收藏本站
《山东农业大学》 2008年
收藏 | 手机打开
二维码
手机客户端打开本文

奶山羊胎盘肽的分离提纯及其对小白鼠免疫功能的影响

马兴亮  
【摘要】: 自1985年,刘月新首次采用“匀浆-透析法”提取胎盘肽以来,广大科研工作者对胎盘肽进行了大量的理化分析与生物活性测定的研究,发现其在临床用于治疗病毒性肝炎、白细胞减少症、重症肌无力等免疫性疾病以及恶性肿瘤等,有较为理想的疗效。奶山羊胎盘的结构和功能与人的胎盘有许多相似之处,近几年来已有报道,从羊的胎盘中也可以提取出羊胎盘肽并且具有与人胎盘肽类似的生物学活性。但是对奶山羊胎盘肽的研究还没有,测定其理化性质和生物活性,看其与人胎盘肽的活性是否一致。可以为奶山羊胎盘肽的研究和将其用于治疗动物或人疾病方面提供一定的依据。以前的报道多集中于经透析或超滤制的的混合小肽的活性的研究。本试验将经过超滤和superdex75层析对混合小肽进行分离,通过检测各个组分的生物学活性来筛选有活性的组分,为下一步的生物合成或化学合成提供一定的依据。整个研究包括两大部分: 一奶山羊胎盘肽的分离提纯和含量测定 将冷冻的奶山羊胎盘常温解冻,洗净血液后用生理盐水冲洗胎盘,取胎盘的子叶,将子叶剪碎,经过反复冻融,经高速组织捣碎匀浆机匀浆,高速冷冻离心机离心沉淀,取上清液分别用0.45μm、0.22μm的滤器进行微滤,以除去不溶物质;微滤液经Millopor YM-10型超过滤器过滤得到粗样品,粗样品是无色透明液体,具有可透析性,可超滤性,无热原的小分子多肽,pH值为6.6~6.9;粗样品经superdex75层析得到四个组分肽类,分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ,冷冻干燥后均为白色的粉末;四组分经加脲和甘油Tricine-SDS-PAGE电泳法电泳。结果显示组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的分子量分别为10.139KDa、8.166KDa、7.447KDa和6.761KDa;由考马斯亮蓝G-250法测定组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的含量分别为:0.96mg/g、1.2mg/g、1.32mg/g、1.8mg/g。 二奶山羊胎盘肽对小白鼠免疫功能的影响 本实验将小白鼠随机分为6大组,其中5组为实验组(分别腹腔注射组分:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和粗提物);每个实验组又分为高中低三种剂量小组(分别为0.1mL、0.2mL、0.4mL),每小组5只;对照组5只,仅注射生理盐水。每天注射一次,连续注射一周。通过对小鼠外周血血清白介素2含量、脾脏T淋巴细胞增殖反应、脾脏NK细胞活性和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响来考察奶山羊胎盘肽的免疫活性作用。 1.通过放射性免疫法测定小鼠外周血中IL-2的含量,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以显著提高小鼠外周血中IL-2的含量,比对照组提高了15.3%~30.1%(p0.05)。 2.通过MTT法测定脾脏T淋巴细胞增殖反应,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以在体内能极显著协同ConA刺激脾脏淋巴细胞增殖(p0.01)。 3.通过MTT法测定脾脏NK细胞的杀伤活性,结果显示,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以极显著提高小白鼠脾脏NK细胞的杀伤活性(p0.01)。 4.通过腹腔巨噬细胞吞噬中性红实验可知,组分Ⅲ、Ⅳ和粗提物可以极显著提高小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能(p0.01)。 由以上奶山羊胎盘肽对小鼠免疫功能影响的4个实验结果中,发现存在剂量关系,随着浓度的能加而增强,但是差异不显著;在奶山羊胎盘肽中有免疫活性的是组分Ⅲ和Ⅳ。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2008
【分类号】:S827

手机知网App
【引证文献】
