小肠粘膜下层复合成骨诱导的脂肪干细胞体内成骨修复骨缺损的实验研究
【摘要】：目的
研究制备具有成骨活性的仿生性骨膜,植入骨缺损区修复骨缺损,为解决骨缺损修复提供新的思路,进而为临床的实际应用,最终代替自体骨及异体骨移植修复骨缺损提供实验依据。
方法
应用组织工程的技术方法,以组织学、免疫组织化学与动物实验学相结合的方法进行实验研究。选定脂肪干细胞(ADSCs)作为种子细胞,体外成骨诱导为成骨细胞,对其生物学特性进行检测,通过细胞的形态学、碱性磷酸酶活性、茜素红染色、von Kossa染色等技术指标鉴定其向成骨方向分化。将成骨诱导的脂肪干细胞与作为支架材料的小肠粘膜下层(SIS)在体外复合培养构建出具有功能的细胞-材料复合体,制成仿生性骨膜,植入裸鼠皮下,通过组织学、透射电镜、免疫组织化学观察成骨情况及两者的细胞相容性。最后建立节段性骨缺损动物模型,将仿生性骨膜植入骨缺损区修复骨缺损,通过X线摄片、组织形态学检测等方法鉴定其成骨机制与自体骨膜移植成骨的相似性,确定仿生骨膜修复骨缺损的效果。
结果
体外分离培养扩增兔脂肪干细胞,经成骨诱导后可表达成骨细胞表型。成骨诱导的脂肪干细胞与SIS复合培养可构建出具有生理骨膜结构和功能的仿生骨膜,植入裸鼠体内可形成具有良好血运的新生骨组织。仿生骨膜修复兔节段性骨缺损效果良好,其成骨机制与自体骨膜移植成骨类似。
结论
兔脂肪干细胞体外成骨诱导培养可转化为成骨细胞,可表达成骨细胞表型,为脂肪干细胞作为骨组织工程的种子细胞提供实验依据。SIS与脂肪干细胞构建的仿生骨膜在动物实验的效果,确定了SIS作为支架材料为组织工程骨的新陈代谢提供了良好的环境,说明两者具有良好的细胞生物相容性。仿生骨膜可修复兔长段骨缺损的实验研究,使组织工程骨膜移植有望成为修复大段骨缺损的有效手段。意义近年来,组织工程技术的迅速发展使现代医学走出了组织、器官移植的范畴,进入了组织、器官再造的新时代。骨缺损是骨科临床上常见的疾病,骨缺损的修复也是临床治疗的难题之一。利用骨组织工程学技术制造仿生性骨膜,为解决骨缺损修复这个难题提供新的思路,寄希望利用患者自身的脂肪干细胞与SIS构建仿生骨膜,应用于临床骨缺损、骨不连的治疗,为骨缺损的修复治疗带来创新性的变革。
【关键词】：组织工程 脂肪干细胞 仿生性骨膜 骨缺损 【学位授予单位】：泰山医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R329
【目录】：
- 中文摘要5-7
- 英文摘要7-9
- 符号说明9-10
- 前言10-14
- 第一部分 免脂肪干细胞体外成骨诱导培养与成骨细胞活性鉴定14-23
- 材料与方法14-18
- 结果18-19
- 讨论19-22
- 结论22-23
- 第二部分 成骨诱导的脂肪干细胞与小肠粘膜下层体外构建仿生性骨膜及其体内成骨的实验研究23-37
- 一、仿生骨膜的体外构建23-30
- 材料与方法23-25
- 结果25-26
- 讨论26-29
- 结论29-30
- 二、仿生骨膜体内成骨的[实验研究30-37
- 材料与方法30-32
- 结果32-33
- 讨论33-36
- 结论36-37
- 第三部分 仿生性组织工程骨膜修复节段性骨缺损的实验研究37-47
- 材料与方法37-39
- 结果39-41
- 讨论41-46
- 结论46-47
- 全文结论47-48
- 附图48-55
- 参考文献55-63
- 致谢63-64
- 攻读学位期间发表的学术论文64
|
|
|
|
| 1 |
张开刚,曾炳芳,张长青;小肠粘膜下层用作组织工程支架材料研究进展[J];国外医学.骨科学分册;2004年04期 |
| 2 |
陈钢,赵士杰,俞光岩,王会信;胶原膜与骨形成蛋白复合物的成骨作用研究[J];中国口腔种植学杂志;2001年01期 |
| 3 |
邓春华;孙祥宙;高勇;罗道升;刘贵华;黄燕平;;大鼠脂肪组织来源干细胞的分离、培养和生物学特性的研究[J];中华男科学杂志;2008年02期 |
| 4 |
李德渊;母得志;;脂肪组织源性干细胞的生物学特性与多向分化潜能[J];生物医学工程与临床;2008年06期 |
