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《山东农业大学》 2007年
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鸡繁殖性状相关基因及卵巢组织差异表达基因研究

张宁波  
【摘要】: 家禽的繁殖性状,包括开产日龄、产蛋数、蛋重等是现代家禽生产中重要的经济性状。研究家禽繁殖性状相关的基因对于揭示影响家禽产蛋性能的的遗传机制和优质高产蛋鸡的选育有重要的意义。候选基因法是一种定位数量性状基因的主要方法,这种方法是依据生物体内已知的或可能的生理生化过程来选择相关基因并对其与表型的关系进行探讨。利用候选基因鉴定法定位主效基因在畜禽中已有许多成功的范例,如鸡性连锁矮小基因,猪应激综合症基因等。差异显示RT-PCR是研究基因差异表达的重要方法。本研究通过候选基因法分析了繁殖性状相关基因FSHR、BMPR-ⅠB多态性与鲁禽鸡群产蛋性能的关系,分析了FSHR、BMPR-ⅠB和IGFBP-4 mRNA在济宁百日鸡和罗曼褐卵巢和卵泡中的发育性变化;采用差异显示RT-PCR技术筛选并克隆了卵巢组织差异表达的几个基因。 试验一:克隆了济宁百日鸡、文昌鸡、仙居鸡、海蓝褐、藏鸡FSHR 5’调控区约1.8 kb的序列,GenBank登录号DQ303232~ DQ3032327,检出核苷酸变异48处。其中39处单核苷酸置换,1处三核苷酸置换和8处插入/删除突变。-1046变异包含了A、G、T三个核苷酸,其余24个为转换突变,14个属于颠换突变。在-868位点存在一段200bp的插入序列,突变率极低,仅0.0698(鲁禽群体)。对鲁禽群体, PCR检测了-868位点的多态性分布;变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测了-71“TG”插入/删除突变;通过PCR-RFLP方法检测了-237T→A的突变。关联分析的结果表明,上述三个位点的多态性对鲁禽肉鸡33周(E33)和42周(E42)的产蛋数效应不显著。通过三位点的Hardy-Weinberg检验,证明群体处于平衡状态。比对-868插入序列发现其中有24 bp与人的SMARCAL1基因(SWI/SNF related,matrix associated,actin dependent regulator of chromatin,a-like1)同源,可能与染色质的状态调节有关。 试验二:克隆了济宁百日鸡、文昌鸡、仙居鸡、海蓝褐、藏鸡BMPR-ⅠB外显子6~7序列,GenBank登录号NW_000203。检出11处单核苷酸变异,其中9个转换,2个颠换。PCR-SSCP和RFLP方法分别检测了鲁禽群体35C→T和287G→A两处突变。与产蛋性能E33和E42关联分析结果表明,这2个位点的效应亦不显著。Hardy-Weinberg检验在35位点群体处于平衡状态,而在287位点群体处于不平衡状态。 试验三:通过半定量RT-PCR分析了繁殖性状相关基因FSHR、BMPR-ⅠB和IGFBP-4 mRNA在济宁百日鸡和罗曼褐卵巢和卵泡中的发育性变化。两品种两期卵巢、卵泡中FSHR mRNA的表达差异极显著;济宁百日鸡黄卵泡和F5卵泡中FSHR mRNA的表达差异显著高于F3卵泡,与卵巢的表达水平差异极显著。罗曼褐黄卵泡中FSHR mRNA的表达差异显著高于F5卵泡和F3卵泡,与卵巢的表达水平差异极显著。济宁百日鸡与罗曼褐相比,在15周卵巢和黄卵泡中BMPR-ⅠB mRNA表达水平差异极显著。济宁百日鸡卵泡中IGFBP-4 mRNA表达显著低于卵巢;而罗曼褐IGFBP-4 mRNA的表达变化不显著。两品种各级卵泡间变化不显著。 试验四:通过差异显示RT-PCR得到鸡卵巢组织差异表达基因7个。TPD52L2在济宁百日鸡和罗曼褐20周龄(产蛋早期)较15周(未开产)卵巢中mRNA表达水平显著上调;DNAJC8 mRNA表达水平在济宁百日鸡和罗曼褐20周龄较15周卵巢中下调,差异极显著;LDHB mRNA表达水平在罗曼褐15周龄到20周龄表达下调,而在济宁百日鸡无显著变化;其它TNRC6A表达上调,LOC771135、ChEST756m4、LOC772269表达下调,差异均达到显著水平。 家禽的性成熟由一系列基因形成的基因网络调控。本研究通过对FSHR、BMPR-ⅠB和IGFBP-4的序列分析、多态性检测和表达分析,探讨了它们与鸡产蛋性能的关系;通过对卵巢组织在性成熟过程中基因表达的变化,找到了7个差异表达的基因,为进一步深入分析鸡繁殖性能尤其是性早熟相关的基因,进而用于高产、优质鸡的分子育种奠定了基础。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2007
