收藏本站
《中国海洋大学》 2004年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

牙鲆染色体操作

戈文龙  
【摘要】:染色体操作(Chromosome manipulation)是人为改变有性生殖生物原有的染色体组的技术,主要包括人工诱导多倍体(Polyploidy induction)、雌核发育(Gynogenesis)、雄核发育(Androgenesis)。作为细胞工程和现代遗传育种的一个重要组成部分,染色体操作是当前应用于水产养殖研究中最有发展前景的生物技术之一。 有关染海水鱼类色体操作研究已有许多报道,但其研究的深度及应用的广度较淡水鱼类均差一些。在国外,较为成熟并能应用到生产中的有三倍体大西洋鲑、全雌牙鲆等。而在国内,目前海水鱼类染色体操作研究较少,研究刚刚起步。本研究以我国北方养殖的牙鲆(Paralichthys olivaceus)为研究对象,进行了同源(牙鲆)、异源(石鲽)精子紫外线照射遗传失活的诱导和雌核二倍化参数的优化,并对牙鲆的三倍体、四倍体进行了初步研究和探讨。获得结果如下: 1.详细探讨了不同紫外线照射剂量对牙鲆和石鲽精子的作用,查明了使牙鲆和石鲽精子遗传失活的最佳条件,诱导了雌核发育单倍体。照射用2只平行的20W紫外灯管,中心波长254nm,两灯管相距15cm,照射距离为10cm,结果表明,在此照射条件下同源牙鲆精子时,卵子受精率在照射5-90s范围内变化不大,但照射时间超过100s时受精率明显下降,表明辐射剂量过高,精子已经逐渐被杀死,失去受精能力。受精卵的发育和孵化率随着照射时间的延长而急剧下降,在20s时孵化率为最低,而后又随着照射时间的延长增高,在60s时胚胎成活率到达最高点,随后又降低,表现出典型的Hert-wig效应。对异源(石鲽)精子的照射同样呈典型的Hert-wig效应,但石鲽精子失活的最佳照射时间是40s。染色体观察结果表明,最佳照射剂量组的胚胎有24条染色体,全部为单倍体,证明了辐射处理的有效性。 2.实验同时对牙鲆雌核发育单倍体的胚胎发育过程进行了追踪观察,在胚胎发育初期,单倍体的发育过程与二倍体基本一致,其发育速度和形态上基本没有差别,但从原肠期开始,单倍体的发育速度出现明显的滞缓;胚体形成后,胚胎发育出现明显的异常,胚胎扭曲,出现小头、短尾等发育畸形,表现出典型的单倍体综合症。 3.采用冷休克和静水压抑制第二极体排放,成功地诱导了受精卵染色体的 加倍,获得了减数分裂型雌核发育二倍体。染色体观察结果证实了这些雌核发育 个体的二倍性。对冷休克处理条件的优化结果表明,受精后的处理起始时刻、冷 休克温度以及冷休克持续时间均对雌核发育二倍化率有较大的影响。当受精卵培 养在15.5士0.2℃时,获得雌核发育二倍体的最佳条件为是从受精后3min起, 用2一4℃的温度冷休克处理45min一 6Omin,最高二倍化率达79.7%。静水压抑制第 二极体排放同样受处理起始时刻、静水压的压强及压力持续时间的影响。压力处 理的最优条件为是从受精后3min起,用55MPa的压强持续处理6min,孵化率达 67.7%。 4.研究还采用静水压处理法成功地抑制了牙坪第一次卵裂,获得了有丝分 裂型雌核发育二倍体。二倍化率的最优条件是:从受精后7Omin起,用55MPa 的静水压力持续处理6min,最高孵化率为日.5%。 5.研究还对牙虾三倍体、四倍体的诱导进行了初步研究,参照诱导雌核发 育二倍体的条件,用静水压诱导出牙鲜的三倍体、四倍体,最大核仁数计数法证 明了染色体加倍的有效性,四倍体胚胎细胞具有4个或4个以下的核仁,而三倍 体具有3个或3个以下核仁,二倍体只有2个或1个核仁。三倍体诱导率为100%, 四倍体最高诱导率为87%。研究还对三倍体和四倍体的胚胎发育进行了观察, 对其发育的囊胚率、原肠率、孵化率与二倍体进行了比较。结果显示:三倍体的 胚胎发育成活率加高,囊胚率和原肠率分别达70.1%和60.1%;孵化率达48.7%; 都比四倍体要高,与正常发育的二倍体没有明显差异。四倍体的囊胚率为56.6%, 与二倍体、三倍体相比差别不大,但当到达原肠时胚胎大量死亡,原肠率为7.9%, 与二倍体、三倍体有较大差异,四倍体孵化率仅为1 .45%。三倍体和四倍体的发 育正常,但发育速度较慢。 本研究用适量的紫外线照射诱发了牙娜精子和石蝶精子的染色体失活;用 温度冷休克和静水压的方法有效地抑制牙了牙虾受精卵的第2极体排放和第1 次卵裂,诱导出雌核发育二倍体及牙虾的三倍体、四倍体,为进一步开展牙坪多 杯体育种及性别控制育种奠定了基础。
