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《山东农业大学》 2004年
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菊花再生体系的建立及农杆菌介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转化的研究

刘军  
【摘要】:本研究以菊花(Dendranthema morifolium)品种‘日本黄’、‘阳光’、‘国华积富’为试验材料,研究了不同品种、不同激素浓度配比对菊花愈伤组织、不定芽和根诱导的影响。优化了菊花再生条件,获得了菊花叶片高效再生体系。试验结果表明,品种‘日本黄’的再生能力明显高于其他两个品种,并筛选出诱导愈伤组织、不定芽和根的最佳培养基。研究中同时也发现,品种‘日本黄’叶片接种在MS+NAA(1mg/L)+6-BA(3mg/L)培养基上,经过一段时间的培养,可直接再生出不定芽,并且芽诱导率高达100%,繁殖系数达8.54,再生芽在1/2MS+NAA(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L)培养基上经过10天左右可诱导出根,生根率可达100%,完全可以满足遗传转化的需要。 在建立了菊花品种‘日本黄’再生体系的基础上,利用农杆菌介导的遗传转化法进行遗传转化研究。试验结果表明,叶盘预培养、农杆菌菌液OD600值、侵染时间和共培养时间均对菊花的遗传转化率有较大影响。同时得出不经过预培养、OD600=0.6、侵染10分钟和共培养4天菊花遗传转化率最高,同时考虑了滤纸帽法对转化率的影响。共培养后把叶盘转入MS+ NAA(1mg/L)+6-BA(3mg/L)+Km(30mg/L)培养基上进行分化筛选培养。30天后可分化出不定芽,把不定芽转到MS +NAA(1mg/L) +6-BA(3mg/L) +Km(50mg/L)培养基上进行抗性芽的筛选,转到1/2MS+NAA(0.2mg/L)+IBA(0.2mg/L)+Km(25mg/L)培养基上进行生根筛选。 把经抗性筛选得到的转基因苗通过PCR扩增表明,转基因植株中可以检测出有目的基因GFP基因的存在,目的基因已成功插入到菊花的基因组中。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2004
【分类号】:S682.11

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【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 吴友根;;菊花外植体分化诱导及植株再生研究初报[J];中国农学通报;2007年12期
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 陈琳;切花菊转DdICE1基因研究[D];南京农业大学;2011年
2 崔新利;匍匐型地被菊转DmDREBα基因研究[D];南京农业大学;2009年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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3 陶静,詹亚光,由香玲,杨传平,刘玉喜;白桦组培再生系统的研究(Ⅲ)——组培过程中内源激素的变化[J];东北林业大学学报;1998年06期
4 吴擢溪,李振问,吴大忠;杉木组织培养繁殖体系建立的研究[J];福建林学院学报;1991年01期
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【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国重要会议论文全文数据库 前10条
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2 张力;于晓英;冯岳东;杨潇怡;;温度影响彩叶植物叶片呈色的研究进展[A];园艺学文集5[C];2010年
3 张蒙蒙;王永清;严娟;陶炼;;枇杷成花基因研究进展[A];第五届全国枇杷学术研讨会论文(摘要)集[C];2011年
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5 任洪艳;孙霞;郑成淑;束怀瑞;;利用cDNA-AFLP技术筛选菊花开花相关基因[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
6 李冉馨;李雯琪;李彦;张启翔;吕英民;;抗寒花果兼用梅花新品种选育研究[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
7 景珊;李庆卫;;地被茶菊新品种选育研究初报[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
8 吴锦娣;安娜;刘运权;刘伟;;建兰遗传转化体系之筛选体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
9 王希;夏伯顺;王彩云;;菊花杂种一代的花色、瓣型及花型遗传特性的初步探讨[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
10 陈卿然;王四清;;不同温度对大花蕙兰‘红霞'开花的影响[A];中国观赏园艺研究进展2011[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 秦伟;新疆野苹果繁育特性及种质资源亲缘关系研究[D];新疆农业大学;2010年
