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《山东农业大学》 2011年
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枣庄地区猪圆环病毒2型血清学调查、PCR检测及免疫防治

梁俊昌  
【摘要】:猪2型圆环病毒(Porcine circovirus type 2,PCV2)病是当今养猪业流行的重要传染病之一,该病的广泛流行和蔓延已给世界各国养猪业的发展造成了严重威胁和经济损失。PCV2可造成初产母猪流产,产死胎,带毒母猪屡配不孕、受胎率低,断奶仔猪和肥育猪生长缓慢、呼吸急迫、消瘦、贫血、黄疸。该病毒是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原之一,也是猪皮炎肾炎综合征(PDNS)的病原。PCV2能引起猪的免疫抑制或免疫力低下,造成对其他病的防疫和治疗效果降低。在现代化规模养猪场中,PCV2往往与其他疫病混合感染,发病率呈上升趋势。为了有效控制这该病流行,减少由此引起的经济损失,本研究建立了快速的PCR诊断方法,提出了有效的免疫防治措施。 本研究为了解枣庄地区猪场PCV2的感染情况,采用ELISA法,对采自6个猪场的494头份猪血清进行了血清学调查。结果表明,PCV2感染阳性幅度为7.4%~28.1%,总阳性率为17.4%(86/494),其中经产母猪阳性率为30.4%(51/168),后备母猪阳性率为17.1%(26/152),断奶仔猪阳性率为5.2%(9/174)。 PCR技术以其敏感、特异、快速、准确的优点成为目前病毒学诊断、分子生物学实验最常用技术,也是PCV的病原检测和定型中最常用的技术,在PCV2相关疾病的诊断中发挥了重要作用。本研究为了建立一种快速诊断PCV并区分其亚型的PCR方法,选取PCV1和PCV2同源性最高的部分设计PCV特异性引物,选取PCV1与PCV2同源性最小、差异最大的部分设计PCV2特异性引物,同时优化PCR反应条件和各组分最佳工作浓度。之后,应用所建立的PCR方法先后对来自枣庄峄城、市中区、滕州市地区具有PMWS症状的3个猪场194份现地样品检测。试验结果表明,所建立的PCR方法敏感、特异;现地样品检测结果表明3个猪场PCV2阳性率在5.1%-73.7%。 为了比较PCV2自家组织灭活苗与蓝圆二联苗的免疫效果,以研制更加快速有效的PCV2疫苗,于山东省某规模化猪场(该场于2008年5月被确诊存在PCV2流行),取病猪典型间质性肺炎病料,按常规程序制备自家组织苗。将研制的PCV2自家组织苗和蓝圆二联苗应用于该猪场内96头试验猪,观察临床症状的变化,分别于初免和二免后采用ELISA法检测PCV2血清抗体水平,依据统计学分析各组免疫前后抗体水平变化的差异。结果表明,两种疫苗免疫的猪群在外观表现和生长性能上差异显著,经自家组织苗免疫的猪群,精神活跃,生长速度快;免疫蓝圆二联苗的猪群,于免疫12周后逐渐表现为群体性生长缓慢,有的病猪拉黄色水样粪便或血便,有的呈腹式呼吸,个别表现出PCV2特有的皮疹现象。免疫猪经两种疫苗两次免疫后,ELISA检测PCV2抗体均呈阳性,经蓝圆二联灭活苗免疫组,初免后抗体阳性率从40.00 %上升至79.31 %,但与初免前差异不显著;经PCV2自家组织苗免疫组,初免后抗体阳性率从56.66 %上升至100 %,OD570nm均值上升,与初免前差异极显著(P0.01)。本研究为进一步研究PCV2发病机理,探讨PCV2疫苗免疫机理及疫苗研制提供可靠的临床依据。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S858.28

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