收藏本站
《山东农业大学》 2007年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

Pseudomonas mosselii E1和P.pseudoalcaligenes B50铁载体合成相关基因的克隆及功能初步分析

黄伟红  
【摘要】: 从棉花根际筛选到铁载体产生细菌B50和E1。通过形态观察、生理生化鉴定,B50和E1都是革兰氏阴性无芽孢杆菌,属于假单胞菌属,16S rDNA测序结果表明, B50的16S rDNA序列与Pseudomonas pseudoalcaligenes的同源性为100%,E1的16S rDNA序列与Pseudomonas mosselii的同源性为100%。用抗生素平板法对P. pseudoalcaligenes B50和P. mosselii E1进行药敏试验,B50和E1都对卡那霉素敏感,能够耐受10μg/mL以上的氯霉素。 利用转座子Tn5-1063a分别对E1和B50进行转座子插入诱变,筛选出2株E1铁载体合成缺失突变株:E1-185和E1-332;5株B50铁载体合成缺失突变株:B50-472、B50-982、B50-1358、B50-1657和B50-1723。根据转座子Tn5-1063a当中的luxA序列设计引物,分别以E1和B50总DNA、pRL1063a质粒DNA和突变株总DNA进行PCR扩增,测序,与已知的luxA序列进行比对,铁载体合成缺失突变株的luxA序列均与已知的luxA序列同源性为100%,由此证实转座子确实插入到E1和B50的基因组中。 根据转座子Tn5-1063a两端的序列分别设计3个嵌套引物,同时设计了7个随机引物,用TAIL-PCR(Thermal asymmetric inter laced PCR)方法,从突变株E1-185中克隆到铁载体合成相关基因cysI。cysI与半胱氨酸合成有关,在非核糖体肽类型的铁载体合成过程中,参与酰基硫载体蛋白(acyl-S-PCPs)的合成,是铁载体合成过程中的关键步骤,并进行了验证试验。 从突变株B50-1657中克隆到铁载体合成相关基因pyrD。pyrD编码二氢乳清酸脱氢酶,催化S-二氢乳清酸到乳清酸的转化,是嘧啶合成的第四步。通过试验证实,pyrD与铁载体的合成有关。 此外,还从突变株B50-1358中克隆到铁载体合成相关基因relA的部分序列。relA编码严谨控制因子RelA/SpoT,调控(p)ppGpp的合成和水解。严谨控制是细菌在营养贫瘠的环境下生长时产生的一种应激反应,培养基中有效铁含量的不足引起细菌的严谨控制反应,诱发铁载体的产生。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:Q78

免费申请
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 罗丽娟,施季森;一种DNA侧翼序列分离技术——TAIL-PCR[J];南京林业大学学报(自然科学版);2003年04期
2 应革,武威,何朝族;TAIL-PCR方法快速分离Xcc致病相关基因序列[J];生物工程学报;2002年02期
3 金崇伟,俞雪辉,郑绍建;微生物在植物铁营养中的潜在作用[J];植物营养与肥料学报;2005年05期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 陈绍兴;假单胞菌SPF-1产铁载体条件及其铁载体性质研究[D];武汉大学;2005年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 胡尚勤,唐安科;维生素和矿物质对整肠生菌芽孢形成的影响[J];重庆师范学院学报(自然科学版);2001年02期
2 胡尚勤;整肠生菌发酵中杆菌肽高产的代谢调控[J];重庆师范大学学报(自然科学版);2004年04期
3 黄明深;胡尚勤;;利用细胞融合技术获得高产乳酸菌的研究[J];重庆师范大学学报(自然科学版);2006年03期