中国期刊全文数据库 前1条
1 焦艳丽;杜冰;郭晓明;倪婉娜;李明玉;杨公明;;超声提取羊胎盘水溶性活性蛋白[J];食品与发酵工业;2011年11期
中国硕士学位论文全文数据库 前1条
1 李曦;鸡胚蛋对免疫力低下小鼠的免疫调节功能研究[D];江南大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 丰慧根,李延兰,刘明林,任太芳,杨保胜;胎盘免疫调节多肽遗传毒性和抗突变作用的研究[J];癌变.畸变.突变;1998年03期
2 任建梅,吴骏,王玉珍;胎盘因子的研制[J];包头医学;1997年01期
3 董泉洲,尚尔和,王小惠,高岭;羊胎盘营养液的制备及其在化妆品中的应用[J];日用化学工业;1998年01期
4 葛瑞宏,纪芳,朱蓓薇;羊胎盘肽的研制[J];大连轻工业学院学报;2003年04期
5 石继红,赵永同,王俊楼,韩苇,颜真,张英起;SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析小分子多肽[J];第四军医大学学报;2000年06期
6 黄妙儿;人胎盘免疫调节因子治疗恶性肿瘤放、化疗后白细胞降低30例疗效分析[J];广东医学;1999年02期
7 康光忠,吕军华,俞剑飞;胎盘免疫调节肽遗传毒理研究[J];赣南医学院学报;2000年02期
8 陈水亲,黄彬红,吴小云,赵清明,熊跃玲;人胎盘免疫调节因子对小白鼠SOD活性及LPO含量的影响[J];赣南医学院学报;2000年04期
9 陈水亲,徐静,曾捷;人胎盘免疫调节因子及其生物活性[J];赣南医学院学报;2002年04期
10 严宜明;人胎盘免疫调节因子对精神分裂症患者红细胞C_(3b)受体的影响[J];赣南医学院学报;1994年02期
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 许强华,周世平;胆红素的提取和含量测定[J];安徽化工;2005年04期
2 张焱;范远景;;碱性蛋白酶水解大豆多肽及抑制ACE效果的研究[J];安徽农业科学;2007年20期
3 洪伟鸣;邢晓玲;郁杰;葛竹兴;王妲妲;;仔猪痢清对动物细胞免疫功能影响的初步研究[J];安徽农业科学;2009年01期
4 李春香;;尖海龙提取物对淋巴细胞的作用[J];安徽农业科学;2009年03期
5 宁鹏;张寿;尚海忠;高丽英;刘丽娟;;牦牛胎盘抗氧化作用的研究[J];安徽农业科学;2009年18期
6 常兰;宁鹏;张寿;尚海忠;高丽英;黄敬阳;;高原牦牛胎盘粉对衰老模型小鼠抗氧化作用的研究Ⅰ[J];安徽农业科学;2009年18期
7 周乃继;程茂基;李爱科;潘雷;;Tricine-SDS-PAGE鉴定不同品质饲料蛋白质的组成[J];安徽农业科学;2009年19期
8 岳真;曲爱琴;李守玲;李玺;刘海光;王琪琳;;海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究[J];安徽农业科学;2010年16期
9 吴晓峰;刘春美;潘扬;蒋亚萍;潘稚云;;发酵时间对灵巴菌质毒性成分含量的影响[J];安徽农业科学;2011年22期
10 吴少辉;刘光明;;美洲大蠊中小分子肽的Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分离探索[J];安徽农业科学;2012年11期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 陈雅;孟德胜;徐果;杨征;冯一;;抗皱眼霜的质量标准研究[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年
2 纪丽丽;戴永海;王中杰;;中草药免疫佐剂的研究进展[A];中国畜牧兽医学会家畜内科学分会第七届代表大会暨学术研讨会论文集(下册)[C];2011年
3 冯敏山;牛一兵;王凤宝;刘刚;安翠花;;枸杞菜粉对雏鸡生长性能及免疫功能的影响[A];安全优质的家禽生产——第十五次全国家禽学术讨论会论文集[C];2011年
4 徐兵;潘晨;蒋晓织;林曼芝;陈敏;林灼;陈怡;陈惠聪;;梯度pH共沉淀法回收人工肝丢弃血浆蛋白[A];第三届全国重型肝病及人工肝血液净化学术年会论文集(上册)[C];2007年
5 王沛珍;顾金保;彭鸿娟;;原核表达的抗菌肽thanatin抑制革兰氏阳性及阴性菌的生长[A];格莱姆抗菌肽——抗菌肽开发与应用技术研讨会论文集[C];2009年
