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《山东师范大学》 2011年
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双孢蘑菇栽培基质中放线菌的分离鉴定及特性研究

李路军  
【摘要】:在农业生产中每年产生大量的作物秸秆,由于其主要成分—纤维素分子结构稳定及存在状态的特殊性,难以得到有效利用。近年来迅速发展的食用菌产业对农作物秸秆的利用发挥了重要作用,可用来生产双孢蘑菇、鸡腿菇、大球盖菇等多种食用菌。双孢蘑菇是能利用秸秆的草腐型食用菌之一,在经过堆积发酵的栽培基质上产生子实体,子实体产量及品质与堆积发酵程度相关。本论文在经过一次堆积发酵的双孢蘑菇栽培基质中筛选到3株放线菌LLJ-03、LLJ-04、LLJ-05,根据培养特征、16S rDNA序列及生理生化特征分别鉴定为Streptomyces griseorubens LLJ-03、Streptomyces fungicidicus LLJ-04、Nocardioides thermolilacinusLLJ-05。 S. griseorubens LLJ-03在麦草等秸秆类基质上生长良好,可以加速其生物转化。采用DNS法测定了发酵过程中羧甲基纤维素酶活力的变化:(1)在液体发酵过程中,酶活力在70U/ml至100U/ml区间呈波形变化,表明此酶活力较为稳定。在第24h酶活力为83.9 U/ml,第48h升高至85.3U/ml,在第72h又降低至73.0U/ml,之后于第120h升至96.4U/ml,然后小幅下降,于第192h升高至96.8U/ml后,再次下降;(2)在固体发酵过程中,第120h左右羧甲基纤维素酶活力达最高值484.7 U/ml。在液体发酵过程中,第24h时还原糖含量为5.12mg/ml,第48h时为5.17 mg/ml,于第72h稍微降低至4.71 mg/ml后持续增加,随着时间延长增加速率降低,还原糖总量趋于稳定,总体稳定在7.00 mg/ml左右。 S. fungicidicus LLJ-04和N. thermolilacinus LLJ-05对供试的尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.cucum erinum)、赤霉病菌(Fusarium graminearum)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveurn)、黄曲霉(Aspergillus flavus)、链孢霉(Neurospora crassa)、烟曲霉(Aspergillus fumigatus)7种病原真菌均具有不同程度的拮抗作用。通过平板对峙试验、菌种块抑制菌丝生长试验、菌丝有机溶剂提取液抑制链孢霉生长试验、菌丝有机溶剂提取液抑制孢子萌发试验表明:(1)链霉菌菌体在生长过程中产生了一些抗真菌物质,这些物质对不同病原真菌生长的抑制程度不同,对供试食用菌的抑制作用甚微;(2)所产生的抗病原真菌物质主要存在于菌丝体内,使用甲醇等极性较大的有机溶剂提取得率较高;(3)菌丝有机溶剂提取液中的抗菌物质能够抑制链孢霉菌丝生长和供试病原真菌孢子萌发,对不同真菌孢子的抑制作用不同。 通过发酵动力学试验,S. fungicidicus LLJ-04和N. thermolilacinus LLJ-05在发酵240h以后对病原真菌的抑制率达到峰值,其产生抗菌物质的速率不同,S. fungicidicus LLJ-04菌丝成熟后分泌抗菌物质的速率快,7天就可达到峰值,N. thermolilacinus LLJ-05则需要11天左右。S. fungicidicus LLJ-04和N. thermolilacinus LLJ-05产生的抗菌物质较为稳定,抑制率随时间变化无几。通过正交试验对影响发酵条件的温度、摇床转速、装液量进行优化:S. fungicidicus LLJ-04的最优发酵条件为温度30℃,摇床转速160rpm,装液量为100ml;N. thermolilacinus LLJ-05的最优发酵条件则为温度30℃,摇床转速180rpm,装液量为75ml。 S. fungicidicus LLJ-04和N. thermolilacinus LLJ-05所产抗真菌物质在40℃以下具有热稳定性,但处理时间不宜过长;此物质耐碱不耐酸,在近中性环境中最为稳定。将此物质在用不同pH值缓冲液处理过的滤纸上展层后进行生物显影,发现不同pH下的移动距离相近,表明该产物可能为中性抗生素;经Doskochilova溶剂系统层析后,S. fungicidicus LLJ-04提取液在Ⅱ、Ⅴ两个溶剂系统中的Rf值较大,N. thermolilacinus LLJ-05提取液在Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ三个溶剂系统中具有较大的Rf值。进行紫外光谱分析发现,S. fungicidicus LLJ-04提取液在253nm、338nm处具有2个吸收峰,处于紫外吸收区;N. thermolilacinus LLJ-05提取液在407nm处存在1个吸收峰,处于可见光区。尚需进一步分离纯化后进行鉴定。
