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《山东农业大学》 2010年
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酸枣和西吕枣高频率不定梢诱导及酸枣遗传转化的研究

王妍  
【摘要】: 枣树(Zizyphus jujuba Mill.)是我国重要的经济林果之一,也是枣区人民脱贫致富的重要产业,在我国大部分地区广泛种植。枣疯病是由植原体引起的枣树上的一种毁灭性传染病害,给我国的枣树生产造成巨大的经济损失。本实验拟通过建立并完善枣树的高效离体叶片再生体系和遗传转化体系,以泰山酸枣无菌叶片为外植体,利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部特异表达启动子At-SUC2驱动下的报告基因GUS和抗菌肽基因AG转入枣中,以期使枣树获得抗植原体病的能力,提高枣树对枣疯病的抗性。本实验获得的主要结果如下: 1、泰山酸枣和烟台西吕枣的休眠枝经室内水培后萌发的新梢,经过一系列消毒后成功建立了各自的无菌苗快繁体系。 2、建立了泰山酸枣离体叶片高效不定梢再生体系,不定芽启动的最佳培养基激素组合为TDZ 1.0mg/L+ IAA 0.5mg/L;不定芽伸长的最佳培养基的激素组合为IAA 0.1mg/L+ GA 0.5mg/L。暗培养是不定芽再生的必需条件,在最适宜的不定芽再生培养基上,叶片直接光培养,不定芽不能再生;叶片先进行暗培养3周后转入光下培养,叶片不定芽再生效果最好,再生率最高可达100%。泰山酸枣的最佳生根诱导培养基为1/4MS+ IBA 0.5mg/L,酸枣生根率高达98.5%,单株根数为4.1;与先进行10d的暗处理相比,直接光培养更有利于酸枣不定根的诱导。 3、建立了烟台西吕枣离体叶片高效不定梢再生体系,不定芽启动的最佳培养基激素组合为TDZ 1.0mg/L+ IAA 0.5mg/L;不定芽诱导伸长最佳培养基的激素组合为BA 0.1mg/L+ IBA 0.5mg/L。WPM培养基比MS培养基更适合诱导西吕枣的离体叶片不定梢再生。西吕枣的最佳生根培养基为:1/4 MS +IBA 0.5mg/L,生根率高达100%,单株根数为6.1;与直接进行光培养相比,接种后先暗培养10d更有利于西吕枣试管苗的生根。 4、完善了酸枣的遗传转化体系,Km对枣树不定芽的分化和生长具有抑制作用,叶片分化不定芽的Km临界浓度为20 mg/L,不定芽正常生长的临界浓度为25 mg/L。转化时再生培养基中添加25 mg/L Km用来筛选抗性转化芽。 5、对部分抗Km的抗性转化芽扩繁后进行了GUS表达的组织化学检测,结果未发现GUS基因在Km的抗性转化苗的韧皮部中表达,通过PCR分析也未发现AG基因整合到Km的抗性转化苗的基因组中所期望大小的扩增片段,这些抗Km的绿苗是基因的瞬间表达,还是Km抗性是假阳性,都有待于进一步研究。这说明酸枣做为转化的受体用来插入外来的基因是比较困难的,可能与酸枣在自然的长期进化中已形成了比较稳定的基因型有关。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:S665.1

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【引证文献】
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1 张娅君;枣成熟胚离体培养及农杆菌介导叶片与胚遗传转化研究[D];河南农业大学;2012年
【参考文献】
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1 梁国栋;王玉国;;骏枣叶片组织培养及植株再生技术研究[J];安徽农业科学;2007年05期
2 罗晓芳,田砚亭,李云,牛辰;金丝小枣组织培养快速繁殖的研究[J];北京林业大学学报;1996年02期
3 潘青华;枣疯病研究进展及防治措施[J];北京农业科学;2002年03期
4 齐秋锁;;枣疯病研究的进展[J];河北农业大学学报;1986年04期
5 王玖瑞,刘孟军,代丽;枣组培中的品种差异及辣椒枣的组培快繁[J];河北农业大学学报;2003年04期
6 赵锦,代丽,刘孟军;水培方法在枣无菌繁殖系外植体建立中的应用[J];河北农业大学学报;2005年05期