6 张天民;崔慧斐;王凤山;荣晓花;;2003年我国生化药物研究进展[A];2004年全国生物技术学术研讨会论文集[C];2004年
7 张发科;;当归多糖化学组分的研究概述[A];山东省药学会第一届学术年会论文集(下)[C];2005年
8 陈明胜;;蜂王幼虫活性肽保健功能的研究[A];2008年全国蜂产品市场信息交流会暨中国(郑州)蜂业博览会论文集[C];2008年
9 崔瑛;刘菊;赵素霞;;熟地黄粗多糖提取、初步纯化工艺研究[A];第十届全国中药和天然药物学术研讨会论文集[C];2009年
10 李亚南;朱凤才;郭志军;叶强;钟泽荣;张成富;梁丽;陈驰;;A/C/Y/W_(135)群脑膜炎球菌多糖疫苗安全性及免疫原性人群考察[A];2010年中国药学大会暨第十届中国药师周论文集[C];2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 付英杰;阿胶低肽及其制剂的研究[D];山东中医药大学;2010年
2 黄略略;冻干—真空微波串联联合干燥苹果的保质和节能工艺及模型研究[D];江南大学;2011年
3 孔娜;mChIL-18基因与IBDV VP2基因或AIV HA1基因在pFastBac~(TM) Dual中的共表达及其免疫原性研究[D];山东农业大学;2011年
4 张博;亚甲蓝光化学法对血液及血制品中淋巴细胞及病毒的灭活效果及其机理[D];华东师范大学;2011年
5 李海刚;灯盏花素口服吸收机制及其自微乳剂的研制[D];广州中医药大学;2011年
6 卫娜;鹅白细胞介素2受体α链与白细胞介素18特性的初步研究[D];东北农业大学;2011年
7 马素永;重组甘氨酸-胸腺素β4生产工艺研究[D];天津大学;2011年
8 龚吉军;油茶粕多肽的制备及其生物活性研究[D];中南林业科技大学;2011年
9 宋鸿雁;堆型艾美耳球虫乳酸脱氢酶DNA疫苗免疫保护作用及免疫机理研究[D];南京农业大学;2010年
10 季顺东;抗血小板膜糖蛋白单抗片段肺栓塞动物模型显像研究[D];苏州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 葛静微;猪血中超氧化物歧化酶(SOD)和血红素的提取及SOD的应用研究[D];华中农业大学;2010年
2 朱发银;解淀粉芽胞杆菌WH1抗真菌机制的研究[D];华中农业大学;2010年
3 谢进;抗鹅膏肽的全合成及其活性测定[D];中南林业科技大学;2009年
4 范忠玲;鸡白细胞介素18成熟蛋白在昆虫杆状病毒系统中的表达及其活性检测[D];山东农业大学;2010年
5 王婷婷;O型FMDV VP1基因与山羊IL-18基因在昆虫细胞中的共表达与活性检测[D];山东农业大学;2010年
6 王希辉;鸡白介素18成熟蛋白突变体在毕赤酵母中的高效表达及其生物活性检测[D];山东农业大学;2010年
7 史瑜婷;酶法降低β—乳球蛋白含量的研究[D];安徽农业大学;2010年
8 李漫男;酶解花生粕蛋白—糖美拉德反应制备呈味基料研究[D];河南工业大学;2010年
9 陈皇珍;王秀霞教授治疗外阴白色病变的临床经验总结[D];黑龙江中医药大学;2010年
10 李宁;发酵液中分离提取1,3-丙二醇的实验研究[D];华东理工大学;2011年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王春燕,钱善凤;禽胚发育阶段逐日的“蛋相”变化与解剖学特征[J];安徽教育学院学报;2002年06期
2 葛瑞宏,纪芳,朱蓓薇;羊胎盘肽的研制[J];大连轻工业学院学报;2003年04期
3 张铁鹰,汪儆;单胃动物体外消化模拟技术研究进展[J];动物营养学报;2005年02期
4 叶宏涛;刘国华;;体外消化法在动物上的应用[J];饲料工业;2007年21期
5 倪俊;一氧化氮与外科免疫[J];国外医学(创伤与外科基本问题分册);1996年03期
6 田维毅;王文佳;李海峰;董登祥;杨娟;;中性红法检测巨噬细胞吞噬功能的实验条件的优化[J];贵阳中医学院学报;2009年02期
7 郑建华;;白介素-2研究进展[J];海峡药学;2006年03期
8 尹美珍;李世普;袁琳;戴红莲;;小鼠腹腔巨噬细胞的分离培养与鉴定[J];武汉大学学报(医学版);2006年02期
9 张艳菊;赵晓春;;中草药中有效成分的溶剂提取法[J];养殖技术顾问;2009年11期
