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《山东中医药大学》 2010年
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PMS肝气郁证大鼠含药血清对原代海马神经元ERβ信号通路相关蛋白表达水平的影响

王凤  
【摘要】:目的:观察PMS大鼠血清和含经前舒血清对体外培养的新生大鼠原代海马神经元细胞活力和ERβ及相关蛋白表达的影响情况,探讨PMS肝气郁证发病的微观机制,并明确中药复方制剂经前舒颗粒的相应作用靶点。 方法:采用阴道细胞涂片法确定大鼠动情周期:接收期与非接收期,以非接受期大鼠造模,通过旷场实验评价模型。采用慢性应激束缚法制备PMS肝气郁证大鼠模型,以调肝方药经前舒颗粒进行药物干预;制备正常组、PMS肝郁模型组和PMS肝郁给药组大鼠血清,分别加入体外培养新生大鼠海马神经元的培养基中,MTT法测定神经元细胞活力;用蛋白质印迹技术(western blot)检测含药血清干预的海马神经元中ERβ、5-HTR1A受体(5-HTP1A)、MAOA、MAOB、5-HTT受体蛋白水平表达量。 结果:与正常组相比,PMS肝郁模型组大鼠体重显著降低(P0.05);造模后,旷场实验的水平得分、垂直得分及总分均显著减少(P0.05);与PMS肝郁模型组相比,PMS肝郁给药组大鼠体重显著增加(P0.05),旷场水平得分、垂直得分及总分均显著增加(P0.05)。MTT试验表明,经前舒含药血清能显著提高海马神经元的活力。蛋白印迹实验表明,与正常组大鼠相比,肝郁模型组大鼠血清使海马神经元细胞ERβ、MAOA表达水平显著升高(P0.05),5-HTR1A、5-HTT表达水平显著降低(P0.05);与肝郁模型组比较,肝郁给药组血清使ERβ、MAOA表达水平显著降低,5-HTR1A、5-HTT表达水平显著上调(P0.05); MAOB的蛋白表达组间差别无统计学意义。 结论:用慢性应激束缚法可有效制备PMS肝气郁证大鼠模型,旷场实验可有效评价该模型。大鼠海马的ERp表达与PMS肝气郁证关系密切,海马的ERβ、5-HTR1A、MAOA、5-HTT的表达变化可能是导致PMS肝气郁证的重要病因之一。经前舒颗粒含药血清对大鼠海马原代神经细胞以上几种蛋白的表达有不同程度的调节作用,表明海马神经元中的上述蛋白可能是经前舒的作用靶点。
【学位授予单位】:山东中医药大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2010
【分类号】:R271.9

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