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《中国海洋大学》 2004年
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深海链霉菌Streptomyces sp. DS003的鉴定、发酵及其活性产物的初步分离

郭天宇  
【摘要】:本文从样品采集、菌种分离纯化和菌种保存、抑菌生物活性筛选、菌种鉴定、菌株培养条件的优化、积分物的积累及粗提物的初步纯化研究等多个方面对深海链霉菌株进行了探讨,为进一步认识该菌株作了较为深入的检测,为进一步研究其生物活性作了有益的探索。 作者赴西北太平洋某海域(基于其它考虑,文中并未指明具体的作业海域)采集样品,采用加铬的固体平面高氏培养基分离到八株放线菌。使用高氏液体培养基分别发酵菌株,然后采用杯碟法针对包括大肠杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、八叠球菌、隐球菌、白色念珠菌、Tu57、毛霉菌等八株菌组成的生物模型进行了生物活性的粗筛,初步认定菌株Streptomyces sp.DS003有较广的抑菌谱和较强的抑菌能力。为研究菌株的生物特性及开发价值,在接下来的实验中,分别对其形态特性、生理生化学特性、16S RNA序列以及生物酶活性进行了检测分析,初步确定了它的分类地位。 为进一步提高该菌株生物活性的利用价值,研究对菌株的培养进行了优化。首先,参考德国马克思·普朗克研究所惠赠的六种培养基对菌株进行了培养基种类及初步的培养条件的优化。在此基础之上,借用数学统计分析方法—均匀设计对培养基的组成构造了数学模型,得到了优化的培养基。经验证:此菌株的抑菌活性明显提高,与原配方相比,对所有受试菌的生物活性都有了不同程度的提高,分别是大肠杆菌,44%;绿脓杆菌,44%;金黄色葡萄球菌,21%;八叠球菌,40%;隐球菌,21%;白色念珠菌,20%。粗提物的产量也提高了33.1%。 经过规模发酵,对积累的粗提物进行了初步的纯化研究。去除粗提物后油脂性物质后,利用硅胶柱层析、PTLC、Pharmadex LH-20型分子筛做了初步的分离纯化研究,以生物模型活性跟踪对其中的活性条带进行了检测,初步认定代谢中存在两个较为明显的活性条带,但成分较为复杂,有待于进一步纯化研究。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q93-3

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