10 钱万英,余嗣明,施佩璜;鸡胚蛋营养成分的测试[J];生理科学;1986年06期
中国博士学位论文全文数据库 前1条
1 房新平;牛胎盘免疫活性肽提取与酶法制备研究[D];江南大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库 前8条
1 钟英英;羊胎盘免疫调节因子调节BALB/c小鼠细胞免疫功能的实验研究[D];西南师范大学;2005年
2 盛玉青;螺旋藻多糖硫酸酯的制备及其抗肿瘤和免疫活性的初步研究[D];南京中医药大学;2006年
3 马丽娜;鸡胚多肽的提取及初步分离纯化研究[D];山东农业大学;2007年
4 谷玉;羊胎盘保健品的制备及主要功效研究[D];安徽农业大学;2007年
5 刘传国;乳铁素的免疫调节作用机理的研究[D];天津商业大学;2008年
6 崔东安;蕨麻多糖对吞噬细胞功能及免疫功能低下小鼠的免疫调节作用研究[D];中国农业科学院;2008年
7 徐飞;基于体外消化模型的香蕉果肉微量元素形态分析[D];海南大学;2010年
8 王伟楠;人参口服液的膜分离制备及功效学研究[D];长春中医药大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 丰慧根,李延兰,刘明林,任太芳,杨保胜;胎盘免疫调节多肽遗传毒性和抗突变作用的研究[J];癌变.畸变.突变;1998年03期
2 吴鹤龄,马继霞,孙允明;北京黄腐植酸对小鼠骨髓细胞微核率的影响[J];北京大学学报(自然科学版);1983年05期
3 杨秀芳,许牡丹,吴明鑫;活化羊胎素的提取与应用开发[J];宝鸡文理学院学报(自然科学版);1999年01期
4 王桂兰,赵赤,王莉,张萍兰;三种转移因子的部分理化性质比较[J];白求恩医科大学学报;1990年05期
5 任建梅,吴骏,王玉珍;胎盘因子的研制[J];包头医学;1997年01期
6 张蕴芬,崔文英,李顺成,李卫东,骆保;观察巨噬细胞吞噬功能的滴片法(滴片法及爬片法的比较实验)[J];北京医学院学报;1979年02期
7 凌沛学 ,张天民 ,陈方坤 ,刘红;透明质酸的研制及其在化妆品中的应用[J];日用化学工业;1987年06期
8 董泉洲,尚尔和,王小惠,高岭;羊胎盘营养液的制备及其在化妆品中的应用[J];日用化学工业;1998年01期
9 吴健;转移因子的研究和应用[J];河北农业大学学报;1993年04期
10 邱磊,郭葆玉,苗红,道书艳,张冉,袁鹏群,杨旭;胸腺素а原的生物学活性及基因表达谱芯片分析[J];第二军医大学学报;2002年06期
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王功胜;提高奶山羊产奶量的关键措施[J];农村百事通;2002年23期
2 张兆顺;奶山羊的管理技术[J];农村养殖技术;2002年03期
3 王瑞荣;养奶山羊口诀[J];农村养殖技术;2002年09期
4 张双德;提高奶山羊产奶量的几点建议[J];农村养殖技术;2002年13期
5 邢攸荷;提高奶山羊产奶量的十一条措施[J];饲料博览;2002年02期
6 战培国;怎样提高奶山羊的繁殖率[J];农业科技通讯;2003年12期
7 张双德;提高奶山羊产奶量十要点[J];养殖技术顾问;2003年01期
8 吉进卿,崔国庆,过效民,徐浩天;应大力推广的奶山羊饲养新技术[J];河南畜牧兽医;2003年01期
9 赵维;奶山羊的管理技术[J];河南畜牧兽医;2003年03期
10 金江;怎样提高奶山羊产奶量[J];河南畜牧兽医;2003年03期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 褚建刚;刘自建;郐明玉;;文登奶山羊品种选育报告[A];《2009中国羊业进展》论文集[C];2009年
2 魏志杰;;奶山羊规模养殖场生产经营管理体会[A];中国畜牧兽医学会养羊学分会全国养羊生产与学术研讨会议论文集[C];2010年
3 乔文丽;褚建刚;郐明玉;崔军明;;文登奶山羊良种繁育产业化技术体系研究报告[A];2010中国羊业进展[C];2010年
4 彭燕;;奶山羊精液冷冻保存试验[A];《2011中国羊业进展》论文集[C];2011年
5 马晓宁;陈永昌;杨春花;杨玉梅;丁文波;王芸;伍贤莉;苏雷;;萨能奶山羊冻胚移植技术研究与推广[A];2005中国羊业进展——第二届中国羊业发展大会会刊[C];2005年
