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《山东农业大学》 2003年
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甜瓜幼果cDNA文库的构建、酸性转化酶基因的克隆及遗传转化

于喜艳  
【摘要】: 甜瓜(Cucumis melon L.)是世界性的重要园艺作物。甜瓜营养品质主要取决于果实中可溶性糖的含量和种类。因此,在甜瓜果实发育过程中可溶性糖的积累一直得到了人们的关注,国内外许多学者进行了这方面的研究,得出了一致的结论:甜瓜果实中总糖,尤其是蔗糖含量在距果实完熟期15天左右开始迅速提高,而糖的积累是与蔗糖代谢酶的变化息息相关的,在果实发育早期,葡萄糖和果糖含量相对较高,而此时酸性转化酶活性也很高;而在果实发育后期,蔗糖和总糖含量急剧上升,伴随着的是酸性转化酶活性的下降和蔗糖磷酸合成酶活性的提高。由此说明,甜瓜果实中糖的积累和组成是严格受糖代谢酶的调控。植物生物技术和分子生物学的发展为研究甜瓜代谢酶基因和开展甜瓜品质育种开辟了一条新途径。 本研究首先构建了甜瓜幼果的cDNA文库,并通过RT-PCR方法克隆到了甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段,构建了反义表达载体。通过农杆菌介导分别转入烟草和甜瓜,获得了转基因烟草植株和甜瓜抗性愈伤组织,具体研究结果如下: 1.甜瓜幼果cDNA文库的构建 在20世纪90年代初,美国的CLONTECH公司发明了SMART(Switching Mechanism At5'end of RNA Transcript)技术,使用一个改造了的Oligo(dT)引物,引导cDNA第一链的合成。当反转录进行到mRNA的5'端时,逆转录酶的末端转移酶活性在cDNA的3'末端加上几个C,恰好与溶液中的引物SMARTⅣ Oligonucleotide的3'端的几个G配对,此时反转录酶转换模板,继续复制SMARTⅣ Oligonucleotide的5'端,从而生成了一条含SIdARTⅣ Oligonucleotide的全cDNA。自SMART技术问世以来,在短暂的十几年内就构建了大量的cDNA文库。象其它的许多分子生物技术一样,SMART技术最初也是应用于动物,当他们在动物方面的研究比较成熟后,才被应用到植物中。目前SMART技术在植物方面的应用已有报道,在甜瓜的应用未见报道。本实验首先把SMART技术应用于甜瓜的分子生物学研究,成功地构建了一个质量高,代表性较好的甜瓜幼果cDNA文库。 以‘伊利莎白’甜瓜授粉后5天的果实为材料,采用一步法提取总RNA,利用SMART技术合成cDNA第一链,再经23个循环的长距离PCR(LD-PCR)合成双链cDNA。双链cDNA经蛋白酶K消化、纯化cDNA、SfiⅠ(A和B)酶切、CHROMA SPIN-400柱 —— 层析除去 400hp以下的小分子后,与经过 5’端脱磷的入 TiP匝XZ侣fi…和 B)/CIP载 体进行连接,经体外包装和感染 XL;8。宿主菌,得到了 8.54X”个独立的噬菌体克 隆。从中随机挑选 100个克隆进行 PCR插入片段的鉴定,电泳结果显示 PCR产物大于 500hp的片段占81%,插入片段平均长度为720hp;蓝白斑筛选鉴定表明文库的重组率 为99.53%;以甜瓜果实酸性转化酶基因CDNA片段为探针,初步筛选文库,得到了阳 性克隆。由此认为甜瓜幼果CDNA文库己经建立,为今后研究甜瓜果实糖代谢酶基因与 其发育相关基因奠定了基础。 2.甜瓜果实酸性转化酶基因CDNA片段的克隆及反义表达载体的构建 反义技术能抑制目的基因而不会改变其序列,由反义DNA介导后整合到宿主细胞 基因组中能产生稳定的目的基因的关闭,这是常规育种无法达到的。反义技术能用于产 生作物新种质,并且可用于验证一些未知功能的基因的生物学功能。反义技术在农业作 物品种改良中具有广阔前景。改善甜瓜品质,提高含糖量尤其是适当提早蔗糖积累的重 要突破口就是适时降低果实发育中酸性转化酶的活性。