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《山东农业大学》 2009年
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禽戊型肝炎病毒抗体在人、猪和鸡血清中的检测与鉴定

荆胜涛  
【摘要】: 戊型肝炎是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus, HEV)感染所致的急性病毒性肝炎,主要流行于亚洲、非洲和拉丁美洲等发展中国家。在我国发生的急性病毒性肝炎中戊型肝炎约占20%左右。据1992~1995年全国病毒性肝炎血清流行病学调查,以抗-HEV ELISA试剂检测,结果表明抗-HEV流行率为17.2%,因此可以推算我国至少有2.1亿人感染过HEV,这使戊肝成为一个重要的公共卫生问题。 1997年,猪HEV在美国被发现,2001年,禽HEV被从患有肝脾肿大(hepatitis-splenomegaly, HS)综合症的鸡胆汁中分离出。与猪HEV不导致猪出现临床症状不同,禽HEV感染鸡表现为肝脾肿大,肝坏死,肝出血,卵巢退化,死亡率上升等。国际病毒命名委员会于2004年将禽HEV归属于戊型肝炎病毒属。自禽HEV发现以来,对禽HEV的血清学调查已有数篇报道。如梁久红和孟继鸿报道我国南方鸡的血清中禽HEV抗体阳性率为33%,张璐等报道健康鸡禽HEV抗体阳性率为28.5%,而患有肝脾肿大综合征鸡的禽HEV抗体阳性率为43.3%,Huang等对美国五个州的鸡群禽HEV进行了调查,结果证实,禽HEV在鸡群和个鸡中血清抗体阳性率分别为71%和30%,不同年龄组其抗体阳性率不同(18周龄以下为17%,成年鸡为36%)。同时利用逆转录PCR技术,从21份患有HS综合症的鸡的胆汁中检出12份禽HEV阳性,测序结果显示这些流行株与标准株的同源性为79%-88%,与已知的人、猪HEV分离株的同源性为56%-61%。这些检测调查结果证明了禽与人、猪HEV一样具有遗传学的异基因性。目前虽然还没有证据表明禽HEV可以感染人类,非人灵长类实验动物感染禽HEV也未成功,但抗禽HEV抗体在人和猪血清中的检出,尽管这些抗体不能确定是特异性抗禽HEV的抗体,禽HEV感染人类的可能性仍然不能排除。 为了调查禽HEV在人群中的血清学状况,我们采用禽HEV ORF2 C端编码的ORF2重组蛋白以及肽抗原用间接ELISA及Western Blot法对7234份青年人血清进行抗禽HEV ORF2抗体检测和鉴定,结果从7234份人血清中检出66份(阳性率0.91%)抗禽HEV ORF2抗体ELISA阳性血清;通过Western blot验证为特异性抗禽HEV ORF2抗体,其中28份血清(阳性率42.4%)含有特异性抗禽HEV肽抗原Pep-8或Pep-9抗体,其中女性21人,男性7人,HBsAg阳性3人。说明青年人群血清中存在特异性抗禽HEV抗体,阳性率为0.387%,女性抗禽HEV ORF2抗体阳性率为男性的3倍,说明青年女性比青年男性更有可能感染禽HEV。同时本实验对猪和禽血清中的抗禽戊型肝炎病毒ORF2抗体的检测以及对阳性血清抗体特异性的鉴定。结果表明,人、猪和禽血清中抗禽HEV ORF2抗体阳性率为0.91%~62.5%。因为禽与哺乳动物HEV ORF2抗原具有共有的抗原表位,而阳性血清中抗禽HEV ORF2特异性抗原表位抗体的阳性率为41.3%~92.1%,提示人、猪和鸡都有感染禽HEV的可能性,这为进一步验证禽HEV可能造成的人兽共感染提供新的科学依据。结果显示健康人血清中存在抗禽HEV ORF2特异性抗体,而且,年轻女性禽HEV ORF2抗体阳性率高于男性3倍。
【学位授予单位】:山东农业大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2009
【分类号】:S852.65

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【参考文献】
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