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《山东农业大学》 2005年
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网状内皮组织增生症病毒的分子流行病学调查及其在宿主免疫选择压下的分子变异

王玉  
【摘要】:为了解网状内皮组织增生症病毒(Reticuloendotheliosis Virus,REV)流行野毒株囊膜糖蛋白基因(env)的变异情况,利用经细胞培养、间接荧光抗体试验和PCR扩增的方法从我国1999—2004年间不同省份的鸡场所采集样品中分离和鉴定的REV野毒株及国外分离株,以一对特异性引物对其env基因进行PCR扩增后再克隆、测序,并用DNAstar软件与已发表env基因的序列进行同源性比较分析。结果表明除缺陷致瘤T株的增殖辅助病毒A株可能由于历史的原因而与其它株相差较大外,参与比较的其它各env基因序列相对比较保守,在核苷酸水平或氨基酸水平的同源性都在92%以上,其间仅有6个碱基或2个氨基酸的差异。这种差异在env基因的局部则更加明显,且在不同毒株间呈现一定的规律性,但与各毒株的分离年代、分离地域没有明显的相关性。另外,在env基因序列上发生变异的集中区段,经计算其各自的NS/S值,都明显高于用以判断病原在某种选择压作用下相应基因发生变异的公认值2.0。这表明参与比较的REV各毒株由最初原始毒分支进化过程中,即在与宿主长期的适应性斗争中,其env基因明显地受到宿主免疫系统的优势筛选作用,从而表现出变异的一致性。 鉴于自然分离野毒株在病原学上仍属于一庞杂的群体,这将影响到对其继后研究分析的严谨性和精确性。而要达此效果,只有将最初分离病毒群中占优势的病毒粒子纯化出来,构建遗传背景清楚的病毒模型,从而使继后的研究排除偶然性的干扰,便于研究结果的分析、推理。在此意义上,本文以REV中国分离株HA9901为样本,以6对相互连续且部分重叠的引物对其前病毒cDNA进行PCR扩增克隆和测序,从而完成了其前病毒cDNA全基因组核苷酸序列,这也是第一个以鸡源游离的感染性完整病毒粒子完成的REV全基因组序列。将此序列与已知的其它REV毒株全基因组序列相比较的结果表明,REV的整个基因组相当保守,不同毒株相间的同源性都较高,尤其编码功能蛋白的pol基因序列更是完全相同。但在REV增殖过程中发挥重要作用的LTR序列,则因分离宿主的不同而有两处显著的差异,只是这一差异的意义还有待进一步求证。 为验证HA9901全基因组序列的正确性,在其编码gp30和env基因的相应序列上选取引物,经PCR扩增及继后的定向克隆,将二者分别克隆入表达载体pGEX-6P-1或pcDNA3.1/Zeo(+)中。各克隆质粒分别经转化表达宿主菌E.coli.BL21或经
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2005
【分类号】:S852.65

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【引证文献】
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 邓小芸;网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立[D];东北农业大学;2011年
2 孙淑红;禽网状内皮组织增生病病毒与J-亚群白血病病毒的致病性及其疫苗研究[D];山东农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 唐茂恒;烟台地区规模化肉种鸡场免疫抑制性疫病的流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前9条
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9 崔治中,杜岩,赵文明,吉荣,柴家前;禽网状内皮组织增生病病毒感染和鸡群的免疫抑制[J];中国兽药杂志;2000年01期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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2 刘功振;张洪海;刘青;邱波;王峰;王晓伟;陈洪博;成子强;;感染J亚群禽白血病病毒的蛋鸡群中检测出B亚群禽白血病病毒[J];病毒学报;2009年06期
3 齐岩;张贺楠;刘有昌;;禽白血病的危害及防控[J];家禽科学;2010年06期
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6 刘思当,柴家前,谭勋,崔治中,宁章勇,叶来敏;禽网状内皮组织增殖病的诊断及淋巴器官的病理变化[J];山东畜牧兽医;2001年04期
7 崔治中;;规模化肉鸡安全生产与免疫抑制性病毒多重感染的预防控制[J];山东畜牧兽医;2008年01期