【分类号】:S831

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【引证文献】
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5 刘晓东;王慧;王树迎;邱荣;侯衍猛;黄丽波;;FSHR在山羊发情周期不同阶段卵巢中的定位研究[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
6 谢新华;虞德兵;潘增祥;谢庄;刘红林;李齐发;;梅山猪FSHR基因5'非翻译区的克隆分析与多态性分析[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年
7 邱荣;王慧;王树迎;刘晓东;黄丽波;侯衍猛;;山羊输卵管FSHR基因在发情周期不同阶段的差异表达[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十六次学术研讨会论文集[C];2010年
8 康丽;严华祥;臧丽;梁森;张渝洁;刘东君;张宁波;唐辉;王慧;杨长锁;姜运良;;鸡FSHR基因5′调控区两个多态位点及其与产蛋性状的相关研究[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年
9 包艳波;徐日福;徐慧;王志贤;秦宁;杨雨江;姜建萍;田晓东;;大骨鸡FSHb和FSHR基因多态位点及其聚合基因型与产蛋性状的关联分析[A];第二届中国黄羽肉鸡行业发展大会会刊[C];2010年
10 郑清莲;刘永惠;张哲;;通过检测FSHR、LHR在大鼠肾脏组织中的表达探讨中医“肾主生殖”的客观物质[A];全国中医药防治老年病学术交流会学术论文集[C];2011年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 黄贺;北极狐ESR和FSHR基因多态性、表达及其与产仔关系的研究[D];东北林业大学;2013年
2 杨利华;基于卵泡雌激素受体-FSHR多肽避孕疫苗的优化设计及其抗生育效应的实验研究[D];第三军医大学;2011年
3 李迎春;FSHR多肽免疫效应及FSHR基因多态与男性不育相关性研究[D];南京医科大学;2010年
4 梁鸿雁;初情期前母猪性腺外促性腺激素受体表达的研究[D];吉林大学;2009年
5 郭洪胜;PCOS动物模型及PCOS患者CYP19、GATA-4、FSHR基因表达的初步研究[D];南方医科大学;2010年
6 傅启高;绍兴鸭优良产蛋性能的内分泌及分子生物学机制研究[D];南京农业大学;2000年
7 魏伍川;牛、羊FSHR基因5'端转录启动调控区和部分结构区序列的研究[D];西北农林科技大学;2000年
8 张宁波;鸡繁殖性状相关基因及卵巢组织差异表达基因研究[D];山东农业大学;2007年
9 吴井生;猪繁殖性状相关基因遗传效应及表达规律的研究[D];扬州大学;2013年
10 李亨;家禽繁殖性状相关基因的遗传效应及组织表达规律研究[D];扬州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 王明亮;牦牛FSHR基因部分序列多态性与繁殖性状关联分析及FSHR基因生物信息学分析[D];甘肃农业大学;2012年
2 王金鑫;不同繁殖力绵羊FSHR基因结构和表达的差异研究[D];中国农业科学院;2013年
3 邹恒;幼龄新西兰兔超数排卵及其不同日龄FSHR基因表达量变化的研究[D];扬州大学;2010年
4 刘晓东;山羊发情周期中卵巢内FSHR的定位及其mRNA表达规律的研究[D];山东农业大学;2010年
5 杨建;乌苏里貉FSHβ和FSHR基因多态性与繁殖性状的相关性研究[D];吉林农业大学;2011年
6 邢耀潭;天祝白牦牛FSH、FSHR基因多态性分析与双胎性状的关联研究[D];甘肃农业大学;2011年
7 杨少华;日粮不同能量水平对绵羊卵巢组织中FSHR和LHR基因表达的影响[D];河北农业大学;2012年
8 邱荣;山羊发情周期中输卵管内FSHR的定位及其mRNA表达规律的研究[D];山东农业大学;2010年
9 谢新华;太湖猪卵巢组织FSHR基因表达水平与5’调控区多态性分析[D];南京农业大学;2011年
10 韩静;猪H3K9乙酰化修饰及其对FSHR表达调控的影响[D];南京农业大学;2012年
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