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《山东农业大学》 2006年
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UV胁迫下苦荞类黄酮代谢及其防御机制研究

董新纯  
【摘要】: 类黄酮(flavonoids)是植物体内主要的次生代谢物类型之一。紫外(UV)胁迫通常导致植物体内类黄酮代谢上调,类黄酮在植物体内可起紫外“吸收屏障(UV-filter)”的作用。本文以苦荞(Fagopyrum tataricum L.)新品种9279-21为材料,研究了苦荞类黄酮代谢在UV胁迫适应中的一些作用机制。 1.苦荞类黄酮次生代谢对UV胁迫的响应 利用HPLC法对苦荞类黄酮成分进行了分析,苦荞幼苗至少含有葛根素(puerarin)、柚皮苷(naringenin)、槲皮苷(quercetin)、芸香苷(rutin)、木犀草素(luteolin)、山奈酚(kaempferol)等类黄酮成分,其中含量最大的三种类黄酮成分依次为槲皮苷、芸香苷(芦丁)、柚皮苷。UV胁迫处理使苦荞类黄酮含量明显提高,幼苗株高降低、叶片直径减小、干重减少,外施类黄酮物质rutin可一定程度抑制苦荞幼苗生长。 UV胁迫上调莽草酸—苯丙烷类代谢途径的关键酶PAL(苯丙氨酸解氨酶)和莽草酸途径的关键酶DAHPS(3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶)的活性,使莽草酸—苯丙烷类代谢途径加速而提高类黄酮等次生代谢产物含量。而PAL、DAHPS活性的上调又调整G6PDH活性,更利于莽草酸—苯丙烷类代谢途径的进行而促进类黄酮的形成,这可能是UV胁迫下植物体短期内类黄酮等次生代谢物大幅增加的重要原因。 2.UV胁迫下呼吸、碳氮代谢、激素代谢的调整与类黄酮代谢的关系 呼吸抑制剂实验证明,UV胁迫下PPP途径增强,UV胁迫通过上调PPP途径的关键酶G6PDH(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)的活性而提高PPP途径的比重,PPP途径产生的赤藓糖-4-磷酸(E4P)经关键酶DAHPS转化成莽草酸,而进入莽草酸途径,利于类黄酮等次生代谢物的合成。苦荞体内碳代谢的其它相关酶(如转化酶、SS、SPS)、氮代谢相关酶(如NR、GS、GOGAT)等也作出了适应这种代谢变化的调整。TCA途径中的关键酶NADH-苹果酸脱氢酶(NADH-MDH)活性在紫外胁迫下也有所提高,但提高幅度小于G6PDH。 UV胁迫下,伴随着类黄酮含量的提高,苦荞体内促进生长的IAA下降,IAA的降低与IAA氧化酶活性的提高有关。UV胁迫下苦荞体内早期ABA的水平明显上升,脂氧合
【关键词】:类黄酮 次生代谢 紫外胁迫 活性氧 苦荞
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S517
【目录】:
  • 中文摘要11-14
  • 英文摘要14-17
  • 1 前言17-36
  • 1.1 植物的次生代谢产物与类黄酮化合物17-20
  • 1.2 不同因素对植物类黄酮次生代谢的调控20-25
  • 1.3 植物类黄酮代谢的功能及在逆境适应中的作用25-27
  • 1.4 类黄酮的抗氧化作用及其机制27-29
  • 1.5 荞麦类黄酮研究概况29-33
  • 1.6 研究的目的与意义33-36
  • 2 材料与方法36-42
  • 2.1 实验材料与处理36
  • 2.1.1 材料来源与培养36
  • 2.1.2 UV 胁迫处理36
  • 2.1.3 草甘膦处理36
  • 2.1.4 外源类黄酮处理36
  • 2.2 类黄酮的测定36
  • 2.2.1 总黄酮含量的测定36
  • 2.2.2 槲皮素、葛根素、芸香苷等类黄酮成分测定36
  • 2.3 酶活性的测定36-39
  • 2.3.1 SOD、CAT、APX、GR 活性的测定36-37
