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《中国海洋大学》 2003年
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环境因子对迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tarda致病力和牙鲆Paralichthys olivaceus抗病力的影响初探

郑大海  
【摘要】: 迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)是目前在水产养殖中有极大危害的病原菌,它是由Hoshina(1962)首次报道。从第一次报道到现在该菌已在许多种鱼类养殖中引发了病害,造成了巨大损失,实际上,该菌的宿主范围十分广泛,从鱼类、两栖类、爬行类、鸟类直到哺乳类包括人类在内都有该菌感染的病例报道。所以对于迟钝爱德华氏菌的研究引起了人们广泛的重视。本文在第一部分对国内外关于该菌的研究概况做了较详细的阐述,包括该菌的生理病理特性、致病机理以及对该菌的防治等方面。 在实验的开始,对所得到的迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的有关性质进行了初步的检测。25℃条件下利用不同培养基测得的生长曲线结果表明,该菌经过约4h的延滞期,很快即进入对数生长阶段,从第16h到第40h的相当长一段时间为稳定期,然后进入衰退期;不同的培养基成分和盐度对各生长阶段该菌的数量有显著的影响,营养丰富时其数量高,而随盐度的升高,各阶段数量下降。致病性研究表明水温20℃时,该菌对牙鲆(平均体重10g)3天的半致死浓度LD_(50)为2.O×10~8CFU/mL。实验研究了该菌胞外产物和胞内物质的致病性,结果表明该菌的胞外产物对牙鲆无致病性,而胞内物质有致死作用。 在研究温度对该菌致病力的影响的实验中,采用双因子设计思路研究菌体培养温度和鱼养殖水温两者对该菌致病力的影响。牙鲆幼鱼(平均体重10g)暂养温度分别控制在15、20和25±1℃,迟钝爱德华氏菌的培养温度分别为15、20、25和30±1℃。实验选用4天LD_(50)和感染后病原在鱼体肝脏中的繁殖情况作为致病力指标。在LD_(50)实验中腹腔 一___一旧_一_塑娜覃创丝鲤逃些堕鱼丝鱼丝业壑竺塑迪丝 注射5倍梯度稀释的迟钝爱德华氏菌,每尾注射0.lml。观察计算4天的 LDS。。在感染后分离实验中,肌肉注射迟钝爱德华氏菌后,每24h从鱼 肝脏中分离病原菌。对LD50实验结果进行双因素方差分析(tw。一way ANOVA),表明菌体培养温度和鱼体养殖水温两者对该菌致病力都有显 著影响(P0.01),其交互作用显著(尸0.01)。当水温为巧℃时,25℃ 的菌致病力最高,然后是20、巧和30℃的菌,当水温升高,各个处理 的菌的致病力都有所上升。感染后分离实验结果与LD50实验结果基本相 符,对72h的分离结果进行协方差分析(ANCOVA)显示20℃培养的菌 有较高的增长速度,而巧℃培养的菌的增长最慢。 在研究盐度对迟钝爱德华氏菌致病力的影响的实验中,牙虾幼鱼(平 均体重509)暂养温度控制在20士1℃,盐度为自然海水盐度30911,迟 钝爱德华氏菌的培养盐度分别控制在。、10、20和309/l,实验选用4 天LDS。和感染后病原在鱼体肝脏中的繁殖情况作为致病力指标。对LDS。 实验结果进行单因素方差分析(one一way ANOVA),表明盐度对该菌的致 病力有显著影响(尸0.05),其中盐度20和109/1的菌有较高的致病力, 而o和309/l的较低,感染后分离实验结果与LD50实验结果一致,其中 209/1的菌有较高的增长速度。 在研究不同盐度条件下牙虾对迟钝爱德华氏菌感染的反应的实验 中,健康牙鲜幼鱼(平均体重509)在不同的盐度(169/1,329/l,409八) 条件下饲养。低盐度和高盐度分别用自来水和粗盐溶液以每天29/1的速 度下调和上调,盐度达到后驯养一个星期,然后进行感染。在LDS。实验 中腹腔注射后观察计算5天的LD50。在感染后分离实验中,肌肉注射后 每24h取血,分离肝脏,检测肝脏中迟钝爱德华氏菌的数量,测血清中 替代途径补体活力和溶菌酶活力。单因素方差分析结果显示,LD50在低 盐条件下显著高于在高盐条件下(p0.05),正常盐度的LDS。居中。分 离实验中,协方差分析显示4天内病菌在高盐条件鱼体内增长最快,在 低盐条件鱼体内增长最慢。血清指标测定显示替代途径补体活力和溶菌 酶活力4天内趋势相似,前72h呈上升趋势,然后开始下降。两个指标 的活力在低盐度鱼体内最高,在高盐度鱼体内最低。所有结果显示在所 环境因子对迟钝爱德华氏菌致病力和牙坪杭病力的影响初探 设盐度范围内低盐条件下牙虾抗迟钝爱德华氏菌的能力更高。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S941

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