UV胁迫下苦荞类黄酮代谢及其防御机制研究
【摘要】:
类黄酮(flavonoids)是植物体内主要的次生代谢物类型之一。紫外(UV)胁迫通常导致植物体内类黄酮代谢上调,类黄酮在植物体内可起紫外“吸收屏障(UV-filter)”的作用。本文以苦荞(Fagopyrum tataricum L.)新品种9279-21为材料,研究了苦荞类黄酮代谢在UV胁迫适应中的一些作用机制。
1.苦荞类黄酮次生代谢对UV胁迫的响应
利用HPLC法对苦荞类黄酮成分进行了分析,苦荞幼苗至少含有葛根素(puerarin)、柚皮苷(naringenin)、槲皮苷(quercetin)、芸香苷(rutin)、木犀草素(luteolin)、山奈酚(kaempferol)等类黄酮成分,其中含量最大的三种类黄酮成分依次为槲皮苷、芸香苷(芦丁)、柚皮苷。UV胁迫处理使苦荞类黄酮含量明显提高,幼苗株高降低、叶片直径减小、干重减少,外施类黄酮物质rutin可一定程度抑制苦荞幼苗生长。
UV胁迫上调莽草酸—苯丙烷类代谢途径的关键酶PAL(苯丙氨酸解氨酶)和莽草酸途径的关键酶DAHPS(3-脱氧-α-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶)的活性,使莽草酸—苯丙烷类代谢途径加速而提高类黄酮等次生代谢产物含量。而PAL、DAHPS活性的上调又调整G6PDH活性,更利于莽草酸—苯丙烷类代谢途径的进行而促进类黄酮的形成,这可能是UV胁迫下植物体短期内类黄酮等次生代谢物大幅增加的重要原因。
2.UV胁迫下呼吸、碳氮代谢、激素代谢的调整与类黄酮代谢的关系
呼吸抑制剂实验证明,UV胁迫下PPP途径增强,UV胁迫通过上调PPP途径的关键酶G6PDH(葡萄糖-6-磷酸脱氢酶)的活性而提高PPP途径的比重,PPP途径产生的赤藓糖-4-磷酸(E4P)经关键酶DAHPS转化成莽草酸,而进入莽草酸途径,利于类黄酮等次生代谢物的合成。苦荞体内碳代谢的其它相关酶(如转化酶、SS、SPS)、氮代谢相关酶(如NR、GS、GOGAT)等也作出了适应这种代谢变化的调整。TCA途径中的关键酶NADH-苹果酸脱氢酶(NADH-MDH)活性在紫外胁迫下也有所提高,但提高幅度小于G6PDH。
UV胁迫下,伴随着类黄酮含量的提高,苦荞体内促进生长的IAA下降,IAA的降低与IAA氧化酶活性的提高有关。UV胁迫下苦荞体内早期ABA的水平明显上升,脂氧合
【关键词】:类黄酮 次生代谢 紫外胁迫 活性氧 苦荞 【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2006
【分类号】:S517
【目录】:
- 中文摘要11-14
- 英文摘要14-17
- 1 前言17-36
- 1.1 植物的次生代谢产物与类黄酮化合物17-20
- 1.2 不同因素对植物类黄酮次生代谢的调控20-25
- 1.3 植物类黄酮代谢的功能及在逆境适应中的作用25-27
- 1.4 类黄酮的抗氧化作用及其机制27-29
- 1.5 荞麦类黄酮研究概况29-33
- 1.6 研究的目的与意义33-36
- 2 材料与方法36-42
- 2.1 实验材料与处理36
- 2.1.1 材料来源与培养36
- 2.1.2 UV 胁迫处理36
- 2.1.3 草甘膦处理36
- 2.1.4 外源类黄酮处理36
- 2.2 类黄酮的测定36
- 2.2.1 总黄酮含量的测定36
- 2.2.2 槲皮素、葛根素、芸香苷等类黄酮成分测定36
- 2.3 酶活性的测定36-39
- 2.3.1 SOD、CAT、APX、GR 活性的测定36-37
- 2.3.2 脂氧合酶活性的测定37
- 2.3.3 苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的测定37
