对于细菌感染 抵抗力的影响,同时用鲜海带作为对照组饲料。幼鲍(初始体重:0.87士 0.049;初始体长:19.03士0.29~)随机分成9组,每组设3个重复(每 个重复20只鲍鱼),在循环系统中饲喂120天之后,从每个重复中随机选 取一半的鲍鱼注射蔓弧菌(巧加toa搜拼才从犷um)。实验结果表明:相对于饲 料组的鲍鱼,对照组具有更好的生长表现,更高的存活率及抗细菌感染能 力;而不添加VE和硒组的鲍鱼具有最差的生长表现,最高的死亡率及最 差的抗细菌感染能力。硒和vE对软体部蛋白质和脂肪含量、sGR(sPecifi。 Growtll Rate)及DlsL(Daily Increment in sheu Length)等都有显著影响 (P0.05),且硒对鲍鱼的存活率也有显著影响(P0.05)。但se和VE仅 对存活率和DISL有显著的交互作用(P0 .05)。细菌感染实验的结果也表 明饲料中的Se和VE对鲍鱼的免疫系统有显著的影响,同时两者有互补作 中国海洋大学硕士学位论文:皱纹盘鲍(月乞打“臼己臼亡公人翻nai Ino)营养免疫学初步研究 用。总之,当饲料中添加soIU/k 9 vE和0.2一0.6mg/kgse时能够满足幼鲍的 生长需要,提高存活率和抗感染能力‘ 五、本研究利用双因素设计测定了饲料中不同含量的vA(o,1、1护,1、105, lx一o6IU瓜g)和vD(o,500,1 x 103,sxlo3 IU瓜g)对皱纹盘鲍汤公ziotisdiseus hannai Ino)体组织液中与免疫相关的四种酶活力的影响。幼鲍(初重为0.35 士0.039)在循环系统中饲养巧。天之后分别测定体组织中的溶菌酶 (lysozyme),酚氧化酶(PO),超氧化物歧化酶(SOD)和酸性磷酸酶(ACP) 活力。结果表明:溶菌酶和PO可以作为有效反映幼鲍免疫状态的指标; 饲料中的VA对这两种酶的影响比VD更明显;饲料中VD缺乏和VA过量 对SOD的活力有显著影响;而ACP仅仅对高浓度的VD敏感;两种维生 素对四种酶活力都没有显著的交互作用。除此之外,对肝胰脏、肾脏、外


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