8 祝丽;张玲娟;;禽白血病病毒与免疫抑制[J];山东畜牧兽医;2008年12期
9 柴家前;王贵强;孙淑红;郭慧君;崔治中;;J亚群禽白血病病毒分子流行病学研究进展[J];山东畜牧兽医;2009年01期
10 陈晓霞;苏应娟;王艇;;细鳞苔科psbA基因的适应性进化分析[J];西北植物学报;2010年08期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 庄金秋;梅建国;沈志强;;鸡贫血病毒实验室诊断方法研究进展[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
2 庄金秋;毕研丽;梅建国;王金良;苗立中;沈志强;;应用PCR法检测禽源生物制品中禽网状内皮组织增生症病毒[A];中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会第三次学术研讨会论文集[C];2012年
3 刘思当;柴家前;谭勋;崔治中;宁章勇;;禽网状内皮组织增殖病病鸡淋巴器官的病理变化[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十一次兽医病理学、第十次动物病理生理学学术研讨会论文集[C];2001年
4 张玲娟;刘杰;成子强;刁秀国;王桂花;朱国;;禽白血病病毒J亚群(ALV-J)免疫抑制特性的初步研究[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
5 王玉;崔治中;姜世金;;网状内皮组织增生病病毒中国分离株REV/HA9901全基因组核苷酸序列的测定与分析[A];中国畜牧兽医学会2004学术年会暨第五届全国畜牧兽医青年科技工作者学术研讨会论文集(上册)[C];2004年
6 郭慧君;李宏梅;孙淑红;孙爱军;柳凤祥;崔治中;;REV与MDV共感染对鸡免疫学反应的影响[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(上册)[C];2006年
7 郑玉姝;赵宏坤;崔治中;;禽网状内皮组织增生病病毒感染SPF鸡对脾白细胞中IFN-γ产生的影响[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
8 孙淑红;崔治中;;REV感染雏鸡、雏鸭对禽流感疫苗抗体反应的抑制作用及其预防控制[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
9 孙爱军;崔治中;;一株整合有禽反转录病毒长末端重复序列的马立克氏病病毒的毒力测定[A];中国畜牧兽医学会禽病学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2008年
10 杨娟;何召庆;;禽网状内皮组织增生病病毒检测方法研究进展[A];首届中国兽药大会——兽医生物制品学、兽医微生物学学术论坛论文集(2008)[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 赵冬敏;B亚群禽白血病病毒分离株的生物学特性[D];山东农业大学;2010年
2 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
3 邱玉玉;A亚群禽白血病病毒单克隆抗体的制备和不同亚群禽白血病病毒共感染相互影响的研究[D];山东农业大学;2011年
4 崔杰;翼手目维生素C合成系统进化研究[D];华东师范大学;2011年
5 王召锋;牦牛驯化和适应:线粒体基因组证据[D];兰州大学;2011年
6 邓小芸;网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立[D];东北农业大学;2011年
7 姜世金;Ⅰ型马立克氏病病毒pp38和pp24基因的表达及序列测定与分析[D];中国农业大学;2003年
8 张志;我国近年来马立克氏病病毒野毒株分子流行病学和生物学特性的研究[D];山东农业大学;2004年
9 刘思当;鸡J亚群白血病病毒与网状内皮增殖病病毒混合感染发病机理的研究[D];中国农业大学;2005年
10 郑玉姝;免疫抑制性病毒感染对SPF鸡脾细胞IFN-γ产生的影响[D];山东农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 颜赟;鸡免疫抑制性病毒共感染的流行病学调查[D];山东农业大学;2010年
2 刘功振;禽白血病病毒J亚群、B亚群的分离鉴定及核酸探针的制备[D];山东农业大学;2010年
3 孙洪磊;整合禽网状内皮组织增生病病毒基因的鸡痘病毒分子生物学鉴定及致病机理研究[D];山东农业大学;2010年
4 王广伟;枣庄地区鸡大肠杆菌病的防治研究[D];山东农业大学;2010年
5 孟斌;山东省白羽肉鸡免疫抑制病病原学和血清学调查[D];山东农业大学;2010年
