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《山东农业大学》 2009年
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鸡传染性法氏囊病病毒山东株的分离鉴定及免疫预防研究

王秀云  
【摘要】:鸡传染性法氏囊病是由鸡传染性法氏囊病病毒引起的一种免疫抑制性传染病,造成免疫缺陷,造成鸡对细菌和其它病毒等致病因子的易感性增加,给养鸡业造成严重的危害。近年来,由于疫苗的使用,使本病在一定程度上得到了控制。但是,自20世纪80年代以后,世界上先后出现变异毒株及超强毒株,为法氏囊病的免疫防治带来一定的难度。到目前为止,我国已有多处报道发生IBDV超强毒株的感染,造成IBD疫苗免疫失败,由此,寻找更合理有效的防治办法成为控制IBD流行的当务之急。 目前,病毒性传染病仍无有效的药物进行治疗,疾病的控制仍以免疫预防为主,因此寻找免疫原性好的IBD流行毒株成为免疫预防的关键所在。本试验通过对山东省内不同地区法氏囊病流行情况的调查,经实验室分离培养鉴定得到一株IBDV野毒株CP株,同时对该毒株进行驯化得到一株细胞适应毒CCPV,对此两株毒进行免疫效力试验,证明该毒株具有较好的免疫原性并对疫苗株有交叉保护作用。本试验共分三部分: 实验一:鸡传染性法氏囊野毒株的分离鉴定 本试验通过对山东省内不同地区法氏囊流行情况的调查,采集疑似病症的病料829份,根据病鸡的流行病学和临床症状,结合琼脂免疫扩散试验及回归易感染鸡试验方法,初步选出阳性病料118份。其次对阳性病料通过外源病毒检测,经过上述方法的筛选,顺利得到一株IBD野毒株CPV,该毒株临床症状、病理剖检变化典型,发病快,病程短,病死率高,属于超强毒力毒株。 实验二IBDV分离株的传代培养 试验证明CP株不能直接适应细胞,要想得到一株细胞适应毒需要较长的时间,所以,本试验仍以鸡胚培养为主,以优化鸡胚培养方式,使该方法更适合IBDV的培养。IBDV在鸡胚中以CAM和肝含毒量为最高,在尿囊液中为最低,由于在试验过程中发现鸡胚肝肿大,肺、肾及卵黄囊出血严重,那么将鸡胚全部收获会不会影响到IBDV的病毒含量呢?本试验通过比较鸡胚的CAM、鸡胚胚体、卵黄及尿囊液的混合物与CAM病毒含量证明这一观点成立,同时在鸡胚培养的过程中对CPV进行细胞驯化,经细胞培养至第八代出现了细胞病变,得到细胞适应毒CCP株。 实验三:鸡传染性法氏囊病病毒山东分离株灭活苗的制备及应用 本试验分别将CP株和法氏囊BJQ902制备成油乳剂灭活疫苗,免疫21日龄SPF鸡进行免疫效力实验,通过抗体监测和攻毒保护试验得出CP株在免疫后第二周相对疫苗株产生抗体较高,抗体滴度整齐,对CP株和疫苗株攻击均能产生较高保护率,而疫苗株免疫后对CP株的攻击抵抗率较低,由此说明CP株免疫鸡群后不仅能产生高而整齐的抗体效价,而且对疫苗株有较好的交叉保护作用,CCPV株制备的疫苗还具有稳定性好,安全性高等优点,具备作为疫苗的条件。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S858.31

【参考文献】
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