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《山东农业大学》 2009年
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涕灭威降解菌的分离鉴定及降解特性研究

王慧  
【摘要】: 本研究从山东省使用涕灭威的地区采集土样,通过富集培养,筛选出对涕灭威具有降解能力的优势菌株。对菌株进行了降解特性测定,研究了不同温度、pH值、外加氮源浓度和不同底物浓度及不同接种量对优势菌株降解涕灭威特性的影响,并对降解酶的降解特性进行了初步研究。主要内容如下: 1.利用富集培养法,在含涕灭威的LB平板培养基上得到1株可降解涕灭威的菌株,编号为ZH-1,它可在以涕灭威为唯一氮源的无机盐培养基中生长。通过形态观察、生理生化特征测定和16S rDNA序列分析,确定菌株ZH-1为鞘氨醇杆菌(Sphingobacterium. sp.)。菌株生长的最佳碳源为蔗糖,氮源为硝酸钠,C/N比为1:1。 2.通过紫外分光光度法测定了不同温度、pH、外加氮源浓度及涕灭威浓度对菌株ZH-1的生长量和菌株对涕灭威降解能力的影响。结果表明,在无机盐液体培养基中,温度为30℃,120 rpm摇床上恒温振荡培养5天,对50mg/L涕灭威的平均降解率为68%。细菌在温度为25-30℃,pH值为6.5-8.0时生长量较大,生长量随着外加氮源的增加而增加,高于0.3%时趋缓。 3.对降解菌ZH-1的降解酶进行了初步研究。比较了降解菌的胞内酶和胞外酶的降解活性,确定该菌的降解酶主要为胞内酶。对胞内酶在不同条件下的活性进行了探讨,结果表明,酶的最适温度为30℃,最适pH为7.0,降解酶的米氏常数Km和最大反应速度Vmax分别为28.41 nmol/mL和227.67 nmol/min。 4.测定了常用的杀菌剂多菌灵、腈菌唑、戊唑醇和代森锰锌对涕灭威降解菌生长量和降解率的影响。结果表明,这几种杀菌剂在不同浓度下对菌株的生长并没有明显的抑制作用。从理论上可以推测,施用涕灭威降解菌后再施用其它杀菌剂,不会影响降解菌的生长和该菌株对涕灭威的降解能力。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:X172

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