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海洋食品中生物胺和甲醛测定方法的研究

赵庆喜  
【摘要】: 本文针对海洋食品中生物胺(Biogenic Amines,BAs)和甲醛(Formaldehyde,FA)引发的食品安全问题,开展了以下两个方面的研究: 1.建立了海洋食品中多组分生物胺的反相离子对高效液相色谱(RP-HPLC)-柱后衍生-荧光检测的测定方法,分析了与海洋食品安全相关的生物胺。 采用0.5mol/L冷高氯酸提取样品中的生物胺,以醋酸钠和辛烷磺酸钠作为离子对流动相梯度洗脱分离后,与邻苯二甲醛(OPA)发生柱后在线衍生化反应,最后在λEX=330nm,发射波长λEM=465nm条件下进行荧光检测定性和定量分析。通过优化色谱条件使酪胺、腐胺、尸胺、组胺、胍丁胺、精胺和亚精胺七种生物胺和内标(1,6-二氨基己烷)在55min内得到良好分离。在0-25mg/L浓度范围内,七种生物胺呈现良好线性相关(R20.999)。该方法精密度良好,达到RSD2.0%(n=6)。测得不同海洋水产样品的平均回收率达到81.7-103.9%,RSD10%(n=18),满足了海洋食品中多组分生物胺检测的需要。 结合感官分析、pH值和T-VBN值等鲜度分析手段,采用本方法测定了南美白对虾、阿根廷鱿鱼和太平洋牡蛎在不同贮藏条件下各种生物胺含量的变化。结果发现,在0℃和4℃两种贮藏条件下随贮藏时间的延长,南美白对虾中的尸胺(Cad),阿根廷鱿鱼和太平洋牡蛎中的胍丁胺(Agm)含量均显著增加,与鲜度变化呈现负相关性,可以作为其鲜度评价的参考指标。贮藏温度对样品中生物胺的产生具有重要作用。同时,应用此方法测定了不同样品中(大黄鱼、竹荚鱼和市售熏鱼等)生物胺。本方法简便、快速、灵敏、可靠、适用性强。 2.建立了固相微萃取(SPME)提取,经五氟苄基羟胺(PFBHA)衍生,气质联机(GC/MS)检测的海洋食品中甲醛的测定方法。选择SPME萃取纤维内衍生(In-stu)方式,选用75μm的聚二甲基硅氧烷/二乙烯苯(PDMS/CAR)萃取纤维,顶空萃取PFBHA衍生剂后(60℃,10min,中速搅拌),再进行样品中甲醛的衍生化反应(80℃,30min,中速搅拌),所得的肟衍生物解吸(310℃,3min)后由质谱进行扫描(SCAN)定性和选择离子扫描(SIM)定量。丙酮作为内标进行定量校正,在0-10mg/kg范围内,甲醛溶液呈现良好线性相关(R20.998)。方法的精密度良好,达到RSD5.0%(n=6)。在不同海洋食品样品中,衍生法测定的平均回收率在83.9-89.6%范围内,RSD为3.8-6.8%(n=6),满足了海洋食品中甲醛检测的要求。并应用该方法测定了海洋食品(鱿鱼丝、大黄鱼、虾等)中的甲醛含量。本方法具有简便快速、灵敏可靠、适用性强等特点。 同时运用此方法初步探究了大鼠血液中甲醛的代谢情况。结果发现,腹腔注射甲醛溶液后(200mg/kg大鼠体重),5min内测定大鼠血液中甲醛的含量迅速升高至最高点(10μg/mL),接着以较缓的速率降低直至大鼠死亡。该方法可以为血液中微量甲醛的分析检测提供一种新的有效的分析手段。


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