4 吴静,李春俭,王贺,张福锁,江荣风;缺硼对大豆根瘤结构和功能的影响[J];西北植物学报;1999年03期
5 赵昶灵;郭维明;杨清;陈俊愉;;梅花南京红须F3′H全长基于gDNA的TAIL-PCR法克隆(英文)[J];西北植物学报;2005年12期
6 吴锦华;变压器油中胶体对油介质损耗因数影响的机理[J];高电压技术;1995年03期
7 李绣辉,张文平;溶菌酶对酵母型真菌抗菌作用的实验观察[J];赣南医学院学报;2000年02期
8 黄真;张文平;王小丽;李绣辉;;溶菌酶对皮肤癣菌抑菌作用的观察[J];赣南医学院学报;2006年04期
9 胡尚勤;杆菌肽高产的代谢调控[J];国外医药.抗生素分册;2004年04期
10 胡尚勤;整肠生菌细胞融合子的发酵及产物分析研究[J];工业微生物;2005年01期
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 陈孙孝;白念珠菌钙调蛋白基因(CMD1)缺陷菌株的构建及CMD1功能性基因的初步研究[D];第二军医大学;2001年
2 何苗;杂环化合物和多环芳烃生物降解性能的研究[D];清华大学;1995年
3 张小里;酵母系统超量生产代谢中间物和外源基因产物的应用基础研究[D];浙江大学;2002年
4 赵青余;微生物脱毒蓖麻饼及对绵羊机体影响的研究[D];中国农业科学院;2003年
5 李爱英;变铅青链霉菌DNA异常修饰系统的分子生物学研究[D];华中农业大学;2000年
6 李峰;格瑞菲斯瓦尔德磁螺菌(Magnetospirillum gryphiswaldense MSR-1)磁小体合成相关基因的克隆及其功能分析[D];中国农业大学;2004年
7 谭周进;烟粉虱(Bemisia tabaci)内共生菌分子变异、传毒相关groEL基因的克隆及原核表达研究[D];湖南农业大学;2004年
8 卫华;变形链球菌耐酸性相关基因的研究[D];武汉大学;2004年
9 赵昶灵;几个梅花品种花色的时空变化、花色苷的分子结构和F3'H克隆的研究[D];南京农业大学;2005年
10 王海燕;TcLr35小麦抗病相关基因的克隆及分析[D];河北农业大学;2006年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 廖奇亨;稻瘟菌产孢相关突变体的筛选及T-DNA侧翼序列分析[D];华南热带农业大学;2005年
2 杨玲;葡萄土壤杆菌E26菌株细菌素产生相关基因的初步研究[D];中国农业大学;2005年
3 何健;高盐难降解工业废水微生物处理的污泥驯化研究与应用[D];南京农业大学;2000年
4 温崇庆;三种辐射源对枯草杆菌诱变效应与蛋白酶突变菌株筛选的研究[D];安徽农业大学;2001年
5 胡加付;白僵菌工业化生产与防治天牛技术的研究[D];安徽农业大学;2001年
6 郑爱萍;拮抗细菌对水稻纹枯病的生物防治研究[D];四川农业大学;2001年
7 陈宜涛;玫烟色拟青霉双相发酵工艺及分生孢子粉贮存生理研究[D];浙江大学;2002年
8 陆坚;运动发酵单胞菌乙醇脱氢酶和丙酮酸脱羧酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达[D];广西大学;2002年
9 赵美霞;内蒙古地区酸马奶酒中酵母菌的分离鉴定及抗菌特性的研究[D];内蒙古农业大学;2002年
10 王水顺;饲用复合酶高产菌株的选育及其酶学特性的研究[D];福建师范大学;2002年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 彭好文,黎起秦,林纬;生物防治研究及其应用概况[J];广西农业生物科学;2004年02期
2 陈旭升,陈永萱,黄骏麒;棉花黄萎病菌株VD8外泌毒蛋白的生化特性[J];江苏农业学报;1998年02期
3 孔庆科,丁爱云,刘招舰,张新健,殷复伟;根际细菌诱导的系统抗性[J];山东科学;2001年04期
4 闫孟红,蔡正求,韩继刚,孙磊,宋未;植物内生细菌在防治植物病害中的应用研究[J];生物技术通报;2004年03期
