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《山东中医药大学》 2010年
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免疫球蛋白重链结合蛋白在人骨肉瘤细胞中的表达及临床意义

李天强  
【摘要】:目的:应用不同的实验方法来检测免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip)在人骨肉瘤细胞株Saos_2细胞中的表达,并进一步研究其在临床20例骨肉瘤标本及其周围正常组织中的表达;并比较骨肉瘤组织及正常组织表达的差异;术前化疗与术前未化疗标本表达的差异;远隔转移及未转移标本之间的表达差异。并依此来推断这Bip在骨肉瘤组织中的表达与骨肉瘤生长、转移的关系以及化疗对其表达的影响,以期能为骨肉瘤治疗和预后评估提供实验和理论依据。方法:1取人骨肉瘤细胞株Saos_2细胞进行免疫荧光染色。以空白组作为对照。用荧光显微镜观察是否有Bip蛋白质表达。2取人骨肉瘤细胞株Saos_2细胞抽提细胞总RNA,然后用RT-PCR试剂盒进行PCR反应。检测是否有BipmRNA的表达。3取临床骨肉瘤及其周围正常组织标本各20例,骨肉瘤标本中未转移者6例,转移者14例;术前化疗者12例,术前未化疗者8例。做石蜡切片进行免疫荧光染色。检测Bip表达强度。结果:1 Bip在人骨肉瘤细胞株Saos_2细胞中有表达,主要存在于细胞内质网膜上,细胞胞浆被染为绿色为阳性。染色深时为全胞浆绿色,浅时为类泡样胞浆绿染。2BipmRNA在人骨肉瘤细胞株Saos 2细胞中有表达。3所有标本中都有Bip的表达。Bip的表达强度为肿瘤组织正常组织,肿瘤转移组未转移组,术前未化疗组术前化疗组。肿瘤转移组和未转移组,术前未化疗组和术前化疗组表达量有显著差异。结论:本研究表明,Bip可刺激肿瘤增殖,存活,转移,并且对化疗药物治疗有相应的反应。因此,Bip可作为骨肉瘤生长转移和治疗反应的分子靶向标记,在临床工作中也可应用Bip作为判断骨肉瘤发展和预后的生物标记。而应用基因手段下调Bip的表达可能抑制骨肉瘤细胞的生长、增加骨肉瘤细胞对化疗药物的敏感性,控制其转移并改善预后。抑制Bip表达的联合治疗可能代表根除残留骨肉瘤的新方法。因此,利用Bip作为分子靶点或介质进行骨肉瘤基因治疗具有广泛的应用前景。
【学位授予单位】:山东中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R738.1

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