收藏本站
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

纳米通道电化学单分子分析检测酶分子

程涛  
【摘要】:单分子检测技术在分析领域的应用十分的广泛,本文主要是应用单分子检测技术研究酶的活性。本文的研究是基于溶血素纳米孔道的单分子电化学检测来讨论限制性核酸内切酶和凝血酶的活性。以溶血素通道为基础,将膜片钳放大技术与电化学检测技术相结合,实现限制性核酸内切酶和凝血酶单分子的检测及传感分析。利用核酸内切酶对特定位点的限制性内切以及凝血酶与凝血酶适体亲和作用的原理,设计了不同的特定的DNA链,通过观察分析限制性核酸内切酶或凝血酶作用于dsDNA后,DNA通过纳米孔道时的微电流变化,从而达到研究限制性核酸内切酶和凝血酶活性的目的。本论文共分为五章: 第一章,概述了纳米通道、核酸内切酶以及纳米粒子的简介及作用并简单介绍了单分子检测技术、凝胶电泳技术以及膜片钳放大检测技术等分析方法。着重对单分子检测技术和纳米通道进行了说明,对单分子检测技术的前景做了介绍。 第二章,采用单分子电化学检测初步研究了DNA测序工作,主要研究了限制性内切酶的活性。通过用溶血素和卵磷脂的自由组装形成生物纳米孔道,利用溶血素孔径的特性来控制单链DNA和双链DNA通过孔径时不同的电流下降,来初步对DNA测序工作进行了解。在限制性内切酶的作用下双链DNA能顺利的通过纳米孔道,通过对比限制性内切酶作用前后电流的变化进而对限制性内切酶的活性进行研究。 第三章,通过凝胶电泳技术和纳米金标记DNA在TEM下的图像来研究限制性核酸内切酶的活性,以及错配碱基T与T在Hg2+条件下能形成T-Hg-T的稳定存在。首先通过限制性内切酶作用前后的DNA在凝胶电泳下进行分离,观察分离的情况来研究限制性内切酶的,其次当DNA被纳米金修饰后,观察在限制性内切酶作用前后,DNA上修饰的纳米金在TEM表征下的不同来研究限制性内切酶的活性。同时在以上的实验中剪切位点有错配碱基T与T的时候,限制性内切酶不能作用,只有当在Hg2+条件下,形成T-Hg-T的稳定结构后,限制性内切酶才能发生作用。 第四章,通过溶血素纳米孔道研究凝血酶单分子的活性。通过用溶血素和卵磷脂的自由组装形成生物纳米孔道,利用溶血素孔径的特性来控制单链DNA和双链DNA通过孔径时不同的电流下降。研究了凝血酶与是凝血酶适体的亲和作用,当凝血酶作用下的ssDNA才能顺利的通过溶血素纳米孔道,同时也研究了颈环结构的解链时间与电压的关系。利用核酸适体实现单个酶分子的检测,对单个酶分子的实时生物化学反应和酶催化动力学进行研究,研究单个酶分子在许多非特异性结合位点中如何找到特异性位点,为解决生命科学中的重大问题提供理论依据。 第五章,结论部分,对全文内容进行了总结。


知网文化
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前20条
1 李兴存,陈进富,李术元;甲烷在富纳米孔炭质吸附剂上的吸附[J];燃料化学学报;2003年03期
2 美中;纳米孔超级绝热涂料[J];建材工业信息;2003年11期
3 韩卫清;周刚;王连军;孙秀云;李健生;;阳极氧化制备二氧化锡纳米孔[J];无机材料学报;2007年03期
4 周立鸣,邓蔚;纳米孔硅质绝热材料[J];新型建筑材料;2000年09期
5 张裕卿;张红柳;马振荣;;具有纳米孔结构硅质吸附剂的制备及对染料木素的选择性吸附(英文)[J];纳米技术与精密工程;2008年03期
6 董文辉;;SiO_2纳米孔超级绝热材料[J];中国非金属矿工业导刊;2006年02期