5 肖用森,王正直,郭绍川;白叶枯病菌对杂交稻幼苗叶片中活性氧清除剂的影响[J];作物学报;1998年01期
6 张世平;棉花枯黄萎病生物防治新途径[J];中国棉花;1996年07期
7 石磊岩;棉花黄萎病灾害因素分析[J];中国棉花;1999年07期
8 童蕴慧,郭桂萍,徐敬友,纪兆林,陈夕军;拮抗细菌对番茄植株抗灰霉病的诱导[J];中国生物防治;2004年03期
9 徐刘平;尹燕妮;李师默;郭坚华;;拮抗细菌对土传病原菌的作用机理[J];中国生物防治;2006年01期
10 吴蔼民,顾本康,傅正擎,胡华东;内生菌73a在不同抗性品种棉花体内的定殖和消长动态研究[J];植物病理学报;2001年04期
中国重要会议论文全文数据库 前1条
1 李国英;王佩玲;刘正;张丽萍;李明;;近年来新疆棉区病虫发生的特点及其原因分析[A];农业生物灾害预防与控制研究[C];2005年
中国硕士学位论文全文数据库 前2条
1 来玉宾;茶树内生细菌TL2分离鉴定及抗病机理的研究[D];福建农林大学;2006年
2 王娜;棉花黄萎病、枯萎病拮抗细菌的筛选及相关抗病基因的克隆[D];中国农业科学院;2007年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前3条
1 应革,武威,何朝族;TAIL-PCR方法快速分离Xcc致病相关基因序列[J];生物工程学报;2002年02期
2 杨琳,王金发;植物基因工程中的转座子标签[J];生物技术;2000年01期
3 方进,翟文学,王文明,李素文,朱立煌;转基因水稻T-DNA侧翼序列的扩增与分析[J];遗传学报;2001年04期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许煜泉,高虹,童耕雷,祝新德;假单胞菌株JKD—2分泌铁载体抑制稻瘟病菌[J];微生物学通报;1999年03期
2 马向东,陆承平,陈怀青,凌红丽;嗜水气单胞菌铁载体的提纯及特性分析[J];微生物学报;2000年01期
3 王颜萍,何鹰,郑晓玲,陈发荣,黎先春,王小如;分析技术在海洋浮游生物铁载体研究中的应用[J];海洋科学进展;2005年02期
4 谢小军;;铁载体——细菌营养竞争的有力武器[J];微生物学通报;2007年05期
5 方涛;李道季;余立华;;海洋微生物铁载体的研究[J];海洋科学;2007年10期
6 马悦,张元兴;海洋鳗弧菌铁载体合成的调控[J];华东理工大学学报;2002年03期
7 史书文,丛显斌,张景林;耶尔森氏菌属铁的摄取和转运[J];中国地方病学杂志;1999年01期
8 王蓬勃;马悦;刘琴;张元兴;;溶藻弧菌铁载体合成及外膜蛋白表达的研究[J];微生物学通报;2006年02期
9 陈绍兴;何明涛;谢志雄;;不同培养基对荧光假单胞菌产铁载体的影响[J];红河学院学报;2008年02期
10 陈绍兴;谢志雄;;铁离子对荧光假单胞菌生长及产铁载体的影响[J];江苏农业科学;2008年04期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈绍兴;谢志雄;沈萍;;假单胞菌铁载体性质初步研究[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
2 席琳乔;周斌;刘婷;;铁载体合成细菌动态变化与初步鉴定研究[A];2009中国草原发展论坛论文集[C];2009年
3 赵翔;谢志雄;沈萍;;高产铁载体菌的筛选及鉴定[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
4 陈绍兴;赵翔;谢志雄;沈萍;;一株高产铁载体假单胞菌的分离鉴定和生理特性的研究[A];湖北省遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2004年
5 赵翔;;一株高产铁载体菌的筛选鉴定及其产铁载体性质研究[A];湖北省生物工程学会2004年年会学术报告及论文摘要汇编[C];2004年