| 5 |
张胜利;邓展生;李宝军;郭晓柠;高嵩涛;沈民仁;;大鼠脂肪间充质干细胞的成骨分化[J];中国组织工程研究与临床康复;2007年06期 |
| 6 |
周晓;左朝晖;曹谊林;;组织工程骨修复骨缺损的研究进展[J];中国现代手术学杂志;2006年04期 |
| 7 |
刘红梅;甄国华;张珍祥;张惠兰;汪涛;曹勇;徐永健;;放射损伤对于移植的骨髓间充质干细胞在受体大鼠不同器官中植入的影响[J];中国病理生理杂志;2008年04期 |
| 8 |
裴国献,魏宽海;显微外科与血管化组织工程组织的构建[J];中华创伤骨科杂志;2004年04期 |
| 9 |
苏琰,张长青,孙鲁源,张晔,曾炳芳;小肠粘膜下层(SIS)桥接周围神经缺损的实验研究[J];中华创伤骨科杂志;2004年10期 |
| 10 |
张开刚,曾炳芳,张长青;小肠粘膜下层的制备及细胞相容性的实验研究[J];中华创伤骨科杂志;2005年04期 |
|
|
|
|
|
| 1 |
王珍;徐根波;;骨髓间质干细胞及其临床应用的研究进展[J];国外医学(内科学分册);2006年02期 |
| 2 |
陈滨
,裴国献
,王珂
,金丹
,魏宽海
,任高宏;筋膜瓣促组织工程骨体内再血管化的实验研究[J];解放军医学杂志;2002年06期 |
| 3 |
陈光辉
,王燕,李天德,邵建华;自成人脂肪组织分离与培养间充质干细胞的实验研究[J];解放军医学杂志;2004年06期 |
| 4 |
陆伟;金岩;张勇杰;;SD大鼠脂肪组织来源干细胞体外生物学特性研究[J];临床口腔医学杂志;2006年07期 |
| 5 |
刘风华;杨冬梓;王沂峰;梁晓萍;彭文明;曹长安;陈系古;郭忠敏;;骨髓间充质干细胞向“类精子”分化的动物实验鉴定[J];中华男科学杂志;2007年04期 |
| 6 |
李彦林,杨志明,解慧琪,秦廷武,黄富国;生物衍生组织工程骨支架材料的制备及理化特性[J];生物医学工程学杂志;2002年01期 |
| 7 |
单秀莉;王青;林志勇;孙鸿义;林秀娟;陈鲁沂;;大鼠脂肪干细胞体外定向诱导分化为成骨细胞的研究[J];牙体牙髓牙周病学杂志;2006年08期 |
| 8 |
曾缨;王凌云;张成;邓宇斌;;骨髓间质干细胞诱导为肌样细胞分化相关基因的表达[J];中国病理生理杂志;2006年09期 |
| 9 |
王颖;邓宇斌;李艳;王晔;那晓东;;骨髓间质干细胞诱导为神经元样细胞移植治疗脑梗塞模型大鼠后运动功能的改善[J];中国病理生理杂志;2006年12期 |
| 10 |
裴国献,金丹;骨组织工程学种子细胞研究进展[J];中华创伤骨科杂志;2003年01期 |
|
|
|
|
|
| 1 |
符气祯,李佛保,谢君鹤,黄纲;骨膜移植重建关节面治疗肘关节强直畸形[J];中国修复重建外科杂志;2002年04期 |
| 2 |
张峰;陈中伟;;带血管骨膜移植[J];中华创伤杂志;1989年01期 |
| 3 |
陶笙，张伯勋，卢世壁;邮票状骨膜片血肿内植入修复骨缺损的实验研究[J];解放军医学杂志;1995年05期 |
| 4 |
王有成;骨膜移植治疗穿孔性巩膜坏死[J];眼科研究;1995年01期 |
| 5 |
张庆胜,王立涛,刘玉民,彭俊华,耿博民,李文生;骨膜移植治疗髌骨软骨软化症[J];实用骨科杂志;2000年04期 |
| 6 |
苏峰;影响骨膜成骨的因素[J];张家口医学院学报;1995年01期 |
| 7 |
张德春;李亚明;许宏德;阮永平;胡守昌;;自体游离骨膜移植实验研究[J];中国骨与关节损伤杂志;1990年03期 |
| 8 |
王玉发,李庆霖,张巨,王国君;筋膜蒂骨膜移植修复关节软骨缺损的实验研究[J];中华显微外科杂志;1997年02期 |
| 9 |
赵永;门新刚;崔松体;王喜宾;;带血管蒂骨膜移植治疗股骨颈骨折[J];华南国防医学杂志;2007年02期 |
| 10 |
林大雄;;重建血运骨膜移植--一种不需植骨而能产生功能性新骨的新方法[J];国际外科学杂志;1979年04期 |
|
快捷付款方式
订购知网充值卡
订购热线
帮助中心