- 2.3.4 3-脱氧-2-阿拉伯庚酮糖-7-磷酸合成酶( DAHPS)活力的测定37-38
- 2.3.5 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶活性活力的测定38
- 2.3.6 硝酸还原酶、谷氨酰胺合成酶、谷氨酸合成酶活力的测定38
- 2.3.7 蔗糖合成酶、蔗糖磷酸合成酶、转化酶活力的测定38-39
- 2.3.8 IAA 氧化酶活性的测定39
- 2.4 活性氧、丙二醛(MDA)与相对电导率(REC)的测定39
- 2.5 还原糖、游离氨基酸、芳香族氨基酸、肉桂酸含量的测定39-40
- 2.6 叶绿素、类胡萝卜素、抗坏血酸(AsA)、谷胱甘肽(GSH)的定量测定40
- 2.7 呼吸速率和呼吸途径的测定40
- 2.8 光合速率(Pn)、表观量子效率(AQY)、羧化效率(CE)的测定40-41
- 2.9 叶黄素循环组分的测定41
- 2.10 叶绿素荧光参数的测定41
- 2.11 内源激素 IAA 和 ABA 含量的测定41-42
- 3 结果与分析42-98
- 3.1 苦荞类黄酮次生代谢对UV 胁迫的响应42-51
- 3.1.1 苦荞幼苗几种类黄酮成分的HPLC 分析42-45
- 3.1.2 UV 胁迫对苦荞类黄酮含量和幼苗生长的影响45-47
- 3.1.3 UV 胁迫对苯丙烷代谢的影响47-49
- 3.1.4 UV 胁迫下莽草酸途径中的 DAHPS 的变化49-50
- 3.1.5 UV 胁迫下 PAL 和 DAHPS 活性变化的比较50-51
- 3.2 UV 胁迫下呼吸、碳氮代谢和激素代谢的调整与类黄酮代谢的关系51-68
- 3.2.1 UV 胁迫下呼吸速率、呼吸途径的调整与类黄酮代谢的关系51-55
- 3.2.2 UV 胁迫下糖代谢的变化动态55-58
- 3.2.3 UV 胁迫下氮代谢的变化动态58-61
- 3.2.4 UV 胁迫下 IAA 和 ABA 的变化与类黄酮代谢的关系61-68
- 3.3 草甘膦伤害及芳香族氨基酸与类黄酮代谢的关系68-78
- 3.3.1 苦荞幼苗芳香族氨基酸的HPLC 分析69-70
- 3.3.2 草甘膦对类黄酮代谢的抑制70-71
- 3.3.3 草甘膦对游离Phe、Tyr、Trp 的影响71
- 3.3.4 草甘膦对游离氨基酸的影响71-72
- 3.3.5 草甘膦作用下PAL 活性的变化72-73
- 3.3.6 芳香氨基酸和类黄酮与草甘膦伤害的相关性73-75
- 3.3.7 外源芳香氨基酸和类黄酮对草甘膦伤害的影响75-78
- 3.4 类黄酮在UV 胁迫引起的氧化胁迫中的作用机制78-91
- 3.4.1 UV 胁迫下膜脂过氧化与类黄酮的关系78-79
- 3.4.2 UV 胁迫对脂氧合酶(LOX)影响及与类黄酮的关系79-81
- 3.4.3 UV 胁迫伤害与活性氧的关系81-83
- 3.4.4 UV 胁迫与抗氧化酶的关系83-87
- 3.4.5 UV 胁迫下 AsA 和 GSH 的变化及与类黄酮的关系87-89
- 3.4.6 引入甲基紫精(MV)评估类黄酮在UV 胁迫中的抗氧化作用89-90
- 3.4.7 UV 胁迫下体内 O_2~-、H_2O_2与类黄酮代谢的关系分析90-91
- 3.5 类黄酮代谢对UV 胁迫下光合机构的保护91-98
- 3.5.1 UV 胁迫下光合色素的变化及与类黄酮关系91-92
- 3.5.2 UV 胁迫和草甘膦处理对光合速率的影响92-93
- 3.5.3 UV 胁迫和草甘膦处理对表观量子效率的影响93
- 3.5.4 外源类黄酮对UV 胁迫下羧化效率的影响93-94