【学位授予单位】:山东师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:S646

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【参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 田加才;;双孢菇麦秸培养料空心堆发酵技术研究[J];山东农业科学;2009年05期
2 马玉胜,孟宪生;麦秸微贮发酵饲料饲喂泌乳奶山羊的效果[J];山东农业科学;1996年03期
3 沈敏;李文生;丁伟华;;双孢菇丰产、增效栽培技术集成应用研究[J];安徽农学通报(上半月刊);2010年07期
4 刘君昂;李琳;周国英;;双孢蘑菇的研究现状及其在湖南地区的发展前景[J];安徽农业科学;2007年05期
5 关跃辉;李玉荣;张树槐;;食用菌菌糠对保护地土壤的改良效果[J];安徽农业科学;2008年05期
6 王艳荣;张海棠;何云;;玉米芯菌糠的营养价值分析[J];安徽农业科学;2008年16期
7 张丽萍,张贵云;微生物农药研究进展[J];北京农业科学;2000年04期
8 马立安;赵雷鸣;陈启武;;降解麦秸木质素菌种的筛选及发酵条件研究[J];长江大学学报(自然科学版)农学卷;2009年03期
9 王美琴;;食用菌渣对水稻的增产效果初探[J];中国稻米;2006年02期
10 郑国华;戴荣衮;蒋云生;陈金水;胡中娥;曾云先;户才彪;;菌糠的营养价值及其喂猪的效果(二报)[J];饲料工业;1990年04期
中国硕士学位论文全文数据库 前4条
1 贺芸;产耐高温纤维素酶细菌的筛选及酶学性质研究[D];南京理工大学;2004年
2 朱小平;菌糠复合剂对土壤和作物生长的影响[D];中国农业大学;2005年
3 董志刚;高温放线菌纤维素酶的研究[D];广西大学;2006年
4 张坚;菌糠饲用酶制剂的研究[D];湖南农业大学;2007年
【共引文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 司美茹;苏涛;李桂芝;;济宁市土壤放线菌资源调查研究[J];山东农业科学;2008年04期
2 马福荣;贾乐;任轩;杨凤苓;程成;;富钼酿酒酵母菌株的选育及其生物学功能研究[J];山东农业科学;2008年06期
3 李璐宁;张薇;赵永强;郑洪波;贾春燕;张广民;;放线菌Y23菌株发酵液抗菌活性及稳定性测定[J];山东农业科学;2009年01期
4 田加才;;双孢菇麦秸培养料空心堆发酵技术研究[J];山东农业科学;2009年05期
5 韩冰;周建树;赵洁;李杨;孟庆国;陈超;;秸秆发酵料接种液体食用菌种栽培试验[J];山东农业科学;2009年06期
6 谢雪迎;任鹏飞;朱常香;宫志远;;24个香菇菌株的鉴定与分类研究[J];山东农业科学;2009年12期
7 赵丽明;鲁志弘;路晓萌;杜秉海;丁延芹;姚良同;;脐橙根际拮抗细菌的筛选与初步鉴定[J];山东农业科学;2010年03期
8 任鹏飞;任海霞;曲玲;姚强;李瑾;宫志远;;香菇胞外酶活性变化及其与农艺性状的相关性分析[J];山东农业科学;2010年12期
9 丁强;王鸿磊;马云飞;邹积华;崔丛光;徐绍荣;徐康铭;谭涛;刘磊;;利用真姬菇菌渣栽培金顶侧耳的配方研究[J];山东农业科学;2011年06期
10 李艳婷;宋志刚;王琳琳;李欣欣;韩建荣;;姬松茸盆景培养的初步研究[J];山东农业科学;2012年02期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 刘倩;韦庆益;刘丽萍;宁正祥;;富马酸单苯甲酯的合成及抗菌特性研究[A];广东省食品学会第六次会员大会暨学术研讨会论文集[C];2012年
2 曹妍;杨钦滟;杜木英;阚健全;;山鸡椒油和八角精油抑菌作用的对比[A];管产学研助推食品安全重庆高峰论坛——2011年中国农业工程学会农产品加工及贮藏工程分会学术年会暨全国食品科学与工程博士生学术论坛论文集[C];2011年
3 张爱民;薛建平;;药用植物源杀虫剂的研究进展[A];中医药理论与应用研究——安徽中医药继承与创新博士科技论坛论文集[C];2008年