【学位授予单位】:中国海洋大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:Q953

手机知网App
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 戴继勋,包振民,张全启,刘健;~(60)Coγ射线诱导中国对虾雌核发育的观察[J];青岛海洋大学学报;1993年04期
2 姜卫国,李刚,林岳光,庆宁;人工诱导合浦珠母贝多倍体的发生[J];热带海洋;1987年04期
3 蔡国雄;真鲷三倍体诱导初步研究[J];热带海洋;1997年04期
4 楼允东;人工雌核发育及其在遗传学和水产养殖上的应用[J];水产学报;1986年01期
5 楼允东,张英培,翁忠惠,赵玲;淇河鲫鱼细胞遗传学和同工酶的初步研究[J];水产学报;1989年03期
6 范兆廷,寮苏祥;鱼类的雌核发育、雄核发育和杂种发育[J];水产学报;1993年02期
7 包振民,张全启,王海,高洁,戴继勋;中国对虾三倍体的诱导研究——Ⅱ.细胞松弛素B处理[J];海洋学报(中文版);1993年03期
8 蒋一珪;俞豪祥;陈本德;梁绍昌;杨德龙;林绥恩;;鲫鱼的人工和天然雌核发育[J];水生生物学集刊;1982年04期
9 叶玉珍;吴清江;陈荣德;;~(60)Co-γ射线诱导鱼类雄核发育的研究[J];水生生物学报;1990年01期
10 桂建芳;孙建民;梁绍昌;黄文郁;蒋一珪;;鱼类染色体组操作的研究 Ⅱ.静水压处理和静水压与冷休克结合处理诱导水晶彩鲫四倍体[J];水生生物学报;1991年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;[J];;2004年12期
2 ;[J];;2004年12期
3 ;[J];;2004年12期
4 ;[J];;2004年12期
5 ;[J];;2004年12期
6 ;[J];;2004年12期
7 ;[J];;2004年12期
8 ;[J];;2004年12期
9 ;[J];;2004年12期
10 彭仁海;张国强;卢全伟;;兴国红鲤同工酶的研究[J];安阳工学院学报;2006年02期
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王梅林,郑家声,余海;栉孔扇贝Chlamys farreri(Jones & Preston,1904)染色体核型[J];青岛海洋大学学报;1990年01期
2 蔡国雄;真鲷三倍体诱导初步研究[J];热带海洋;1997年04期
3 余艳,陈海山,葛学军;简单重复序列区间(ISSR)引物反应条件优化与筛选[J];热带亚热带植物学报;2003年01期
4 桂建芳;;多倍体鱼类的开发和利用[J];水库渔业;1985年03期
5 俞豪祥,徐皓,关宏伟,张海明;冷休克诱导天然雌核发育银鲫♀×鲤鱼♂四倍体[J];水产科技情报;1991年06期
6 楼允东;国外对鱼类多倍体育种的研究[J];水产学报;1984年04期
7 楼允东;人工雌核发育及其在遗传学和水产养殖上的应用[J];水产学报;1986年01期
8 李传武,吴维新,徐大义,刘纯善,刘国安;鲤和草鱼杂交中雄核发育子代的研究[J];水产学报;1990年02期
9 许玉德,许莉,钟建兴;杂交一代(尼罗罗非鱼♀×奥利亚罗非鱼♂)及其亲本基因组DNA的比较[J];水产学报;2001年01期
10 朱杰,张秀梅,高天翔,柳广东,杨原文;大菱鲆早期变态发育和体表黑色素细胞形态学观察[J];水产学报;2002年03期
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李璞,汪安琦,崔道枋,牟家宜,王春元,张瑞清,宁益华,张乃昌;鲫鱼和金鱼胚胎发育的分期[J];动物学报;1959年02期
2 张孝威,何桂芬,沙学绅;黑鲷卵子及仔、稚、幼鱼的形态观察[J];动物学报;1980年04期
3 周嘉申,沈俊宝,刘明华;黑龙江方正银鲫雌核发育的细胞学初步探讨[J];动物学报;1983年01期
4 吴仲庆;泽蛙雌核生殖单倍体产生过程的细胞学研究[J];动物学报;1983年04期
5 吴仲庆;泽蛙单倍体细胞RNA含量对胚胎发育和成活的影响[J];动物学报;1984年02期
6 吴仲庆;单套染色体组在泽蛙雌核单倍体发育中的作用[J];动物学报;1985年01期