因此,研究甜瓜果实酸性转化酶 基因具有重要意义,可以从分子水平上研究甜瓜果实蔗糖积累与分解的分子机制,并通 过基因工程手段改良和调控甜瓜品质。本研究率先克隆了甜瓜果实酸性转化酶基因的 。DNA片段并构建了反义表达载体,为从分子水平改善甜瓜品质奠定了基础。 根据GenBank中己登记的番茄、马铃薯、胡萝卜等的酸性转化酶基因保守序列设计 了一对引物,以‘伊利莎白’甜瓜总RNA为模板,经RT。PCR反应获得了约比 的特 异性产物,与预期扩增产物的分子量相符。将该 F CR产物插入到 pMD丁载体中得到 pMAI。双向测序结果表明克隆的CDNA片段长1038hp,推导的氨基酸序列长为346个 氨基酸。与GenBank中的同源序列比较,本研究所分离。DNA片段的氨基酸序列与其 它物种酸性转化酶基因的氨基酸序列同源性多介于70%~99%,其中与茄科作物的酸性 转化酶基因氨基酸的同源性最高,与番茄同源性为99%,与马铃薯为96%,与辣椒为 93%;其次是胡萝卜、甘薯,氨基酸同源性都在80%以上。据此认为我们己率先成功克 隆到了甜瓜果实酸性转化酶基因的cDNA片段,在GenBank中登记号为AF490425。 用 Hindlll和 EcoR消化植物表达载体 pBllZI,将其 Gus基因、355启动子和多克 隆位点切除,将pSPROK的多克隆位点和355启动子插入,从而获得了pROKZ植物双 元表达载体。用 BalnHI和 Hinc 11消化 pMAI,获得 MAI基因,回收纯化后定向插入 pROKZ和 pROK3(将 pROKZ的 npt 11基因切除,由于占东完成)的 BamH侣 位 2
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2003
【分类号】:S652

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【引证文献】
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6 田红梅;甜瓜果实蔗糖代谢相关酶基因的克隆、表达分析及Anti-CmSPS1对甜瓜的遗传转化[D];山东农业大学;2008年
【参考文献】
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1 李广存,毕玉平,李杰文,单雷,王秀丽,路艳辉,徐平丽;番茄乙烯形成酶基因的克隆及其反义基因的表达载体构建[J];山东农业科学;1999年03期
2 王坚;国内外西甜瓜生产及主要应用技术研究进展(下)[J];长江蔬菜;1995年02期
3 林德佩;甜瓜基因及其育种利用(上)[J];长江蔬菜;1999年01期
4 林德佩;甜瓜基因及其育种利用(下)[J];长江蔬菜;1999年02期
5 梁峰,常团结;菊芋凝集素基因转入烟草的研究[J];河南农业科学;2002年06期
6 索滨华,陈光,王德辉,郭卫华,许贵民;网纹甜瓜糖的积累[J];核农学报;1997年03期
7 李明亮,韩一凡,邱德有,李凝,田颖川;ACC合酶cDNA克隆及其对美洲黑杨体内乙烯产生的反义抑制[J];林业科学;1999年03期
8 金勇丰,张永庆,张耀洲,陈大明,张上隆;桃蔗糖酶基因的克隆和差异表达[J];农业生物技术学报;2002年02期
9 黄丹枫,牛庆良,程浩;无土栽培甜瓜果实发育生理与品质分析[J];上海农业学报;1998年03期
10 张庆华,茅矛,陈竺;基因组研究中全长cDNA克隆的策略[J];生物工程进展;2000年04期
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1 谢永芳,舒坤贤,梁亦龙,袁帅,张继承;小鼠胚胎发育中期肠细胞增殖与凋亡的研究[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
2 王子良,许丽艳,李恩民;质粒制备和反应温度对嵌套缺失技术的影响[J];癌变.畸变.突变;2005年02期