  • 2.3.2 脂氧合酶活性的测定37
  • 2.3.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定37
  • 2.3.4 3-脱氧-2-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶( DAHPS)活力的测定37-38
  • 2.3.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性活力的测定38
  • 2.3.6 硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶活力的测定38
  • 2.3.7 蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶、转化酶活力的测定38-39
  • 2.3.8 IAA 氧化酶活性的测定39
  • 2.4 活性氧、丙二醛(MDA)与相对电导率(REC)的测定39
  • 2.5 还原糖、游离氨基酸、芳香族氨基酸、肉桂酸含量的测定39-40
  • 2.6 叶绿素、类胡萝卜素、抗坏血酸(AsA)、谷胱甘肽(GSH)的定量测定40
  • 2.7 呼吸速率和呼吸途径的测定40
  • 2.8 光合速率(Pn)、表观量子效率(AQY)、羧化效率(CE)的测定40-41
  • 2.9 叶黄素循环组分的测定41
  • 2.10 叶绿素荧光参数的测定41
  • 2.11 内源激素 IAA 和 ABA 含量的测定41-42
  • 3 结果与分析42-98
  • 3.1 苦荞类黄酮次生代谢对UV 胁迫的响应42-51
  • 3.1.1 苦荞幼苗几种类黄酮成分的HPLC 分析42-45
  • 3.1.2 UV 胁迫对苦荞类黄酮含量和幼苗生长的影响45-47
  • 3.1.3 UV 胁迫对苯丙烷代谢的影响47-49
  • 3.1.4 UV 胁迫下莽草酸途径中的 DAHPS 的变化49-50
  • 3.1.5 UV 胁迫下 PAL 和 DAHPS 活性变化的比较50-51
  • 3.2 UV 胁迫下呼吸、碳氮代谢和激素代谢的调整与类黄酮代谢的关系51-68
  • 3.2.1 UV 胁迫下呼吸速率、呼吸途径的调整与类黄酮代谢的关系51-55
  • 3.2.2 UV 胁迫下糖代谢的变化动态55-58
  • 3.2.3 UV 胁迫下氮代谢的变化动态58-61
  • 3.2.4 UV 胁迫下 IAA 和 ABA 的变化与类黄酮代谢的关系61-68
  • 3.3 草甘膦伤害及芳香族氨基酸与类黄酮代谢的关系68-78
  • 3.3.1 苦荞幼苗芳香族氨基酸的HPLC 分析69-70
  • 3.3.2 草甘膦对类黄酮代谢的抑制70-71
  • 3.3.3 草甘膦对游离Phe、Tyr、Trp 的影响71
  • 3.3.4 草甘膦对游离氨基酸的影响71-72
  • 3.3.5 草甘膦作用下PAL 活性的变化72-73
  • 3.3.6 芳香氨基酸和类黄酮与草甘膦伤害的相关性73-75
  • 3.3.7 外源芳香氨基酸和类黄酮对草甘膦伤害的影响75-78
  • 3.4 类黄酮在UV 胁迫引起的氧化胁迫中的作用机制78-91
  • 3.4.1 UV 胁迫下膜脂过氧化与类黄酮的关系78-79
  • 3.4.2 UV 胁迫对脂氧合酶(LOX)影响及与类黄酮的关系79-81
  • 3.4.3 UV 胁迫伤害与活性氧的关系81-83
  • 3.4.4 UV 胁迫与抗氧化酶的关系83-87
  • 3.4.5 UV 胁迫下 AsA 和 GSH 的变化及与类黄酮的关系87-89
  • 3.4.6 引入甲基紫精(MV)评估类黄酮在UV 胁迫中的抗氧化作用89-90
  • 3.4.7 UV 胁迫下体内 O_2~-、H_2O_2与类黄酮代谢的关系分析90-91
  • 3.5 类黄酮代谢对UV 胁迫下光合机构的保护91-98
