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《山东农业大学》 2010年
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中草药轮叶党参再生体系的建立

彭金环  
【摘要】: 分别以轮叶党参(Codonopsis lanceolata Benth.et Hook.)的叶片、叶柄、茎段、种子和带腋芽茎段为外植体,通过愈伤组织的诱导及分化和丛生芽的诱导,建立了两种再生体系,获得的主要结果如下: 1.愈伤组织诱导:以种子、茎段、叶片和叶柄为外植体均能诱导出愈伤组织,但在出愈率和愈伤生长方面差异较大,其中叶片诱导愈伤组织效果最好,是比较理想的外植体。不同激素组合对愈伤组织的形成影响很大,其中生长素2,4-D是愈伤组织形成的关键因素。筛选出最佳诱导培养基为:MS+2,4-D 0.5mg.L~(-1)+6-BA 1.0mg.L~(-1)+KT 0.5mg.L~(-1),出愈率达100%。 2.愈伤组织继代培养:不同光照条件下愈伤组织均可增殖,但是光照16h.d~(-1)条件下,愈伤增殖倍数最高,达9.5,愈伤组织生长迅速,呈淡黄绿色,质地紧密,这种继代培养的愈伤组织在后期的分化过程中分化程度较高。筛选出最佳继代培养基为MS+6-BA 0.75mg.L~(-1)+NAA 0.5mg.L~(-1)。 3.愈伤组织分化成苗:将生长较好的愈伤组织转接到分化培养基上,愈伤组织逐渐变绿,并形成很多突起,进而形成多芽体。不同的光照条件对再生苗的分化影响显著,16h.d~(-1)条件下获得的再生苗健壮,叶片多,而8h.d~(-1)条件下获得的再生苗瘦弱不宜驯化。筛选出最佳分化培养基为1/2MS+6-BA 0.5mg.L~(-1)+NAA 0.2mg.L~(-1),分化率高达89.4%。 4.再生苗生根:再生苗接种到生根培养基上15d后开始生根,45d生根趋于稳定。在6号培养基上,试管苗根数可达26.8条,根长可达6.13cm。最佳生根培养基为1/2MS+IAA 0.2mg.L~(-1)+NAA 0.2mg.L~(-1),生根率达92.7%。 5.诱导丛生芽建立再生体系:以带腋芽茎段为外植体可以诱导出芽苗,诱导芽苗的最佳培养基为1/2MS+6-BA 2.0mg.L~(-1)+NAA 1.0mg.L~(-1),诱导率最高为55.7%;MS+6-BA 0.5mg.L~(-1)+NAA 1.0mg.L~(-1)是芽苗继代的最佳培养基,继代两次后增殖倍数可达5.49;1/2MS为最理想的生根培养基。 6.炼苗移栽:将生根苗在自然光下闭瓶炼苗7d,然后打开瓶盖炼苗3d,让小苗逐渐适应自然条件后进行移栽。移栽前0.1%多菌灵溶液消毒。移栽初期,苗木幼嫩,光线强易死苗,因此必须遮荫,使光强为全光的30%左右。移栽最佳基质为腐质土:蛭石:河沙(1:1:1),移栽成活率达到82.5%。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S567.53

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【参考文献】
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