7 丁克俭;张海燕;胡红刚;赵红敏;关伟军;马月辉;;生物大分子纳米孔分析技术研究进展[J];分析化学;2010年02期
8 袭锴,徐丹,贾叙东;低介电常数聚合物材料的研究进展[J];高分子材料科学与工程;2004年04期
9 张贺新;赫晓东;李垚;洪长青;;纳米孔ZrO_2气凝胶的制备研究[J];航空材料学报;2006年03期
10 刘玉萍;周慧静;沈铸睿;李丽颖;周杏弟;孙平川;袁忠勇;陈铁红;李宝会;丁大同;;嵌段共聚多肽控制合成的复合空泡结构纳米孔二氧化硅[J];科学通报;2006年03期
11 王凯歌;许桂雯;李冀;牛憨笨;金爱子;岳双林;顾长志;陈大鹏;;微纳沟道技术研究DNA分子性质研究[J];纳米科技;2007年01期
12 闵康丽;陆建隆;;掺Cr~(3+)发光氧化铝纳米模板的制备和光谱表征[J];南京师大学报(自然科学版);2009年02期
13 朱红;周亚亭;;电渗流对DNA穿越纳米孔的影响[J];湘潭大学自然科学学报;2010年01期
14 李兴存,陈进富,褚衍秋,李术元,张忠智;富纳米孔炭质吸附剂的制备及其吸附天然气的性能研究[J];精细化工;2002年08期
15 李兴存,陈进富,徐文东,李术元,张忠智;富纳米孔炭吸附剂储存天然气用于汽车燃料的进展[J];现代化工;2002年04期
16 ;硅酸盐基银纳米孔复合材料顺利通过检测[J];有机硅氟资讯;2005年08期
17 ;国家自然科学基金项目“多酸基纳米孔无机—有机杂化功能配位聚合物的制备与性质”简介[J];渤海大学学报(自然科学版);2008年04期
18 赵其仁,李林蓓;硅藻土开发应用及其进展[J];化工矿产地质;2005年02期
19 贾法龙;罗建;何悦;张礼知;;纳米孔金膜电极:合金化/去合金化法制备及电化学性能[J];无机化学学报;2007年11期
20 吴川林;纳米孔绝热材料的性能与应用[J];电力建设;2002年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 罗开富;;高分子穿越纳米孔进入受限体系的输运动力学研究[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
2 蔡盛林;张利香;张恺;郑玉彬;赵爽;李耀群;;壳聚糖修饰玻璃锥形纳米孔与蛋白质的相互作用[A];中国化学会第28届学术年会第9分会场摘要集[C];2012年
3 孙连峰;陈闽江;余芳;杨怀超;周海青;;液体在纳米孔道内填充、流动以及相变研究[A];中国化学会第28届学术年会第4分会场摘要集[C];2012年
4 赵爽;翁玉华;郑玉彬;蔡盛林;李耀群;;锥形纳米孔对葡萄糖的刺激响应[A];中国化学会第28届学术年会第4分会场摘要集[C];2012年
5 周秋香;王荷芳;赵新强;岳琳;王延吉;;多纳米孔道配位聚合物[Cd(pda)_2]_n(pda=3-(3-pyridyl)acrylic acid)的合成与结构[A];纳米材料和技术应用进展——全国第三届纳米材料和技术应用会议论文集(下卷)[C];2003年
6 蔡杰;张俐娜;;基于纳米孔纤维素和甲壳素凝胶的纳米复合材料[A];2011年全国高分子学术论文报告会论文摘要集[C];2011年
7 王瑜玉;李德慧;赵永涛;肖国青;徐忠峰;李福利;陈熙萌;;高电荷态Xe离子穿过PC纳米孔箔后的导向效应研究[A];二〇〇九全国核反应会暨生物物理与核物理交叉前沿研讨会论文摘要集[C];2009年
8 康旭;赵雷;段先健;李振华;李远兵;李淑静;;纳米孔二氧化硅绝热材料的研究[A];低碳技术与材料产业发展研讨会论文集[C];2010年
9 杨华;李君印;赵小军;孙苗;;分子动力学模拟烷烃链穿过石墨烯上氧修饰的纳米孔[A];中国化学会第28届学术年会第13分会场摘要集[C];2012年