3 康振桥;季艳霞;杨志勇;苏光;崔彦芝;;血管内皮生长因子亚型在人乳腺癌细胞中的表达差异[J];癌变.畸变.突变;2006年03期
4 安社娟;陈家;陈华洁;常薇;刘莉莉;赵艳丰;陈学敏;;反式二羟环氧苯并(a)芘相关新基因brg的全长克隆[J];癌变.畸变.突变;2006年04期
5 安刚;黄天华;谢庆东;王德刚;;pCXN2-mIZUMO对C57BL/6小鼠生育能力的影响[J];癌变.畸变.突变;2007年04期
6 朱斌;杨罗艳;赵晓昆;;膀胱癌多药耐药基因MDR-1与金属硫蛋白-3表达的关系[J];癌变.畸变.突变;2007年05期
7 于喜艳,何启伟,孔庆国;甜瓜子叶组织培养的研究[J];山东农业科学;2002年02期
8 孙丽萍,王秀峰,杨建平,于明礼,于喜艳;番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与序列分析[J];山东农业科学;2005年02期
9 侯丽霞;何启伟;赵双宜;王崇启;董玉梅;;薄皮甜瓜自交系高效组织培养技术的研究[J];山东农业科学;2006年03期
10 田红梅;樊继德;于喜艳;;甜瓜蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因正反义表达载体的构建[J];山东农业科学;2007年03期
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1 黄月琴;薛建平;;植物抗病分子机制及抗病基因工程研究进展[A];现代农业理论与实践——安徽现代农业博士科技论坛论文集[C];2007年
2 刘灵智;宋锦羽;龙桂友;邓子牛;肖玉明;冯飞;;柑橘果实成熟过程中糖酸代谢及其关键酶的研究进展[A];园艺学文集5[C];2010年
3 王春花;成军;郎振为;吴煜;杨艳杰;张黎颖;刘妍;;基因表达谱芯片技术筛选XTP3蛋白反式调节基因[A];第一届全国人工肝及血液净化学术年会暨全国人工肝及血液净化攻关协作组成立大会论文集[C];2004年
4 唐南洪;王晓茜;李秀金;陈燕凌;;构建特异高表达人谷氨酰胺合成酶基因(hGS)的肝细胞[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
5 谢永红;丁志祥;欧毅;吕斌;;柑橘果实糖份积累与代谢研究进展[A];重庆市园艺学会会员代表大会论文集[C];2005年
6 张迟;柳俊;谢从华;宋波涛;成善汉;朱青;;马铃薯低温糖化的机理及其改良策略[A];中国马铃薯学术研讨会与第五届世界马铃薯大会论文集[C];2004年
7 尹钧;任江萍;李志岗;李磊;周苏玫;卫丽;宋丽;;转基因抗穗发芽小麦的获得[A];中国作物学会2007年全国作物遗传育种学术研讨会论文集[C];2007年
8 吴洁;周宇;张雪梅;阎文昭;;幽门螺杆菌热休克蛋白基因HspB-C对甘薯遗传转化的研究[A];中国核科学技术进展报告——中国核学会2009年学术年会论文集(第一卷·第8册)[C];2009年
9 徐昌杰;胡桂兵;张上隆;;果实成熟特异启动子研究进展[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
10 何晓明;谢大森;彭庆务;;培养因素对节瓜离体植株再生的影响[A];中国园艺学会第五届青年学术讨论会论文集[C];2002年
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2 王发明;柚(citrus grandis Osbeck)单染色体AFLP分子标记体系及文库的建立[D];福建农林大学;2010年
3 石从广;油菜EMS诱变群体的构建以及油脂代谢相关基因等位多态性与油脂品质关系的研究[D];浙江大学;2010年
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5 冯守千;红梨着色机理的研究[D];山东农业大学;2011年