7 洪云汉;热休克诱导鳙鱼四倍体的研究[J];动物学报;1990年01期
8 杨仲安,桂建芳,朱蓝菲,梁绍昌,蒋一珪;复合四倍体异育银鲫两种不同生殖方式的细胞学观察[J];动物学报;1994年01期
9 杨睿姣,李冰霞,冯浩,杨楚彬,孙远东,张轩杰,罗琛;彭泽鲫染色体数目及倍性的细胞遗传学分析[J];动物学报;2003年01期
10 周暾;鳙鱼染色体组型的研究[J];淡水渔业;1980年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 ;[J];; 年期
2 ;[J];; 年期
3 ;[J];; 年期
4 ;[J];; 年期
5 ;[J];; 年期
6 ;[J];; 年期
7 ;[J];; 年期
8 ;[J];; 年期
9 ;[J];; 年期
10 ;[J];; 年期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 柳学周;宁鑫;徐永江;赵明;李春广;李军;;真鲷精子诱导漠斑牙鲆减数雌核发育[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
2 尤锋;许建和;王伟;徐永立;张培军;;牙鲆同质雌核发育人工诱导及其遗传学分析[A];中国鱼类学会2008学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
3 严正凛;张雅芝;宋振荣;纪荣兴;钟幼平;;盘鲍异源雌核发育多倍体诱导的初步研究[A];中国动物学会、中国海洋湖沼学会贝类学会分会第十四次学会研讨会论文摘要汇编[C];2009年
4 骆剑;吴廷昌;陈国华;;棕点石斑鱼雌核发育的初步研究[A];渔业科技创新与发展方式转变——2011年中国水产学会学术年会论文摘要集[C];2011年
5 陈晓峰;王德祥;王军;;大黄鱼雌核发育技术的初步研究[A];中国海洋湖沼学会鱼类学分会、中国动物学会鱼类学分会2004年学术研讨会摘要汇编[C];2004年
6 蔡明夷;柯才焕;周时强;王志勇;王艺磊;潘太平;;杂色鲍雌核发育二倍体的人工诱导[A];贝类学会第七次会员代表大会暨第十一次学术讨论会摘要[C];2003年
7 黄凌云;罗琛;谢锦云;梁宋平;;金鱼(Carassius auratus)雌核发育单倍体和二倍体胚胎蛋白质组比较研究[A];中国蛋白质组学首届学术大会论文摘要集[C];2003年
8 杜胜利;魏爱民;韩毅科;张历;张桂华;陈启民;;黄瓜离体雌核发育及染色体倍性鉴定与加倍研究[A];2008年园艺植物染色体倍性操作与遗传改良学术研讨会论文摘要集[C];2008年
9 杜胜利;;黄瓜离体雌核发育研究[A];全面建设小康社会:中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集(上)[C];2003年
10 陈松林;李静;邓思平;徐建勇;田永胜;沙珍霞;王清印;庄志猛;;半滑舌鳎性别相关分子标记和功能基因的克隆及其在性别控制中的应用[A];2007年中国水产学会学术年会暨水产微生态调控技术论坛论文摘要汇编[C];2007年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 戴华炜;[D];;楥% 年
2 ;[D];;楥% 年
3 ;[D];;楥% 年
4 ;[D];;楥% 年
5 ;[D];;楥% 年
6 ;[D];;楥% 年
7 ;[D];;楥% 年
8 ;[D];中国农业大学;楥% 年
9 ;[D];;楥% 年
10 聂鸿涛;两种经济贝类和刺参微卫星—着丝粒作图及与遗传图谱的整合[D];中国海洋大学;2012年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 ;[D];;2013年
2 ;[D];;2013年
3 ;[D];;2013年
4 ;[D];;2013年
5 ;[D];;2013年
6 ;[D];;2013年
7 ;[D];;2013年
8 ;[D];;2013年
9 ;[D];;2013年
10 商文聪;电刺激诱导栉孔扇贝(Chlamys farreri)雌核发育的参数优化及细胞学分析[D];中国海洋大学;2012年
中国知网广告投放
相关机构
>中国农业大学
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026