7 周瑞金;刘孟军;;影响冬枣叶片再生不定芽的主要因素[J];河北农业大学学报;2007年06期
8 刘翠云,李艳,马洪明,张小红;黑山晋枣芽培养及植株再生研究[J];西北植物学报;1997年03期
9 黄建;马锋旺;樊军锋;李新岗;同金霞;;枣树离体叶片不定芽再生体系建立的研究[J];西北植物学报;2006年05期
10 张晓申;王慧瑜;杨录军;;鸡心枣脱毒快繁技术研究[J];中国南方果树;2006年02期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 孟辉;沾化冬枣基因工程改良的基础研究[D];山东大学;2005年
【共引文献】
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1 王玉珍,刘香玲,罗景兰;大叶饲料型刺槐组培技术体系的研究[J];山东农业科学;2005年04期
2 邢瑞丹;刘庆忠;陈新;李亚东;;两个蓝莓品种离体叶片不定芽再生体系的建立[J];山东农业科学;2009年05期
3 刘静;张元湖;刘庆忠;高玉娇;;抗生素对青香蕉苹果叶片再生的影响[J];山东农业科学;2009年07期
4 王妍;李宪利;孙清荣;周广芳;;酸枣与西吕枣诱导生根比较[J];山东农业科学;2009年09期
5 孙洪雁;孙清荣;单公华;刘庆忠;周广芳;;鲁枣1号组织培养和植株再生体系研究[J];山东农业科学;2012年01期
6 柴瑞娟;殷红飞;;激素质量浓度及不同培养方式对马铃薯愈伤组织的诱导[J];安徽工程大学学报;2011年04期
7 郜爱民;徐晨光;张瑞明;严平;;凤梨科花卉的组织培养和快繁技术研究[J];安徽农学通报;2005年06期
8 郭祖宝;李学红;孙培良;;影响胡萝卜体胚发生因素的研究[J];安徽农学通报;2006年12期
9 周南镚;;四季海棠和绿巨人的离体培养及快速繁殖技术[J];安徽农学通报;2007年20期
10 徐少亭;董永会;冯晓东;;香紫苏叶片愈伤组织诱导的初步研究[J];安徽农学通报;2008年22期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 任磊;王雁;周琳;彭镇华;;牡丹APETALA2基因PsAP2的克隆及花器官特异性表达分析[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
2 翟红;刘庆昌;;甘薯及其近缘野生种遗传转化的研究[A];作物科学研究理论与实践——'2000作物科学学术研讨会文集[C];2001年
3 王海光;李自超;;植物干旱胁迫应答基因及其产物研究进展[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
4 ;Heat-inducible Expression of β-glucuronidase Gene in Tobacco[A];2003年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2003年
5 彭士琪;;浅谈我国枣树生产现状和对策[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
6 刘孟军;;国内外枣树生产和科研的主要进展[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
7 周俊义;彭士琪;;河北省枣树经济栽培区的划分[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
8 周俊义;彭士琪;;河北省枣种质资源及品种自然区划[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
9 张学英;王秀伶;彭士琪;;枣不同品种花粉生活力和胚囊败育率的研究[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
10 李新岗;孙文杰;王鸿哲;同金霞;;陕北低产枣树增产技术研究[A];首届全国干果生产与科研进展学术研讨会论文集[C];1998年
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1 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