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2 魏礼玲;MYB转录因子家族相关EST干涉载体构建及遗传转化的研究[D];华中农业大学;2010年
3 范素杰;汁用甜橙品种品质的综合分析[D];华中农业大学;2010年
4 张鲁军;离子束诱导普通小麦小偃81 HMW-GS 1Ax1缺失突变家系突变机制研究[D];郑州大学;2010年
5 刘无双;拟南芥种子特异表达基因启动子分析[D];山东农业大学;2010年
6 刘贤娴;萝卜营养及风味物质积累规律研究[D];山东农业大学;2009年
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8 王京梅;叶籽银杏叶生雌性生殖器官发育相关基因的克隆与序列分析[D];山东农业大学;2010年
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10 田长平;梨种质资源风味品质评价及其代谢机理的初步研究[D];山东农业大学;2010年
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1 夏海武,马秀兰,万永霞;甜瓜组织培养与快速繁殖的研究[J];山东农业科学;2001年02期
2 于喜艳,何启伟,孔庆国;甜瓜子叶组织培养的研究[J];山东农业科学;2002年02期
3 孙丽萍,王秀峰,杨建平,于明礼,于喜艳;番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆与序列分析[J];山东农业科学;2005年02期
4 冯燕青;赵聪;马乐园;于喜艳;;甜瓜果实醇酰基转移酶基因的克隆及表达分析[J];山东农业科学;2009年05期
5 于克辉,韩凤珠,赵岩,王毅,许英武,李栋栋;限根技术在果树设施栽培中的应用[J];北方果树;2004年S1期
6 陈雷,秦智伟;甜瓜采后生理和贮藏保鲜研究进展[J];北方园艺;1999年06期
7 张辉;耿守东;王静;;热处理对采后甜瓜品质的影响[J];北方园艺;2008年02期
8 杨少桧,卢运明,林娜;我国几种主要水果的物流现状与存在问题[J];保鲜与加工;2001年06期
9 张海芳,赵丽芹,韩育梅;热处理在果蔬贮藏保鲜上的应用[J];保鲜与加工;2005年02期
10 赵元寿;安力;李翔宇;侯琪;王鹤娉;;厚皮甜瓜衰老过程中保护性酶类的变化[J];保鲜与加工;2006年06期
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1 申江;和晓楠;王素英;;冰温贮藏与冷藏对甜瓜氨基酸及其他品质的影响对比[A];中国制冷学会2009年学术年会论文集[C];2009年
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1 安新民;柑橘转化酶基因家族成员的分离及表达研究[D];浙江大学;2002年
2 艾希珍;日光温室黄瓜光能利用与光合效率调节机理的研究[D];山东农业大学;2003年
3 刘春香;黄瓜风味品质的构成因素及部分因素遗传参数的研究[D];山东农业大学;2003年
4 陈美霞;杏果实风味物质的组成及其遗传特性的研究[D];山东农业大学;2005年
5 王全华;葡萄糖氧化酶(GO)基因在番茄中的遗传转化及其抗病机理研究[D];山东农业大学;2005年
6 哈斯阿古拉;甜瓜耐贮藏基因工程研究[D];内蒙古大学;2004年
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8 程鸿;甜瓜APX和Mlo基因的克隆与功能分析[D];山东农业大学;2009年
9 崔宁博;西北半干旱区梨枣树水分高效利用机制与最优调亏灌溉模式研究[D];西北农林科技大学;2009年
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2 钟俐;根癌农杆菌介导的雪花莲凝集素基因转入新疆甜瓜的研究[D];新疆农业大学;2001年
