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猴头菇胞内胞外多糖的结构、抗氧化活性和保肝护肝能力分析

崔芳源  
【摘要】:猴头菇(Hericium erinaceus),又名猴头菌、刺猥菌、猴菇、猴蘑。猴头菇富含多种营养物质,如多糖、维生素、蛋白质、各种微量元素等。猴头菇多糖有提高肌体免疫力,抗氧化,抗衰老等作用。本课题提取了猴头菇胞外多糖(extracellular polysaccharides,EPS)和胞内多糖(intracellular polysaccharides,IPS),通过DEAE纤维素柱分离EPS和IPS组分;红外吸收光谱测定了EPS和IPS组分的分子键和官能团;高效液相色谱测定了EPS和IPS的单糖组成和摩尔比;并且对EPS和IPS的体外抗氧化能力和保肝护肝作用进行了测定。结果如下:1、通过DEAE纤维柱分离出EPS和IPS各有两种组分,分别命名为EPS-1、EPS-2、IPS-1和IPS-2。通过气相色谱测定出EPS由阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为1:7:14:52;IPS由鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,摩尔比为3:4:7:14:137。通过红外光谱测定了EPS-1、EPS-2、IPS-1和IPS-2的化学键和特征官能团。EPS-1分子键包括N-H、O-H键、C=C键、C=N键和N=N键、饱和C-H键和不饱和C-H键,官能团中含有醇酚缔合物、单体酸和酸的缔合物、胺基和亚胺基、烯烃、偶氮、CH3、CH2基团以及只有1个氢原子的芳烃基团。EPS-2分子键包括N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键,官能团有单体酸、胺基和亚胺基、烯烃和偶氮基团。IPS-1含有N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键、饱和C-H和不饱和C-H,官能团有醇酚单体和其缔合物、单体酸、胺基和亚胺基、烯烃、亚胺和肟、偶氮、CH3、CH2基团、1个氢原子的芳烃、炔。IPS-2含有N-H和O-H键、C=C键、C=N键和N=N键。官能团有胺基、烯烃和偶氮。2、体外抗氧化活性:以还原力、羟基自由基(·OH)清除率,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)清除率为指标,对EPS和IPS的抗氧化作用进行了测定。结果表明,EPS和IPS都有较强的体外抗氧化能力,且EPS的体外抗氧化能力高于IPS。3、体内保肝护肝活性:建立了CCl4诱导的小鼠肝损伤模型,测定小鼠血液中谷草转氨酶(AST),谷丙转氨酶(GPT)和胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、血清白蛋白(ALB)含量的变化,肝组织中的过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性变化,过氧化脂质(LPO)、丙二醛(MDA)的含量变化。结果表明EPS和IPS降低了实验组小鼠血液中AST和GPT水平,使CHOL、TG和ALB回复正常水平;提高了肝组织中CAT和SOD活性,降低了LPO和MDA的含量,具有十分有效的保肝护肝作用。此外通过观察肝组织切片,发现EPS和IPS肝组织切片呈与正常组小鼠肝切片一致的健康状态,直接证明了EPS和IPS对肝脏具有保护作用。综上所述,猴头菇EPS和IPS具备较强的体外抗氧化活性和保肝护肝作用,可以以此为基础研发保肝护肝药物;猴头菇EPS和IPS的单糖组成分析对研究多糖的构效关系具有重要意义。


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