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《山东中医药大学》 2010年
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补肾活血法对血管性认知障碍大鼠血管新生的实验研究

王荣  
【摘要】:目的:血管新生是决定脑缺血病理损伤后缺血性神经元存活的关键因素,与认知障碍的程度密切相关。本课题从分子和细胞两个水平探讨补肾活血方——首乌益智胶囊通过调节VEGF-Notch/Delta级联信号通路,从而对血管性认知障碍大鼠血管新生产生的影响,为补肾活血法治疗血管性认知障碍提供初步的实验数据和理论依据。 方法:以SD大鼠为实验对象,采用大脑中动脉缺血再灌注法建立血管性认知障碍动物模型。将120只大鼠经Morris水迷宫实验筛选出100只,随机分为假手术组、模型组、脑复康组、首乌益智组。造模后药物干预4周,Morris水迷宫试验检测各组大鼠行为学改变,HE染色及透射电镜观察脑组织形态学变化,免疫组化法检测第Ⅷ因子表达以观察缺血脑组织微血管密度的改变,实时荧光定量PCR检测VEGF-Notch/Delta级联信号通路上Notch4、D114、VEGF、VEGFR-2等基因表达。 结果:形态学观察,造模后海马锥体细胞缺失、线粒体肿胀、血管管壁变薄,治疗后锥体细胞缺失减少,细胞器基本正常、血管周围水肿减轻。Morris水迷宫实验逃避潜伏期时间,模型组大鼠明显延长,与假手术组相比有极显著差异(P0.01)。脑复康组、首乌益智组逃避潜伏期时间依次缩短,与假手术组比较,首乌益智组差异无显著性(P0.05),脑复康组差异有极显著性(P0.01);与脑复康组比较,首乌益智组差异有极显著性(P0.01)。缺血灶周围微血管密度方面,模型组、脑复康组、首乌益智组较假手术组依次升高;各组与假手术组相比,差异均有极显著性(P0.01);与模型组比较,脑复康组、首乌益智组差异均有极显著性(P0.01);与脑复康组比较,首乌益智组差异无显著性(P0.05)。血管性认知障碍模型大鼠脑组织VEGF、VEGFR-2、Notch4、D114水平较假手术组大鼠升高,差异有显著性(P0.01,P0.05)。药物干预后,脑复康组和首乌益智组脑组织VEGF、VEGFR-2、Notch4、D114水平进一步升高;除VEGFR-2外,首乌益智组大鼠脑组织VEGF、Notch4、D114表达升高,与脑复康组相比存在显著差异(P0.01,P0.05)。在首乌益智胶囊干预的VCI模型大鼠的VEGF和D114之间存在着显著正相关性。 结论:补肾活血法通过对VCI大鼠VEGF-Notch/Delta级联信号通路的调节,精确调节脑组织缺血灶及其周围组织的血管新生,对受损神经元产生营养和修复作用,从而有效纠正脑缺血导致的认知障碍。并且,对缺血脑组织血管新生的调节作用,首乌益智胶囊明显优于脑复康。
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