6 杨明;鸡传染性贫血病毒与其它免疫抑制性疾病共感染的相互作用[D];山东农业大学;2010年
7 郭文龙;规模化肉鸡场主要免疫抑制性疫病的分子流行病学调查及传播特点分析[D];山东农业大学;2010年
8 王景艳;影响鸡的免疫效果的三个因素的分析[D];山东农业大学;2010年
9 吴萍萍;四种蛋传性病毒病多重PCR检测方法的建立[D];安徽农业大学;2010年
10 尹青;蛋用型鸡禽白血病的病毒感染动态及病理学研究[D];山东农业大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 陈溥言,崔治中,L.F.Lee,R.L.Witter;非缺陷性网状内皮组织增生病毒的血清学区别[J];病毒学报;1987年03期
2 杜岩,崔治中,秦爱建,RFSilva,LFLee;鸡的J亚群白血病病毒的分离及部分序列比较[J];病毒学报;2000年04期
3 吉荣;崔治中;王锡乐;孙淑红;;分子克隆化禽网状内皮组织增生症病毒传染性及其前病毒全基因组序列研究[J];病毒学报;2005年06期
4 崔治中;;禽反转录病毒与DNA病毒间的基因重组及其流行病学意义[J];病毒学报;2006年02期
5 李艳;崔治中;孙淑红;;黄羽肉鸡J亚群白血病病毒的分子生物学特性和致病性[J];病毒学报;2007年03期
6 孙忠慧;;鸡群免疫抑制性疾病的流行现状与防治[J];家禽科学;2007年03期
7 崔治中;;规模化肉鸡安全生产与免疫抑制性病毒多重感染的预防控制[J];山东畜牧兽医;2008年01期
8 祝丽;张玲娟;;禽白血病病毒与免疫抑制[J];山东畜牧兽医;2008年12期
9 马春霞;郑世民;;禽网状内皮组织增生病病毒分子生物学特性与免疫抑制[J];动物医学进展;2007年04期
10 胡北侠;黄艳艳;路希山;孟斌;张秀美;;肉种禽网状内皮增生症、鸡传染性贫血和禽白血病血清学调查[J];广东畜牧兽医科技;2009年01期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 孙淑红;崔治中;;REV感染雏鸡、雏鸭对禽流感疫苗抗体反应的抑制作用及其预防控制[A];中国畜牧兽医学会2006学术年会论文集(下册)[C];2006年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
2 孙淑红;禽网状内皮组织增生病病毒与J-亚群白血病病毒的致病性及其疫苗研究[D];山东农业大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 赵丽青;禽网状内皮组织增殖病的快速诊断方法的建立及初步应用[D];南京农业大学;2006年
2 周祥;广西马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定及其与其它病毒共感染的研究[D];广西大学;2007年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库 前4条
1 朱春华;江斌;林甦;林琳;刘斌琼;陈珍;林羽;黄瑜;;福州市鸡群网状内皮增生症病毒血清学调查与初步分析[J];福建农业学报;2010年03期
2 林甦;朱春华;陈珍;刘斌琼;施少华;江斌;蔡国漳;林羽;黄瑜;;鸡J亚型白血病病毒荧光定量PT-PCR检测方法的建立[J];福建农业学报;2010年03期
3 吴俊铭;任晓峰;邓小芸;王笑梅;;禽网状内皮组织增生病诊断与防制研究进展[J];畜牧兽医科技信息;2011年05期
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中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 李建亮;崔言顺;;J亚群禽白血病研究进展[A];中国畜牧兽医学会食品卫生学分会第十一次学术研讨会论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前2条
1 孙亚妮;免疫组织化学技术在鸡三种病毒性肿瘤病鉴别诊断中的应用[D];山东农业大学;2011年
2 邓小芸;网状内皮组织增生症病毒LAMP检测方法及感染性分子克隆的建立[D];东北农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
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2 陈悦;鸡生长与免疫抑制综合征(CSIS)流行病学研究[D];河南农业大学;2010年
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【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