6 罗军;曹斌云;姚军虎;武永厚;;奶山羊发展现状与产业化前景展望[A];2006中国羊业进展——第三届中国羊业发展大会论文集[C];2006年
7 骆承庠;;奶山羊公羔的综合利用[A];第四届中国羊业发展大会论文集[C];2007年
8 谭旭信;宋云清;;河南奶山羊培育技术[A];第四届中国羊业发展大会论文集[C];2007年
9 罗军;曹斌云;武永厚;绳贺军;;奶山羊市场前景与发展对策[A];第四届中国羊业发展大会论文集[C];2007年
10 李春;李庆章;闫宏博;;奶山羊乳腺发育相关重要基因的筛选及其功能表达调控[A];全国动物生理生化第十次学术交流会论文摘要汇编[C];2008年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 钟石;陕西做大做强奶山羊产业[N];中国畜牧兽医报;2007年
2 郑综文 元莉华;做好规划 加快关中奶山羊产业发展[N];中国畜牧兽医报;2007年
3 高东风通讯员 周焕;3年建设120个奶山羊服务站[N];渭南日报;2007年
4 李尔平 张钊 记者 程娟;三原奶山羊产业发展势头强劲[N];咸阳日报;2007年
5 殷际辉 陈沛强;富平奶山羊欲与奶牛试比“高”[N];中国特产报;2008年
6 记者 韩乐;投资3亿开发奶山羊产业[N];渭南日报;2008年
7 本报记者 王拉田;奶山羊投资少挣钱多[N];宝鸡日报;2008年
8 李焕玲 省农科院畜牧兽医研究所研究员;奶山羊发展前景分析[N];山东科技报;2009年
9 记者 韩乐;共同研发奶山羊产品[N];渭南日报;2009年
10 山东省农科院畜牧所研究员 王可;我省奶山羊发展现状及对策建议[N];山东科技报;2010年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 侯金星;奶山羊产奶性状候选基因的筛选及其多基因聚合效应的研究[D];西北农林科技大学;2013年
2 朱广琴;多羔和单羔奶山羊发情期卵巢组织差异表达基因的筛选、鉴定及分析[D];西北农林科技大学;2011年
3 尹多;核移植介导生产转基因延边奶山羊供核细胞体系的研究[D];延边大学;2013年
4 李术;奶山羊氟病毒理学的研究[D];东北农业大学;2001年
5 丁武;波尔山羊与关中奶山羊杂交后代产肉性能及羊肉品质研究[D];西北农林科技大学;2005年
6 王强;奶山羊阴外动脉内乳成分前体物理想平衡模式的研究[D];内蒙古农业大学;2010年
7 曲波;奶山羊乳腺发育的形态学研究[D];东北农业大学;2008年
8 张艳丽;转基因克隆法制作人溶酶体β-葡萄糖苷酶奶山羊乳腺生物反应器的研究[D];南京农业大学;2010年
9 林建;体细胞核移植制备转IGF-1基因奶山羊的研究[D];南京农业大学;2013年
10 柳海星;转人血清白蛋白延边奶山羊—绵羊体细胞克隆胚胎生产体系的优化[D];延边大学;2013年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 白成斌;1~90d关中奶山羊能量营养需要研究[D];西北农林科技大学;2010年
2 高建伟;不同锌源和水平在奶山羊肠道的消化吸收及对相关内分泌的影响[D];河南农业大学;2010年
3 陈珊珊;中国奶山羊遗传多样性的微卫星分析[D];山东农业大学;2011年
4 黄汉军;农户饲养条件下关中奶山羊典型日粮与生产性能关系的研究[D];西北农林科技大学;2005年
5 郭本玲;西农萨能奶山羊和关中奶山羊乳铁蛋白基因遗传多态性及其与经济性状的关联分析[D];西北农林科技大学;2011年
6 朱海鲸;奶山羊雄性生殖干细胞的分离培养及向精子细胞的诱导分化[D];西北农林科技大学;2011年
7 许啸;奶山羊高温预警指标的筛选及有机铬调控作用研究[D];华中农业大学;2013年
8 白龙;奶山羊卵巢特异性启动子的克隆及其转录活性的研究[D];西北农林科技大学;2013年
9 刘志刚;十八碳植物油和丙酸前体对奶山羊乳脂脂肪酸合成的影响[D];延边大学;2013年
10 丁莉;关中奶山羊周岁前消化系统发育规律的研究[D];西北农林科技大学;2007年
 快捷付款方式  订购知网充值卡  订购热线  帮助中心
  • 400-819-9993
  • 010-62791813
  • 010-62985026