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3 唐丽;湖南南天竹遗传多样性及园林利用评价体系研究[D];中南林业科技大学;2007年
4 马英姿;药用植物蚬壳花椒化学成分分析及繁殖技术研究[D];中南林业科技大学;2010年
5 荣立苹;东北地区野生百合种质资源及遗传多样性研究[D];沈阳农业大学;2010年
6 马进;水稻条纹病毒(RSV)RNA3、RNA4的克隆与抗RSV转基因水稻的培育[D];山东农业大学;2011年
7 张晓曼;小报春生物学特性与多倍体种质创新研究[D];河北农业大学;2011年
8 孙宇涵;秋水仙素诱导银杏2n雄配子低得率的机理研究[D];北京林业大学;2011年
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10 张荻;百子莲花芽分化及开花机理研究[D];东北林业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王俊;林荫银莲花离体快繁体系的优化及其有效成分的研究[D];华中农业大学;2010年
2 刘冉冉;枫香遗传转化体系的优化及转化PaFT基因的研究[D];华中农业大学;2010年
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4 李茂娟;百日草自交不亲和性初步研究[D];华中农业大学;2010年
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7 刘小云;楸树优良类型—圆基长果楸组织培养技术的研究[D];安徽农业大学;2010年
8 李晓东;茶树体细胞胚发生的影响因素及超微结构和几种内含物质变化的研究[D];山东农业大学;2010年
9 刘建民;“复瓣玫瑰红”蔷薇的快繁技术研究[D];山东农业大学;2010年
10 张晓琳;桂花光合特性的研究[D];山东农业大学;2010年
【同被引文献】
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1 孙磊;张启翔;;地被菊‘北林黄’再生体系的建立及其抗生素敏感性研究[J];安徽农业科学;2006年19期
2 李新玲;杨传平;徐香玲;曲敏;;与逆境胁迫相关的rd29A启动子和CBF2基因的克隆及其表达载体构建[J];安徽农业科学;2007年13期
3 任旭琴 ,单志娟;菊花组培快繁系统的优化研究[J];安徽农业;2004年12期
4 龚学臣,季静,王罡,抗艳红,任永霞;应用农杆菌介导法进行菊花的遗传转化[J];北方园艺;2005年02期
5 王侠礼;转基因技术在观赏植物育种中的应用[J];北方园艺;2005年06期
6 吕晋慧;孙明;孙磊;吴月亮;;菊花基因工程研究进展[J];北方园艺;2007年01期
7 苏焕然,张丹,汪清胤,黄永芬;花卉基因工程研究进展[J];北方园艺;1996年04期
8 高亦珂,赵勃,丁国勋,张启翔;菊花茎叶外植体再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2001年01期
9 吕晋慧,吴月亮,孙磊,高亦珂,张启翔;菊花叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2005年04期
10 戴思兰,陈俊愉;菊属7个种的人工种间杂交试验[J];北京林业大学学报;1996年04期
中国博士学位论文全文数据库 前5条
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2 张常青;地被月季、菊花再生和抗旱遗传转化体系建立及其耐旱性快速评价方法研究[D];中国农业大学;2004年
3 洪波;逆境诱导转录因子DREB1A基因转化地被菊花的研究[D];中国农业大学;2005年
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5 吴月亮;根癌农杆菌介导的PEAMT基因转化菊花的研究[D];北京林业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 晁岳恩;根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D];西南农业大学;2002年
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7 王蔚林;菊花再生体系的建立及用PPMADS5基因进行遗传转化的研究[D];首都师范大学;2007年
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【二级引证文献】
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1 张文;李振萍;王艳;徐娜;姜长阳;;泥胡菜的组织培养及高效无性系建立的研究[J];安徽农业科学;2009年06期
2 于红芳;许刚;李永华;张丽英;;菊花品种唐宇金秋组织培养研究[J];河南农业科学;2009年11期
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1 牛雅静;李青;戴思兰;;切花菊‘神马'和‘黄秀芳'成熟花瓣再生体系的建立[A];中国观赏园艺研究进展(2010)[C];2010年
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1 陈鹏彦;朝鲜野菊再生系统建立的研究[D];辽宁师范大学;2010年