2 马英姿;药用植物蚬壳花椒化学成分分析及繁殖技术研究[D];中南林业科技大学;2010年
3 李慧娥;中国野生华东葡萄抗白粉病株系白河-35-1转录因子基因(WRKY)表达与功能研究[D];西北农林科技大学;2010年
4 徐伟荣;中国华东葡萄抗白粉病芪合成酶基因及启动子克隆与功能分析[D];西北农林科技大学;2010年
5 王兴翠;生姜离体叶片植株再生体系及多倍体诱导技术研究[D];山东农业大学;2011年
6 董秀春;小麦春化相关基因TaVRN2和NF-Y家族基因TaNF-YB3的分离与功能分析[D];山东农业大学;2011年
7 乔建磊;马铃薯雾培营养调控机理研究[D];吉林大学;2011年
8 王小刚;湖北麦冬种植优化和遗传多样性研究[D];华中科技大学;2011年
9 张来;竹节参离体培养与鲨烯合酶(squalene synthase,SS)基因的克隆及代谢研究[D];西南大学;2011年
10 蔡肖;青杨原生质体培养及叶片离体染色体加倍研究[D];北京林业大学;2011年
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1 孙源蔚;中国李‘Nubiana’愈伤组织诱导、保存及植株再生研究[D];华中农业大学;2010年
2 薄存沛;新疆野生油菜BAC文库的构建及单条染色体克隆筛选的研究[D];华中农业大学;2010年
3 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
4 殷巍;澳大利亚扇子花Scaevola crassifolia的繁殖技术研究[D];华中农业大学;2010年
5 梁梅荣;澳大利亚扇子花Scaevola nitida R.Br的组织培养研究[D];华中农业大学;2010年
6 卢小三;两个杨树无性系再生体系的建立及抗虫基因Cry1C+9C转化的初步研究[D];华中农业大学;2010年
7 宋晓娣;笋用竹的组织培养研究[D];中南林业科技大学;2009年
8 雷樊登;茶树离体增殖与再生体系的建立[D];安徽农业大学;2010年
9 刘建民;“复瓣玫瑰红”蔷薇的快繁技术研究[D];山东农业大学;2010年
10 郑秀社;东营市冬枣测土配方合理施肥量研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 宋建伟;任永信;苗卫东;;酸枣种子休眠性试验研究[J];安徽农业科学;2006年13期
2 周良骝,杜国华,谢中稳,袁艺,任立中,张鹤英,檀华榕,朱淑文;板栗发育过程中主要营养物质变化规律的研究[J];安徽农业大学学报;1994年04期
3 王珊;李荣;樊新民;刘怀锋;;紫香无核胚培养技术研究[J];北方园艺;2010年02期
4 秦志华;孙玉刚;闫桂红;魏国芹;李芳东;;甜樱桃种间杂交胚培养及快繁研究[J];北方园艺;2010年08期
5 马丽;赵文东;孙凌俊;高圣华;赵海亮;杨艳敏;;外源6-BA对汤姆逊无核葡萄胚珠败育及胚培养的影响[J];北方园艺;2011年14期
6 王永芳,高宝嘉,郑均宝,张炬红;转基因741杨对桑天牛的抗性鉴定[J];河北农业大学学报;2002年02期
7 王永芳,高宝嘉,郑均宝,梁海永;青杨双价抗虫基因转化系统研究[J];河北农业大学学报;2003年02期
8 邸宏;刘昭军;卢翠华;王振华;;农杆菌介导bar基因转化玉米幼胚的研究[J];东北农业大学学报;2008年02期
9 蔡雪,孙德兰,关雪莲,王红;花椒珠心胚及胚乳的发生和发育[J];西北植物学报;2000年04期
10 黄碧光,叶明志,吕柳新;蕉柑幼果内源激素和多胺的消长与种子败育的关系[J];福建农业大学学报;1997年04期
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1 尚霄丽;猕猴桃、枣高效再生体系的建立及农杆菌介导的遗传转化研究[D];河南农业大学;2010年
2 王鸿霞;樱桃自交不亲和性在遗传育种中的研究及应用[D];山东农业大学;2003年
3 王玖瑞;枣树雄性不育和胚败育研究[D];河北农业大学;2004年
4 黄家权;抗寒基因的克隆及根癌农杆菌介导的ICE1基因转化柑橘的研究[D];华中农业大学;2005年
5 张志宏;苹果叶片离体再生不定芽及遗传转化的研究[D];沈阳农业大学;1996年