3 李志凌;甜瓜果实糖分积累与蔗糖代谢相关酶变化规律的基因型差异研究[D];浙江大学;2003年
4 姚国新;甜瓜分子遗传图谱构建的随机引物筛选及甜瓜遗传多样性研究[D];宁夏大学;2004年
5 刘玲玲;Chi和Glu的克隆与维管束特异启动子驱动的表达载体构建及其对甜瓜的遗传转化[D];甘肃农业大学;2004年
6 孙丽萍;番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和番茄遗传转化体系的研究[D];山东农业大学;2005年
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1 闻小霞;赵荷仙;刘刚;周爱凤;张桂梅;;甜瓜蔗糖合成酶基因(CmSS1)反义表达载体的构建及遗传转化[J];山东农业科学;2013年04期
2 潘力;王云艳;王斌;何攀;李俊星;;根癌农杆菌介导脂肪酶在无孢黑曲霉中的高效表达[J];华南理工大学学报(自然科学版);2012年05期
3 王霞;张雪莹;李倩;王洋洋;盛云燕;;甜瓜品种果实性状的差异性分析[J];黑龙江八一农垦大学学报;2013年03期
4 刘岩;姚强;宫志远;高兴喜;韩建东;任鹏飞;张雪梅;任海霞;李瑾;曲玲;;扩张蛋白Swollenin基因香菇表达载体构建及其初步转化[J];食品科学;2011年11期
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6 黄诚梅;杨翠芳;潘有强;魏源文;邓智年;吕维莉;李杨瑞;;可溶性酸性转化酶SAI基因在不同甘蔗基因型中表达分析[J];中国糖料;2013年02期
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1 姚强;刘岩;宫志远;高兴喜;韩建东;任鹏飞;万鲁长;任海霞;张雪梅;李瑾;曲玲;;Swollenin基因香菇表达载体的构建及遗传转化研究[A];海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药用菌学术研讨会论文摘要集[C];2011年
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1 田红梅;甜瓜蔗糖磷酸合成酶基因的功能鉴定与分析[D];山东农业大学;2011年
2 盛云燕;甜瓜雌雄异花同株遗传分析与基因定位的研究[D];东北农业大学;2009年
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1 闻小霞;甜瓜果实蔗糖合成酶基因(SS)的克隆、表达分析及遗传转化[D];山东农业大学;2010年
2 于海娜;瑞氏木霉T-DNA插入筛选纤维素降解突变株及液泡蛋白分选受体基因功能研究[D];山东大学;2011年
3 李璐;牛凝乳酶基因在黑曲霉中的表达研究[D];东北农业大学;2011年
4 李莉;一个玉米两性花突变株tsf1的表型特征和初步基因定位[D];西北农林科技大学;2011年
5 郭艳梅;核盘菌EST序列分析及农杆菌介导的遗传转化体系的优化[D];吉林大学;2008年
6 田红梅;甜瓜果实蔗糖代谢相关酶基因的克隆、表达分析及Anti-CmSPS1对甜瓜的遗传转化[D];山东农业大学;2008年
7 刘军伟;西瓜强雌性状的遗传分析和分子标记研究[D];天津大学;2008年
8 殷世宁;无选择标记和无载体骨架序列的转反义ACS1基因河套蜜瓜耐贮藏品系选育[D];内蒙古大学;2009年
9 郭敏;西瓜遗传图谱构建及其强雌性状的基因定位研究[D];天津大学;2009年
10 郭敏;盐碱地星星草(Puccinellia tenuiflora)根cDNA文库构建与PtLIR1克隆及表达分析[D];哈尔滨师范大学;2012年
【二级参考文献】
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1 王坚;国内外西甜瓜生产及主要应用技术研究进展(上)[J];长江蔬菜;1995年01期
