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《山东农业大学》 2011年
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糖皮质激素和热应激对蛋鸡肝脏脂肪代谢影响

李艳  
【摘要】:本课题研究了糖皮质激素(皮质酮)与热应激对蛋鸡肝脏脂肪代谢的影响。重点是通过研究应激对蛋鸡肝脏脂肪从头合成与脂类组装分泌的影响来探讨应激对蛋鸡脂肪代谢的影响机制及与生产性能的联系。 试验一:选用26周龄体重相近的海蓝褐蛋鸡48只,随机等分为2个处理组,每组4个重复,每个重复6只鸡,应激组温度控制在31.0℃(±0.5),对照组温度保持在室温24℃,自由采食和饮水,试验期为7天。试验第8天时,每个处理分别随机选取8只鸡在空腹状态下采集血液和肝脏样品。结果发现,热应激显著降低了肝脏和腹部脂肪绝对比重(P0.05);对肝脏内甘油三酯的含量没有明显的变化。热应激蛋鸡组肝脏脂肪合成相关基因ACC、FAS、ME和SCD1的mRNA水平没有变化(P0.05),VLDLY组装过程的相关脂蛋白APOB100和APOVLDL-II的mRNA的表达量也没有变化(P0.05),但是抑制APOB降解的MTP mRNA被热应激显著上调(P0.01),提示也许热应激有增加了脂蛋白分泌的趋势。此上结果表明热应激也许并没有直接影响到肝脏脂类代谢相关基因的表达。推测热应激可能是通过调控采食量来影响蛋鸡生产性能,而通过对肝脏脂肪代谢调控来影响应该不是主要的方面。 试验二:本试验选用26周龄体重相近的海蓝褐蛋鸡48只,随机等分为2个处理组,每组4个重复,每个重复6只鸡,试验组按2mg/kg体重的剂量腹部皮下注射皮质酮每天两次,对照组注射同剂量玉米油,自由采食和饮水,试验期为7天。注射第8天时开始采血样。结果表明,皮质酮处理组的肝脏绝对重量显著增加(P0.01)。对肝脏组织进行HE染色后可见肝细胞质内出现大小不等的空泡,细胞的颜色发生变化,细胞核发生移位和变形。禁食状态下皮质酮处理显著地增加肝脏脂肪酸从头合成基因ACC、FAS、ME和SCD1及核因子SREBP-1C的mRNA水平(P0.05),降低了VLDL组装所需的载脂蛋白APOB-100和APOVLDL-‖的mRNA水平(P0.01),在饲喂状态下,显著增加肝脏FAS mRNA (P0.01)的水平,但是ACC、ME、SCD1mRNA没有变化,降低了VLDL组装所需的载脂蛋白APOB-100和APOVLDLII mRNA水平(P0.05)。上述结果说明,皮质酮处理引起了应激的反应,对产蛋高峰期蛋鸡肝脏功能和肝脏内脂肪代谢产生了影响;结果提示皮质酮处理是通过增加脂肪的从头合成而降低脂肪组装分泌引起脂肪在肝内的沉积增加,通过降低了血浆中卵黄前体物质的流量而影响蛋鸡生产性能。 试验三:选择体重相近的约14周龄的海蓝褐育成鸡和10周龄的蛋公鸡各32只随机分别分为四组,每个处理8只鸡。四组分别为对照、雌激素、皮质酮和雌激素加皮质酮。试验期为7天。结果发现皮质酮和雌激素能够增加育成期蛋鸡和蛋公鸡肝脏相对比重(P0.01)。雌激素能够显著升高血浆中TG、NEFA和VLDL的含量(P0.01)。雌激素显著升高了育成期和蛋公鸡血浆中钙磷的含量(P0.01)。雌激素和皮质酮能够显著降低蛋公鸡肝脏CPT的活性(P0.01)。皮质酮显著升高育成期蛋鸡和蛋公鸡肝脏脂肪代谢相关基因FAS、ACC和SCD1 mRNA的表达(P0.01),而雌激素下调FAS mRNA表达(P0.05)和上调蛋公鸡SCD1mRNA表达(P0.01)。皮质酮降低了VLDL组装过程中相关蛋白APOB100和APOVLDL-II mRNA的表达(P0.01),但是雌激素则是上调了APOB100和APOVLDL-II mRNA的表达(P0.01)。结果表明雌激素和皮质酮处理都显著的损伤了育成鸡和蛋鸡肝脏和肾脏的功能,对其脂肪代谢也产生了影响,但机制不是完全一致,有一定的相互效应,对APOB100和APOVLDL-II调控是相反的作用,暗示糖皮质激素主要是通过抑制雌激素对脂蛋白的分泌来增加脂肪在肝脏内的沉积,降低血液中脂肪的流量,造成肝脏脂肪肝的发生。 试验四:体外试验,分离并培养14日龄鸡胚肝细胞,培养48后开始正式试验,分为4个处理,每个处理6个重复。细胞试验一处理分为四组:对照组、DEX组、ES组和DEX+ES组。细胞试验二是在含有雌激素背景下分为四个组,分为对照组、DEX、INS和DEX+INS组。在CO2培养箱中37℃静置培养24h。提取RNA进行实时荧光定量测定脂肪代谢相关基因表达。细胞试验一结果表明DEX处理显著降低了鸡胚肝细胞ACC mRNA的水平(P0.01),但是对于FAS mRNA的水平没有影响(P0.05)。DEX或雌激素处理都降低了鸡胚肝细胞LXRαmRNA的水平(P0.01),而SREBP-1c mRNA表达只有地塞米松组被显著被下调(P0.01)。细胞试验二结果表明,DEX显著降低鸡胚肝细胞ACC和LXR mRNA的水平(P0.01),对FAS、SREBP-1C和APOB100 mRNA的表达没有影响(P0.05);雌激素处理降低了SREBP-1C mRNA的表达(P0.05),对ACC、FAS、LXR和APOB100 mRNA的表达没有影响(P0.05)。结果表明,DEX和雌激素的协同作用降低了肝脏脂肪酸的从头合成,这与活体试验即DEX处理以及由此导致的高胰岛素血症促进了肝脏脂肪酸合成的结果是相反的。而生脂基因mRNA表达量的下调可能受到其核转录因子LXRα和/或SREBP-1的调控。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S831.5

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