  • 3.5.1 UV 胁迫下光合色素的变化及与类黄酮关系91-92
  • 3.5.2 UV 胁迫和草甘膦处理对光合速率的影响92-93
  • 3.5.3 UV 胁迫和草甘膦处理对表观量子效率的影响93
  • 3.5.4 外源类黄酮对UV 胁迫下羧化效率的影响93-94
  • 3.5.5 类黄酮对UV 胁迫下类胡萝卜素及叶黄素循环的影响94-96
  • 3.5.6 类黄酮对UV 胁迫下荧光特性的影响96-98
  • 4 讨论98-111
  • 4.1 UV 胁迫下苦荞类黄酮代谢的调整98-99
  • 4.2 UV 胁迫下呼吸、碳氮代谢的调整与类黄酮代谢的关系99-101
  • 4.3 UV 胁迫下 IAA、ABA 的变化及与类黄酮的关系101-102
  • 4.4 草甘膦伤害与次生代谢和类黄酮的相关性102-103
  • 4.5 UV 胁迫下类黄酮的抗氧化作用103-106
  • 4.6 UV 胁迫对光合机构的伤害及类黄酮的保护作用106-111
  • 5 结论111-113
  • 参考文献113-133
  • 致谢133-134
  • 攻读学位期间发表论文情况134

【引证文献】
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中国期刊全文数据库 前10条
1 朱秋云;丛斌;;玉米的抗虫性状与次生代谢物的关系[J];安徽农业科学;2006年10期
2 田恬;;药用植物毛状根次生代谢物积累的影响因素[J];现代农业科学;2009年01期
3 朱遐;;利用超声波从植物细胞回收产物[J];生物技术通报;1991年08期
4 李品;岳彩鹏;王新建;段娜娜;;植物细胞培养生产次生代谢物的影响因素[J];河南林业科技;2007年01期
5 曹翠玲;赵晋铭;赵晓军;林忠敏;赵子俊;路炳声;;康氏木霉代谢物对植物病原真菌的抗菌活性测定[J];陕西农业科学;2006年02期
6 季志平;苏印泉;;栽培方式对杜仲皮次生代谢物含量的影响[J];西北植物学报;2006年09期
7 陆锦池;陈荣山;刘长辉;叶陈英;王海斌;何海斌;;浅述植物萜类物质的生物合成途径[J];农业科技通讯;2009年03期
8 ;农业其它[J];生物技术通报;1993年08期
9 李家玉;王海斌;林志华;陈荣山;何海斌;;植物次生代谢物的结构、生物合成及其功能分析——生物碱[J];农业科学研究;2009年04期
10 张康健;;中华瑰宝杜仲的药用价值[J];长寿;2011年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 康九红;林昌俊;;活性氧、组蛋白乙酰化与重金属的毒作用[A];第六届全国自由基生物学与自由基医学学术会议和海峡两岸自由基生物学与自由基医学学术会议论文集[C];2004年
2 霍艳英;段瑞峰;苟巧;胡迎春;李刚;吴德昌;周平坤;;抑癌基因PTEN对细胞内氧化损伤防御体系的影响及机制[A];中国毒理学会第二届全国中青年学者科技论坛会议论文集[C];2007年
3 魏言春;刑达;杨利勇;赵洪友;;化学发光法检测活性氧实现光动力肿瘤治疗的剂量监测[A];中国遗传学会第十届全国激光生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
4 汪莲开;;阿魏酸钠对AngⅡ诱导内皮细胞凋亡的抑制作用[A];第八次全国中医药传承创新与发展学术研讨会论文集[C];2009年
5 胡思;陈睿智;周丹;刘长林;;SOD模型化合物对水稻苗组织中活性氧水平的调控[A];第六届全国化学生物学学术会议论文摘要集[C];2009年
6 王海涛;杨祥良;徐辉碧;;化学发光法检测线粒体衍生的活性氧[A];第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年
7 刘珊林;;Racl转染7721人肝癌细胞与活性氧的关系[A];第五届全国自由基生物学与自由基医学学术讨论会论文摘要汇编[C];2000年
