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《山东农业大学》 2010年
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鸡传染性贫血病毒与其它免疫抑制性疾病共感染的相互作用

杨明  
【摘要】: 鸡传染性贫血病毒(Chicken anemia virus, CAV)是破坏雏鸡造血系统,致使淋巴器官萎缩以及导致成年鸡免疫抑制的主要病原。CAV在世界主要养禽国家分布广泛,在其感染期间致使鸡体极易受到其它病原的侵袭并常常伴有其它病原的共感染以及多重感染,进而给养禽业带来了巨大的损失,是危害养禽业的主要病原体之一。因此,对CAV致病性的研究越深入越有利于实践生产中对该病的预防和治疗。 本文将CAV山东分离株(CAV-SDLY08株),在MSB1细胞上培养传代,并测定病毒滴度。将含有103 TCID50的CAV的细胞上清感染1日龄SPF鸡只,研究CAV-SDLY08株与其它免疫抑制性疾病(MDV、ALV-J)共感染的相互协同作用。 将CAV-SDLY08株和马立克氏病病毒(MDV)人工单一和共同感染1日龄的SPF鸡,分别于感染后14、21、28、35日龄检测鸡体红细胞压积的变化,并检测鸡群疫苗免疫3周后的抗体反应,以探讨CAV与MDV共感染对鸡体的免疫抑制是否有协同作用。结果表明,在血液分析方面,CAV与MDV共感染组较病毒单一感染组与对照组差异极显著,不仅加重了鸡群贫血现象,而且延长了贫血的病理症状;而在禽流感病毒(AIV,H5/H9)疫苗、新城疫病毒(NDV)疫苗和传染性法氏囊病毒(IBDV)疫苗免疫后3周的抗体检测中,CAV与MDV共感染组较其它各实验组差异极显著,抗体滴度大大低于其它实验组;此外,CAV与MDV共感染组,鸡体生长状况明显差于实验各组,有6只鸡只死亡(6/25),大大增加了病毒单一感染时的死亡率。综上研究证明,CAV与MDV共感染在免疫抑制作用上有协同作用。 同法研究CAV-SDLY08株与鸡白血病-J亚群病毒(ALV-J)共感染对鸡体的免疫抑制是否有协同作用。结果表明,CAV与ALV-J共感染在免疫抑制作用上同样有协同作用。 根据已发表的鸡传染性贫血病毒C14株(CAV-C14株)的基因序列设计合成一对特异性引物,以CAV-C14株感染的MSB1细胞为模板,扩增了CAV-VP1基因内部的一段序列。将PCR产物按正确的阅读框架克隆到表达性载pGEX-6p-1谷胱甘肽转移酶(GST)基因的下游。将构建好的表达载体质粒转化到大肠杆菌BL21中,诱导表达目的蛋白。把从SDS-PAGE胶中回收的目的蛋白免疫小鼠,并收集阳性血清,即为抗CAV-VP1的血清。同时,收集CAV感染的新鲜病料,经4%多聚甲醛固定后,做成石蜡切片。应用免疫组织化学的方法,用抗CAV-VP1的阳性血清检测定位切片中CAV抗原的位置,从而达到检测CAV的目的。结果证明,抗CAV-VP1的血清可以用于CAV的检测,但CAV抗原在病理切片中的定位仍然需要时间摸索更佳的条件。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S858.31

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【参考文献】
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