2 陈琳;切花菊转DdICE1基因研究[D];南京农业大学;2011年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 魏益宁;毛白杨叶片受马格栅锈菌侵染以后多酚氧化酶和过氧化物酶活性及同功酶谱带变化趋势的研究[J];北京林学院学报;1984年03期
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3 姚洪军,罗晓芳,田砚亭;植物组织培养外植体褐变的研究进展[J];北京林业大学学报;1999年03期
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6 詹亚光,陶静,杨传平,刘玉喜;白桦组培再生系统的研究(Ⅱ)——影响因素及培养程序[J];东北林业大学学报;1998年06期
7 陶静,詹亚光,由香玲,杨传平,刘玉喜;白桦组培再生系统的研究(Ⅲ)——组培过程中内源激素的变化[J];东北林业大学学报;1998年06期
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10 吴若菁;马尾松离体胚组织培养初报[J];福建林学院学报;1993年01期
【相似文献】
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1 吕晋慧,吴月亮,孙磊,高亦珂,张启翔;菊花叶片不定芽再生体系的研究[J];北京林业大学学报;2005年04期
2 吴友根;;菊花外植体分化诱导及植株再生研究初报[J];中国农学通报;2007年12期
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4 章契堂;;盆栽菊花的后期管理[J];中国花卉盆景;1991年11期
5 孔令举,李娟,李赫男;菊花病虫害的防治[J];吉林农业;1995年08期
6 李锋;用菊花蜜巧治萎缩性鼻炎[J];农技服务;1998年06期
7 李鹏翔;;鲜菊花加工四要点[J];农家科技;2001年09期
8 赵子贤;;菊花反季节栽培技术[J];科技致富向导;2001年10期
9 张海琴;菊花嫁接技术[J];安徽林业;2002年06期
10 杨正芳;菊趣[J];中国花卉园艺;2002年23期
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2 ;中国菊花研究会对我国菊花品种整理、审定与登录的暂行规定[A];中国菊花研究论文集(1997-2001)[C];2001年
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4 陈炳戍;;菊花医疗保健例选(简报)[A];中国菊花研究论文集(1997-2001)[C];2001年
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7 王桂英;;菊花矮化种植法(简报)[A];中国菊花研究论文集(1997-2001)[C];2001年
8 李辛雷;陈发棣;王红;房伟民;管志勇;;菊花外植体再生体系的研究[A];中国菊花研究论文集(2002—2006)[C];2002年
9 叶家良;;秀色可餐——菊花宴[A];中国菊花研究论文集(1997-2001)[C];2001年
10 邢红斌;;西安地区菊花现状与发展浅析[A];中国菊花研究论文集(1997-2001)[C];2001年
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7 刘军;盆栽菊花的插芽儿方法[N];中国花卉报;2006年
8 本报记者 陈慧吴娟;输出技术或有一搏[N];中山日报;2007年
9 吉学锐;家庭栽植的菊花冬季如何管理[N];陕西科技报;2008年
10 亦儿;泰州建设200亩出口菊花基地[N];江苏农业科技报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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4 刘伟;不同生育期氮磷钾胁迫对菊花黄酮类化合物的代谢调控研究[D];华中农业大学;2010年
5 吕晋慧;根癌农杆菌介导的AP1基因转化菊花的研究[D];北京林业大学;2005年
6 白新祥;菊花花色形成的表型分析[D];北京林业大学;2007年
7 范爱丽;大白菜细胞质雄性不育基因orf224和orf138表达载体构建及遗传转化[D];西北农林科技大学;2009年
8 张荣东;中国古代菊花文化研究[D];南京师范大学;2008年
9 孙宪芝;菊花光合作用对高温胁迫的响应机理研究[D];山东农业大学;2008年
10 丁焱;DFL基因在甘菊中的转化与表达研究[D];北京林业大学;2009年
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3 刘晓红;菊花无土栽培研究[D];北京林业大学;2004年
4 郑文俊;六种菊属植物的耐热性研究[D];华中农业大学;2004年
5 玉云祎;转基因菊花遗传分析和杂交育种的研究[D];北京林业大学;2003年
6 任永霞;利用农杆菌介导法将类胡萝卜素合成酶基因LycB导入番茄、菊花的研究[D];中国人民解放军军需大学;2003年
7 王春夏;菊花育种技术及其F_1代杂种鉴定[D];华中农业大学;2004年
8 晁岳恩;根癌农杆菌介导的菊花遗传转化体系的建立及ipt基因的导入[D];西南农业大学;2002年
9 刘彦泓;雪花莲凝集素基因转化菊花及转基因植株抗蚜性研究[D];辽宁师范大学;2003年
10 刘军;菊花再生体系的建立及农杆菌介导绿色荧光蛋白(GFP)基因转化的研究[D];山东农业大学;2004年
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