8 聂春来;郑艳华;陈佺;;活性氧在Bax活化和细胞凋亡中的作用[A];第十次中国生物物理学术大会论文摘要集[C];2006年
9 张学江;黄军艳;王政;李丹;尹思佳;刘越英;刘胜毅;;活性氧积累与细胞死亡在油菜与菌核病互作中的重要作用[A];中国植物病理学会2009年学术年会论文集[C];2009年
10 李鑫;马晓春;;血必净注射液对肾脏微血管内皮细胞发挥保护作用的机制探讨[A];中国重症医学的创新与发展——第二届中国医师协会重症医学医师分会暨第九届中国病理生理学会危重病医学专业委员会2010年危重病医学全国会议会刊[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 金来;活性氧:长寿克星[N];大众卫生报;2005年
2 支勇平;杜仲次生代谢物开发利用研究取得突破[N];陕西日报;2003年
3 支勇平;杜仲次生代谢物有望实现深度开发利用[N];中国绿色时报;2003年
4 记者杨德有;杜仲次生代谢物深度开发利用研究通过鉴定[N];中国中医药报;2003年
5 钱铮;氢可清除对机体有害的活性氧[N];医药经济报;2007年
6 陈旻;过多的活性氧危害男性生殖健康[N];中国医药报;2000年
7 ;吸烟是怎样致癌的[N];农村医药报(汉);2008年
8 赵引德;活性氧消毒剂无安全环保隐患[N];中国化工报;2008年
9 吴一福;Uu感染可引起生殖细胞凋亡[N];中国医药报;2005年
10 健康时报实习记者 杨绪军;烟民多吃黄绿蔬菜[N];健康时报;2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 董新纯;UV胁迫下苦荞类黄酮代谢及其防御机制研究[D];山东农业大学;2006年
2 张文江;药物代谢研究[D];中国协和医科大学;1997年
3 李芸;超氧阴离子自由基促大鼠肝卵圆细胞株WB-F344恶性转化及其机理的研究[D];中国协和医科大学;2000年
4 李建明;线粒体在活性氧诱导肠上皮细胞凋亡中的作用[D];第三军医大学;2002年
5 秦绪军;线粒体微环境中ROS对细胞永生化与逆转的调控研究[D];第四军医大学;2005年
6 韦思明;大鼠睾丸扭转复位后生精功能的改变及其发生机制的研究[D];浙江大学;2005年
7 张晓丽;雨生红球藻抗氧化作用及藻粉质量安全性研究[D];中国科学院研究生院(海洋研究所);2006年
8 李卫萍;活性氧与高血压内皮功能失调关系的研究及阿托伐他汀的影响[D];中南大学;2003年
9 郝福顺;植物质膜NADPH氧化酶参与ABA和镍离子诱导的活性氧积累[D];中国农业大学;2005年
10 施广璞;过氧化氢促大鼠肝卵圆细胞株WB-F344增殖、转化及其机理的研究[D];中国协和医科大学;2001年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 崔彦;减压条件对大久保桃和梨枣生理生化指标变化的影响[D];山西农业大学;2005年
2 邵好好;梨树花芽休眠解除与活性氧代谢关系的研究[D];西北农林科技大学;2003年
3 许博;活性氧在海带抗褐藻酸降解菌感染中的作用[D];中国海洋大学;2003年
4 景红娟;非洲菊切花保鲜和衰老机理的研究[D];华中师范大学;2004年
5 严文静;淡水白鲳尾鳍细胞系的建立及低温诱导细胞凋亡的研究[D];浙江大学;2004年
6 张锦广;NADPH氧化酶参与盐胁迫诱导的烟草悬浮细胞活性氧的产生[D];中国农业大学;2005年
7 刘亚平;减压条件下枣果乙醇积累及活性氧代谢的研究[D];山西农业大学;2004年
8 李承罡;核因子κB在2-甲氧雌二醇诱导骨尤文氏肉瘤细胞凋亡中的作用研究[D];山西医科大学;2005年
9 屈顺林;NOX4在人血管细胞中的表达及其在内皮细胞凋亡中的作用[D];南华大学;2005年
10 向志军;复方丹参对氧化损伤的血管内皮细胞的保护机理[D];天津大学;2005年
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