6 王天龙;汪来发;朴春根;朱天辉;张晓美;;细菌根部定殖研究进展[A];中国植物病理学会2006年学术年会论文集[C];2006年
7 谢建平;何颖;胡昌华;乐军;王洪海;;快生型分枝杆菌分泌性铁载体exochelin表达的遗传调控[A];中国的遗传学研究——中国遗传学会第七次代表大会暨学术讨论会论文摘要汇编[C];2003年
8 赵翔;谢志雄;;一株高产铁载体菌的筛选鉴定及其产铁载体性质研究[A];湖北省遗传学会、江西省遗传学会2006年学术年会暨学术讨论会论文摘要集[C];2006年
9 李俊峰;池振明;;铁载体高产菌株的选育及其培养条件的优化[A];山东微生物学会第六次会员代表大会暨2004年学术年会论文集(上)[C];2004年
10 渠慎春;章镇;;抗缺铁果树砧木品种的培育[A];中国生物工程学会第四次会员代表大会暨学术讨论会论文摘要集[C];2005年
中国重要报纸全文数据库 前3条
1 胡丽娟 本报记者 王翰林;铁酱油:战胜“隐性饥饿”的革命[N];科技日报;2006年
2 王定武;熔融还原炼铁技术的新进展[N];世界金属导报;2004年
3 罗文浩;厨具再掀时尚健康潮[N];中国电子报;2005年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 孙红启;铁载体和铁离子对细菌生长过程的影响[D];山东大学;2008年
2 李俊峰;有益菌A18菌株铁载体的研究和铁吸收调节蛋白(Fur)基因的克隆和表达[D];中国海洋大学;2005年
3 卫阳;铜绿假单胞菌铁反应基因调控的研究[D];西北大学;2009年
4 胡静;EAggEC携带的耶尔森菌HPI毒力的功能研究[D];第一军医大学;2002年
5 高鹤;调控子Fur直接调控鼠疫耶尔森氏菌铁代谢功能的研究[D];东北师范大学;2008年
6 李宁;致病微生物铁代谢相关蛋白ViuP、FepB的结构与功能研究[D];山东大学;2012年
7 邢伟;铁对水华蓝藻的生态生理学效应研究[D];中国科学院研究生院(水生生物研究所);2007年
8 朱冬青;A因子依赖蛋白AdpA对链霉菌形态分化和次生代谢的调节[D];上海交通大学;2008年
9 张建;小麦高效PGPR菌的筛选鉴定及多色FISH检测促生菌在根部的定殖[D];安徽农业大学;2012年
10 龚明福;新疆苦豆子内生细菌多样性及其抗菌作用研究[D];西北农林科技大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 黄伟红;Pseudomonas mosselii E1和P.pseudoalcaligenes B50铁载体合成相关基因的克隆及功能初步分析[D];山东农业大学;2007年
2 于素芳;恶臭假单胞菌D15和E19铁载体合成相关基因的克隆及功能初步分析[D];山东农业大学;2008年
3 何苗;铁载体细菌对桃树缺铁黄化病的生物防治初步研究[D];四川农业大学;2011年
4 张垠;酸模根际产铁载体矿物分解细菌的分离筛选及其与矿物相互作用[D];南京农业大学;2011年
5 马再超;产铁载体海洋普鲁兰类酵母(Aureobasidium pullulans)HN6.2菌株遗传改良的研究[D];中国海洋大学;2012年
6 路晓萌;Pseudomonas mediterranea G-229-21T铁载体相关基因purL的克隆及功能分析[D];山东农业大学;2010年
7 蒙渊;产铁载体和ACC脱氨酶的氢氧化细菌筛选及促生作用研究[D];西北大学;2011年
8 贺君丽;Mycobacterium tuberculosis铁载体合成相关基因Rv1345(fadD33)的过表达对宿主菌生理功能的影响研究[D];西南大学;2011年
9 张从刚;铁载体合成蛋白VibB的结构和功能以及VibB、VibD的相互作用分析[D];山东大学;2010年
10 韩凯;新型三脚架结构铁载体的合成与性能研究[D];曲阜师范大学;2005年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026