2 张友杰;;以蒽酮分光光度法测定果蔬中的葡萄糖、果糖、蔗糖和淀粉[J];分析化学;1977年03期
3 汤华;;核酶的抗病毒作用研究[J];国外医学(微生物学分册);1994年01期
4 许政(日岂),李洁,张庆琪;核酶的体外合成及其对烟草叶病毒RNA靶的作用[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1992年01期
5 王慧中,杜立群,黄发灿,李安生,邵启全;根瘤农杆菌介导的枸杞转化及转化植物的获得[J];中国科学(B辑 化学 生命科学 地学);1993年04期
6 李向辉,朱祯;生物途径控制虫害[J];科学通报;1998年19期
7 朱玉,吴茜,高越峰,徐鸿林,刘春明,周兆斓,朱祯,李向辉;雪花莲外源凝集素基因的克隆、序列分析和植物表达载体的构建[J];农业生物技术学报;1997年04期
8 崔德才,温孚江;磷脂酶D(PLD)在植物信号转导中的作用[J];山东农业大学学报(自然科学版);2000年02期
9 陆长德,陈农安,祁国荣;核酶对靶RNA的体外切割反应的计算机分析[J];生物化学与生物物理学报;1996年03期
10 伍宁丰,孙芹,姚斌,范云六,饶红宇,黄敏仁,王明庥;抗虫的转AaIT基因杨树的获得[J];生物工程学报;2000年02期
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1 夏国京,孙颖,曲远富,张天邦;齐甜一号甜瓜大棚栽培技术[J];北方果树;1998年03期
2 于喜艳,赵双宜,何启伟,孔庆国;甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆[J];园艺学报;2003年03期
3 夏国京,蔡宏伟;日光温室草莓和甜瓜立体栽培技术[J];辽宁农业职业技术学院学报;1997年02期
4 于喜艳;田红梅;樊继德;王秀峰;;甜瓜果实酸性转化酶基因反义表达载体的构建(英文)[J];果树学报;2006年06期
5 ;老铁皮甜瓜增产经验[J];新疆农业科学;1977年Z1期
6 稼圃;香满田园瓜如蜜[J];新农业;1981年13期
7 肖启桃,肖鹏;伽师县甜瓜栽培技术[J];新疆农业科技;1989年03期
8 宋炳彦;河北大名‘黄金坠’簿皮甜瓜[J];中国蔬菜;1990年03期
9 ;甜瓜新品种─富锦黄金道[J];中国农垦;1994年11期
10 戴祖云,祁家保;甜瓜新品种──丰甜一号[J];安徽农业;1995年01期
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1 刘富中;刘万勃;宋明;;利用RAPD标记研究甜瓜种质的遗传多样性[A];全国蔬菜遗传育种学术讨论会论文集[C];2002年
2 刘慧;韩晓林;姜永斌;姜春艳;唐丽丽;程显宽;董家伟;;甜瓜嫁接技术研究报告[A];2004年辽宁农业科学研讨会论文集[C];2004年
3 王中原;杨先发;何伟;谭德辉;杜贤尧;;甜瓜与棉花套种优质高效栽培模式及技术[A];中国棉花学会2004年年会论文汇编[C];2004年
4 马跃;;西瓜甜瓜生产发展与科技进步[A];山东园艺学会第七次会员代表大会暨学术研讨会论文集[C];2011年
5 陶永红;陆春梅;;甘肃民勤县甜瓜生产现状及发展对策[A];纪念全国西瓜甜瓜科研与生产协作50周年暨第12次全国西瓜甜瓜学术研讨会论文摘要集[C];2009年
6 郝金凤;高峰;牛一丁;张立全;王静;殷世宁;哈斯阿古拉;;转无载体无选择标记反义ACO基因甜瓜某些植物学及果实生理生化特性的分析[A];北方遗传资源的保护与利用研讨会论文汇编[C];2010年
7 于喜艳;赵双宜;何启伟;;甜瓜果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆、反义表达载体的构建和烟草的遗传转化[A];蔬菜分子育种研讨会论文集[C];2004年