10 叶建锋;齐利民;;纳米孔锐钛矿氧化钛介晶的可控合成及其在锂离子电池中的应用[A];2011中国材料研讨会论文摘要集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙玉兵;纳米孔对铀(Ⅵ)在水—矿物界面吸附和解吸的影响[D];合肥工业大学;2010年
2 吕航;AFI分子筛纳米孔道限域氮等纳米体系的高压行为研究[D];吉林大学;2012年
3 石兴;泡沫料浆压滤成型制备纳米孔氧化硅隔热材料[D];中国建筑材料科学研究总院;2012年
4 詹玮婷;不锈钢表面微、纳米薄膜的制备及光催化和抗菌性能研究[D];武汉科技大学;2012年
5 魏舒;新型高比表面积聚合物材料和石墨烯材料的合成与应用[D];吉林大学;2012年
6 向伟玮;微等离子体扫描加工系统中核心器件的关键工艺技术研究[D];中国科学技术大学;2010年
7 王伶俐;生长于硅纳米孔柱阵列衬底上氧化锌的场发射和气体传感性能研究[D];郑州大学;2013年
8 张隽佶;基于光致变色分子开关的新型表面电化学与生物化学体系[D];华东理工大学;2012年
9 张永来;溶剂热法合成纳米孔聚合物及其吸附功能研究[D];吉林大学;2009年
10 王丽江;结合纳米技术的细菌检测分子生物传感器的研究[D];浙江大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 程涛;纳米通道电化学单分子分析检测酶分子[D];青岛科技大学;2013年
2 司儆舟;基于有限元方法的纳米孔及带电颗粒穿孔仿真研究[D];上海交通大学;2010年
3 杨纯;纳米孔单通道记录在金属离子检测中的应用[D];长沙理工大学;2013年
4 吴晴晴;纳米电极与纳米孔电极的制备及电化学响应[D];安徽师范大学;2013年
5 戴丰洋;仿生纳米孔道的制备修饰及响应性研究[D];哈尔滨理工大学;2013年
6 王海霞;球形纳米孔二氧化硅材料及其吸附特性[D];济南大学;2011年
7 李琳;纳米孔聚碳酸酯的介电谱研究[D];哈尔滨理工大学;2012年
8 侯广磊;聚合物仿生纳米孔道的制备及性质研究[D];中国地质大学(北京);2013年
9 乔奇巍;纳米粒子穿越纳米孔道阵列机制的研究[D];西北大学;2012年
10 刘俊玲;含噻吩、氰酸酯单元的三嗪基纳米孔聚合物的合成及表征[D];中南大学;2013年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 张晔 通讯员 陶然;南京工大纳米孔道研究有新发现[N];科技日报;2009年
2 记者 刘霞;英研发出第三代基因测序技术[N];科技日报;2009年
3 常丽君;纳米孔可成为DNA快速阅读器[N];科技日报;2010年
4 张巍巍;单链DNA易位可激发碳纳米管出现强电流[N];科技日报;2010年
5 陈丹;石墨烯纳米孔设备可探测单个DNA分子[N];科技日报;2010年
6 记者 常丽君;操控单分子可设计新型电子设备[N];科技日报;2011年
7 刘海英;首个纳米级单分子质量实时测定系统问世[N];科技日报;2009年
8 刘喜喜;TB级硬盘[N];中国计算机报;2007年
9 聂翠蓉;基因测序走入寻常百姓家[N];科技日报;2008年
10 毛黎 张巍巍;新法可同时操纵多个独立分子[N];科技日报;2010年
中国知网广告投放
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62982499
  • 010-62783978