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中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 秦爱建;禽白血病病毒J亚群囊膜糖蛋白基因的生物学和生物化学特性[D];扬州大学;1999年
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 吉荣;禽网状内皮组织增生症病毒分子生物学特性的研究[D];扬州大学;2002年
【相似文献】
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1 唐德宏;吴永启;郝明飞;张帅;孙见;丁源;孙淑红;;4个传染性囊病野毒株的致病性试验[J];中国兽医杂志;2010年09期
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7 井申荣,姜述德,余芬;昆明地区1株HAV野毒株的基因分型[J];云南大学学报(自然科学版);2001年01期
8 向福,陈悟,余龙江;基于Bioperl的基因序列获取的程序设计与实现[J];生物技术;2004年06期
9 熊毅;罗廷荣;刘棋;李华明;南松剑;郭建钢;邓朝阳;兰斌;;广西12株狂犬病野毒株的g基因序列测定与分析[J];中国病毒学(英文版);2006年02期
10 陈静;张志;杜元钊;刘秀梵;;我国鸡痘病毒野毒重组株的流行初探[J];中国兽医学报;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 范泉水;邱薇;李作生;王双印;刘海涛;夏咸杜;;犬腺病毒分子流行病学调查[A];第十一次全国养犬学术研讨会论文集[C];2005年
2 程相朝;吴庭才;龙塔;李银聚;张春杰;;鸡传染性囊病地方野毒株VP2基因的克隆与序列分析[A];中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第十三次学术讨论会和中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十二次学术讨论会论文集[C];2005年
3 刘丁;;医院感染分子流行病学的分析方法[A];中国医院协会第十六届全国医院感染管理学术年会资料汇编[C];2009年
4 于立权;李鹏;崔玉东;朴范泽;;黑龙江部分地区的猪瘟分子流行病学调查研究[A];猪的重要传染病防治研究新成果——中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第五届理事会第二次全体会议暨防检疫专业委员会第7次学术交流会论文集[C];2002年
5 范泉水;邱薇;李作生;郑颖;杨美峰;尹惠琼;王双印;李江;夏咸柱;;犬腺病毒分子流行病学调查[A];中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第六次研讨会论文集[C];2005年
6 郭玉芬;刘晓雯;徐百成;段磊;韩明鲲;赵亚丽;王大勇;纵亮;韩东一;王秋菊;;西北地区801例重度耳聋患者GJB2基因和线粒体DNA 12SrRNA 1555G突变分析[A];中华医学会第十次全国耳鼻咽喉-头颈外科学术会议论文汇编(上)[C];2007年
7 于涟;黄耀伟;李建荣;宋坤华;叶伟成;;三株传染性法氏囊病病毒A节段全长基因组结构及其编码蛋白的序列分析[A];新世纪 新机遇 新挑战——知识创新和高新技术产业发展(上册)[C];2001年
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5 记者 杨立民;青紫色素杆菌基因序列被破译[N];新华每日电讯;2001年
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7 记者 范建;我科学家精确测定毛竹一万余条基因序列[N];科技日报;2009年
8 陈茂樑 赵斌;温岭市一院在我国首次发现人博卡病毒[N];中国医药报;2006年
9 李元程;“当工人不丢人,劳动也不丢人”[N];工人日报;2007年
10 王哲 薛晓玲 赵飞 袁源 孙国清 朱新朋;河南省部分地区HIV流行毒株的基因序列测定及亚型分析[N];中国中医药报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
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7 黄莹;狂犬病毒野毒株G-L间隔区及L基因活性部位序列分析[D];吉林农业大学;2006年
8 周祥;广西马立克氏病病毒野毒株的分离与鉴定及其与其它病毒共感染的研究[D];广西大学;2007年
9 李伟娟;猪繁殖与呼吸综合征病毒遗传变异分析及感染后抗体消长规律的研究[D];河南农业大学;2009年
10 高明超;鸡痘病毒基因组中反转录病毒序列整合的研究及重组鸡痘病毒的构建[D];扬州大学;2007年
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