8 任永兵;张其安;江力;方凌;袁怀波;严从生;孙佳佳;汪洋;孟卫卫;曹树青;;3种不同耐寒类型甜瓜品种的生理特征及分子机制[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
9 许如意;李劲松;任红;安可屾;;甜瓜露地栽培与设施栽培比较试验初报[A];庆祝中国园艺学会创建80周年暨第11次全国会员代表大会论文摘要集[C];2009年
10 沈吾山;黄伟忠;冯家富;;夏秋大棚甜瓜基质栽培技术研究[A];浙江省园艺学会第九届年会论文集[C];2001年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 康灵芝;瓜既早熟又香甜[N];吐鲁番报(汉);2009年
2 记者 肖杨;阎良甜瓜亩收入创历史最高[N];陕西日报;2009年
3 通讯员 王凤起 郜玉华;牡丹区早春小甜瓜“长成”大产业[N];菏泽日报;2010年
4 刘江涛、范虎;甜瓜产业给乐亭农民带来8亿元经济效益[N];唐山劳动日报;2010年
5 ;永甜3号甜瓜[N];农民日报;2005年
6 徐丽娟;哈甜1号甜瓜[N];农民日报;2005年
7 海门市农林局 黄颂禹;两熟甜瓜与冬莴苣轮作[N];江苏农业科技报;2009年
8 李雪莲 记者 李春雷 李贺;一副“好牌”打出致富路[N];齐齐哈尔日报;2011年
9 张文言 宋立芬 骆文忠 张红起 刘明锵 何铁柱;金塑大棚种甜瓜[N];山西科技报;2001年
10 吴斌;农民也要研究市场[N];丹东日报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 于喜艳;甜瓜幼果cDNA文库的构建、酸性转化酶基因的克隆及遗传转化[D];山东农业大学;2003年
2 汤谧;‘风味甜瓜’系列果实高糖高酸品质形成的机理研究[D];华中农业大学;2010年
3 王贤磊;甜瓜遗传图谱的构建与抗病基因遗传分析[D];新疆大学;2011年
4 牛庆良;基于生理分析和生长模拟的甜瓜薄层基质生产系统构建[D];上海交通大学;2008年
5 黄志;丛枝菌根真菌对甜瓜抗旱性的生理效应及分子机制的研究[D];西北农林科技大学;2010年
6 赵长增;DNA分子标记技术在甜瓜西瓜杂种优势利用和抗病育种中的应用[D];华南热带农业大学;2003年
7 郭玉蓉;硅化物对甜瓜抗真菌病害的生理机理研究[D];甘肃农业大学;2003年
8 杨振超;日光温室内最佳风速指标与CFD模拟[D];西北农林科技大学;2006年
9 潘静娴;甜瓜穴盘苗成苗生理基础及其相关技术参数确定[D];西北农林科技大学;2001年
10 Joseph N. Wolukau;甜瓜抗蔓枯病的遗传学、系统发生学和分子标记的研究[D];南京农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 樊继德;甜瓜酸性转化酶基因表达特性分析及功能鉴定[D];山东农业大学;2007年
2 葛屹松;新疆甜瓜组培体系的优化及抗病转基因研究[D];新疆大学;2002年
3 温玲;甜瓜杂种优势早期预测指标的筛选[D];东北农业大学;2003年
4 宋晓涛;除草剂对甜瓜抗病性的诱导作用[D];东北农业大学;2000年
5 桑艳朋;膜下滴灌条件下甜瓜田间需水规律的研究[D];石河子大学;2005年
6 闻小霞;甜瓜果实蔗糖合成酶基因(SS)的克隆、表达分析及遗传转化[D];山东农业大学;2010年
7 刘万勃;RAPD和ISSR标记对甜瓜种质遗传多样性及杂种鉴定的研究[D];西南农业大学;2002年
8 马凌云;嘧菌酯对“银帝”甜瓜采前及采后主要病害的控制[D];甘肃农业大学;2004年
9 王霞霞;土壤干旱对不同生态型甜瓜(Cucumis melo L.)生理生化特性及生长发育的影响[D];甘肃农业大学;2004年
10 杨冬梅;芽孢杆菌B1对“银帝”甜瓜主要采后病害的控制[D];甘肃农业大学;2004年
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