6 陈浩;三种Bt基因(cry1Ac、cry2A~*和cry9C~*)抗虫水稻的培育及评价[D];华中农业大学;2005年
7 郑进;BtCry1A基因转化中嘉8号杨的研究[D];华中师范大学;2006年
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1 马春华;枣叶片再生途径的组织学研究及影响遗传转化因素的分析[D];河南农业大学;2011年
2 沈烨;根癌农杆菌介导的甜樱桃茎尖遗传转化体系的建立[D];西南农业大学;2002年
3 李玉晖;核果类果树远缘杂交不亲和性调控研究[D];山东农业大学;2003年
4 潘俨;葡萄胚培养与育种技术的研究[D];新疆农业大学;2004年
5 孟辉;沾化冬枣基因工程改良的基础研究[D];山东大学;2005年
6 李海云;苹果砧木遗传转化体系优化与rolB基因遗传转化研究[D];吉林农业大学;2005年
7 邢宇;转盐芥ZEP基因提高烟草和沾化冬枣耐逆性的研究[D];山东大学;2006年
8 陈传武;根癌农杆菌介导MdSPDS1和HAL2基因转化柑橘的研究[D];华中农业大学;2006年
9 瞿金旺;根癌农杆菌介导亚精胺合成酶基因MdSPDS1的柑橘遗传转化及离体再生[D];华中农业大学;2006年
10 康薇;中嘉8号杨基因转化受体系统的建立及转BtCry1A基因植株检测[D];华中师范大学;2007年
【二级参考文献】
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1 王震星,张磊;枣花药培养再生植株及其染色体倍性研究[J];北方果树;1998年02期
2 田砚亭,王红艳,牛辰,罗晓芳;枣树脱除类菌原体(MLO)技术的研究[J];北京林业大学学报;1993年02期
3 吕晋慧,吴月亮,孙磊,高亦珂,张启翔;菊花叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2005年04期
4 罗晓芳,田砚亭,李云,牛辰;金丝小枣组织培养快速繁殖的研究[J];北京林业大学学报;1996年02期
5 潘青华;枣疯病研究进展及防治措施[J];北京农业科学;2002年03期
6 邢跃东;移植基质对枣组培苗移植成活率的影响[J];中国林副特产;2000年04期
7 曲泽洲;王永惠;周吉柱;;枣花芽分化观察初报[J];河北农业大学学报;1963年01期
8 齐秋锁;;枣疯病研究的进展[J];河北农业大学学报;1986年04期
9 侯保林;齐秋锁;赵善香;王朝先;魏贤堂;马国江;;手术治疗枣疯病树的初步研究[J];河北农业大学学报;1987年04期
10 刘孟军,王永蕙;枣和酸枣等14种园艺植物cAMP含量的研究[J];河北农业大学学报;1991年04期
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1 李江;吉塞拉大批量组培快繁条件优化的研究[D];山东农业大学;2004年
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1 何小兰,吴敬音,朱卫民,薛启汉;6BA和AgNO_3对甘蓝型油菜带柄子叶外植体不定芽再生的影响[J];江苏农业学报;2001年04期
2 吴雪梅,汤浩茹;草莓叶片培养研究进展[J];北方园艺;2004年06期
3 吴延军;谢鸣;蒋桂华;孙崇波;张惠琴;黄普乐;;黑莓试管苗叶片植株的再生[J];果树学报;2006年03期
4 李际红;张友朋;庞金宣;孙仲序;;窄冠黑青杨叶片再生体系的建立[J];山东农业大学学报(自然科学版);2006年01期
5 王国平;李晓梅;陈秋芳;;枣不定芽再生体系的研究[J];中国农学通报;2006年04期
6 付宏岐;吴云锋;张王斌;;甜樱桃离体叶片再生的研究[J];塔里木大学学报;2007年01期
7 钟燕华;田志宏;;植物生长调节剂和AgNO_3对大白菜外植体不定芽再生的影响[J];长江大学学报(自科版)农学卷;2007年01期
8 韩小娇;杨洪强;由淑贞;段凯旋;张鑫荣;赵海洲;;平邑甜茶叶片不定芽再生及NO的效应[J];园艺学报;2008年03期
9 曹亿会;陶超;郭江峰;;温州盘菜离体培养及其过程中生理生化研究[J];浙江农业科学;2008年04期
10 万春雁;丛芳;韩明玉;赵彩平;刘航空;田玉命;;桃胚轴再生的影响因子[J];果树学报;2009年06期