- 3.5.5 类黄酮对UV 胁迫下类胡萝卜素及叶黄素循环的影响94-96
- 3.5.6 类黄酮对UV 胁迫下荧光特性的影响96-98
- 4 讨论98-111
- 4.1 UV 胁迫下苦荞类黄酮代谢的调整98-99
- 4.2 UV 胁迫下呼吸、碳氮代谢的调整与类黄酮代谢的关系99-101
- 4.3 UV 胁迫下 IAA、ABA 的变化及与类黄酮的关系101-102
- 4.4 草甘膦伤害与次生代谢和类黄酮的相关性102-103
- 4.5 UV 胁迫下类黄酮的抗氧化作用103-106
- 4.6 UV 胁迫对光合机构的伤害及类黄酮的保护作用106-111
- 5 结论111-113
- 参考文献113-133
- 致谢133-134
- 攻读学位期间发表论文情况134
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| 1 |
江昌俊,余有本;苯丙氨酸解氨酶的研究进展(综述)[J];安徽农业大学学报;2001年04期 |
| 2 |
廖靖军,安成才,吴思,陈章良;查尔酮合酶基因在植物防御反应中的调控作用[J];北京大学学报(自然科学版);2000年04期 |
| 3 |
浦心春,韩建国,李敏,杜光璞,倪小琴;结缕草种子打破休眠过程呼吸途径的研究[J];草业学报;1996年03期 |
| 4 |
李春斌,王关林,岳玉莲,姜波,方宏筠;培养条件对银杏悬浮培养细胞黄酮合成影响研究[J];大连理工大学学报;2003年03期 |
| 5 |
周党卫,韩发,滕中华,朱文琰,师生波;UV-B辐射增强对植物光合作用的影响及植物的相关适应性研究[J];西北植物学报;2002年04期 |
| 6 |
黄雅芬,余龙江,兰文智,杨希;脂氧合酶在诱导红豆杉细胞产紫杉醇中的作用[J];西北植物学报;2004年10期 |
| 7 |
李琰,董娟娥,姜在民,唐锐;杜仲愈伤组织中次生代谢产物积累动态研究[J];西北植物学报;2004年11期 |
| 8 |
赵丽英,邓西平,山仑;活性氧清除系统对干旱胁迫的响应机制[J];西北植物学报;2005年02期 |
| 9 |
张树源,武海,吴姝,沈允钢,郭连旺;青海高原及上海平原地区植物叶片光合作用的光抑制[J];西北植物学报;1999年01期 |
| 10 |
陈拓,王勋陵;UV-B辐射对小麦叶片H_2O_2代谢的影响[J];西北植物学报;1999年02期 |
|
|
|
|
|
| 1 |
曹帮华,蔡春菊;银杏种子生理研究进展[J];山东农业科学;2001年01期 |
| 2 |
左美林,朱武军,高仰哲;粘红酵母产L-苯丙氨酸解氨酶发酵培养基的优化[J];氨基酸和生物资源;2000年01期 |
| 3 |
江昌俊,余有本;苯丙氨酸解氨酶的研究进展(综述)[J];安徽农业大学学报;2001年04期 |
| 4 |
冷平生,王天华,吴京科,李义,王沙生,毕望富,蒋湘宁;银杏萜类内酯的提取和气相色谱与质谱分析[J];北京林业大学学报;2000年05期 |
| 5 |
郭维明,盛爱武;梅花采后衰老的内源激素调节[J];北京林业大学学报;1999年02期 |
| 6 |
刘鸿年;刘发敏;;茶鲜叶苯丙氨酸解氨酶的提取及其活性测定[J];中国茶叶;1989年01期 |
| 7 |
浦心春,韩建国,李敏;结缕草种子脱落酸含量及打破休眠的研究[J];草地学报;1994年01期 |
| 8 |
许宁,陈雪芬,陈华才,陈宗懋;茶树品种抗茶橙瘿螨的形态与生化特征[J];茶叶科学;1996年02期 |
| 9 |
高旭晖;论茶树抗病性的生化基础[J];茶叶通讯;1998年01期 |
| 10 |
孙君明,丁安林;地理环境对大豆种子中异黄酮积累的影响趋势[J];大豆科学;1997年04期 |
|