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1 张睿;陈晓丽;田琳琳;赵梁军;;五种基因型无刺槐叶片直接不定芽再生对培养条件的响应[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
2 杨爱珍;孟海玲;王一鸣;师光禄;王有年;;桃树花期蔗糖含量及其相关酶活性的变化[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
3 吴晓蕾;杨利平;李敬蕊;;野生花卉蚂蟥七离体叶片培养和不定芽再生研究[A];2007年中国园艺学会观赏园艺专业委员会年会论文集[C];2007年
4 孟成民;曹必好;雷建军;陈国菊;刘娟旭;;菜心离体高效再生体系建立的研究[A];中国园艺学会第十届会员代表大会暨学术讨论会论文集[C];2005年
5 刘庆忠;赵红军;;吉塞拉(Gisela)大樱桃矮化砧木生物技术及产业化研究进展[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
6 马怀宇;张力思;刘庆忠;;高丛蓝莓离体叶片再生与组培快繁研究初探[A];全国作物生物技术与诱变技术学术研讨会论文摘要集[C];2005年
7 高红亮;李英;宋玉萍;;不结球白菜离体培养及植株再生的研究[A];中国园艺学会十届二次理事会暨学术研讨会论文摘要集[C];2007年
8 马文慧;张倩;尚爱芹;赵梁军;;根癌农杆菌介导‘粗枝’大叶黄杨P5CS基因转化扶芳藤的研究[A];中国观赏园艺研究进展 2009[C];2009年
9 谭彬;郭文武;;早实枳模式转化验证体系建立及基因工程创造柑橘无核新种质(摘要)[A];第二届全国果树分子生物学学术研讨会论文集[C];2009年
10 孙清荣;孙洪雁;王妍;周光芳;张力思;刘庆忠;;有效提高酸枣离体叶片高频率不定梢再生的方法[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
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1 胡钟东;砂梨果实成熟相关基因的克隆及其RNAi载体的构建[D];南京农业大学;2007年
2 张瑞萍;脱水素基因逆境表达模式与白桦遗传转化研究[D];东北林业大学;2009年
3 黄家权;抗寒基因的克隆及根癌农杆菌介导的ICE1基因转化柑橘的研究[D];华中农业大学;2005年
4 王娜;枣体细胞胚胎发生及倍性种质创新[D];河北农业大学;2007年
5 霍雨猛;抗根结线虫基因的克隆、遗传转化及黑籽南瓜再生体系的建立[D];山东农业大学;2008年
6 谢玉明;柑橘遗传转化体系的建立及chit42和phyB基因的导入[D];湖南农业大学;2007年
7 罗赛男;用DefH9-iaaM和TERF1基因转化糖橙的研究[D];湖南农业大学;2008年
8 李媛媛;树莓种质资源遗传多样性及创新研究[D];沈阳农业大学;2009年
9 许林;枫香基因转化体系的研究以及枫香AGAMOUS基因的初步功能分析[D];华中农业大学;2008年
10 杨莉;甜橙和金柑高效安全转基因技术研究[D];湖南农业大学;2012年
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1 樊明琴;结球白菜高效离体不定芽再生体系的研究[D];南京农业大学;2004年
2 刘月英;磨盘柿生物技术的研究[D];河北农业大学;2004年
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4 吴雪梅;草莓叶片不定芽诱导研究[D];四川农业大学;2004年
5 李靖;苦瓜子叶不定芽诱导研究[D];四川农业大学;2005年
6 王梅;草莓叶片不定芽发生及抗生素及其影响的研究[D];四川农业大学;2005年
7 王海波;草莓离体再生及抗病基因遗传转化的研究[D];山东农业大学;2002年
8 张红梅;草莓离体再生及抗病基因转化[D];河北大学;2004年
9 赵雪兰;树莓离体快繁体系建立及叶片不定芽诱导研究[D];四川农业大学;2008年
10 朱丽华;大白菜下胚轴高效离体不定芽再生的研究[D];南京农业大学;2005年
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