4 陈丽园;吴东;夏伦志;赵瑞宏;;畜禽粪便除臭微生物的分离与筛选[A];全国畜禽和水产养殖污染监测与控制治理技术交流研讨会论文集[C];2008年
5 李明;刘彦文;姚东伟;;我国生物农药与农作物害虫防治的现状[A];2009’环保农药新技术、新产品暨生物农药技术研讨会论文集[C];2009年
6 贺稚非;李洪军;陈今朝;司辉青;;绿茶中真菌的检测研究[A];重庆微生物学会第九届会员代表大会暨学术年会论文摘要集[C];2009年
7 李怡彬;沈恒胜;汤葆莎;陈霆隽;陈君琛;;利用废弃资源栽培秀珍菇的生产现状[A];2008年福建省科协第八届学术年会农业分会场论文集[C];2008年
8 肖晶晶;郭萍;田云龙;于江;朱昌雄;;不同腐植酸原料中的微生物分离与鉴定[A];第六届全国绿色环保肥料新技术、新产品交流会论文集[C];2006年
9 徐江兵;林先贵;王一明;王俊华;;施用茶树菇菌糠对青菜生长及土壤生物学活性的影响[A];第八届全国绿色环保肥料(农药)新技术、新产品交流会论文集[C];2009年
10 王成;林壁润;王振中;沈会芳;蒲小明;;放线菌H74-18的分类鉴定[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
中国博士学位论文全文数据库 前10条
1 徐荣燕;嗜热真菌糖苷酶的基因克隆、表达与分子改造[D];山东农业大学;2010年
2 王冰;降解丝素放线菌的分离鉴定、发酵条件优化及其降解机制研究[D];山东农业大学;2009年
3 张新瑞;红蓼提取物的杀虫作用和作用机理研究[D];甘肃农业大学;2009年
4 姜天甲;主要食用菌采后品质劣变机理及调控技术研究[D];浙江大学;2010年
5 吴宇雄;木质素基吸水吸附材料的合成及性能研究[D];中南林业科技大学;2010年
6 张金秋;大麻纤维的形态、结构与吸湿性能及其成纱品质的研究[D];东华大学;2010年
7 王秀娟;嗜热真菌纤维二糖水解酶(CBHⅠ、CBHⅡ)和内切葡聚糖酶(EGⅠ)的分子改造[D];山东农业大学;2011年
8 张宏喜;稻壳主要组分的分离与应用基础研究[D];吉林大学;2011年
9 杜萍;中国野生毛木耳遗传多样性研究[D];北京林业大学;2011年
10 杨超;聚吡咯基导电复合材料的制备及其性能研究[D];兰州大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 郑芳;茶树接种VA菌根生理生化特性的研究[D];华中农业大学;2010年
2 董俊丽;深海细菌Martelella mediterranea纤维素酶基因的克隆、表达与酶学分析[D];华中农业大学;2010年
3 吴茜;中国香菇自然种质遗传多样性SRAP和IGS2分析[D];华中农业大学;2010年
4 吴婕;多拉菌素产生菌的诱变育种及培养条件的优化[D];华中农业大学;2010年
5 陈聪;木质层孔菌产MnP培养体系优化及酶学性质研究[D];中南林业科技大学;2009年
6 胡娟;几种生物农药对稻纵卷叶螟和稻飞虱的防治作用研究[D];安徽农业大学;2010年
7 王美花;里氏木霉swollenin在米曲霉中的表达和纯化[D];浙江理工大学;2010年
8 袁琳;废弃植物纤维资源中药香茶菜药渣制浆造纸性能研究[D];浙江理工大学;2010年
9 王志强;内切葡聚糖酶基因的克隆及其在毕赤酵母GS115中的表达[D];郑州大学;2010年
10 罗永生;固态混菌发酵纤维素酶工艺研究[D];郑州大学;2010年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 李国秀,宋素梅,宗卫东;“301”菌剂堆腐秸杆还田改土培肥效果研究[J];安徽农学通报;1996年04期
2 陶龙红,蒋袆;生物制剂“腐秆灵”快速堆腐秸秆试验[J];安徽农学通报;2000年05期
3 张琳,肖平,李庆和;肥力高在水稻上的应用效果[J];安徽农业科学;1999年06期
4 赵凤良;王尚堃;雷新梅;;3种不同覆土材料对双孢蘑菇栽培的影响[J];安徽农业科学;2006年18期
5 李俐俐;刘天学;古红梅;;平菇菌糠水提物对棉种萌发和幼苗生长的化感效应[J];安徽农业科学;2007年07期
6 胡官庆,桑大庆,吴应元;硅酸盐菌肥与氯化钾在水稻上施用效果比较[J];安徽农业科学;1999年02期
7 郭发定;用菌糠饲喂奶牛效果好[J];安徽农业;2002年02期
8 钟德山,彭光明,应如海,宁康健;蘑菇菌糠饲用价值的研究[J];安徽农业技术师范学院学报;1994年01期
9 孙君社,李雪,董秀芹;纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件的研究[J];北京林业大学学报;2002年02期
10 张永新;马兆临;;变废为宝白灵菇菌糠的再利用[J];北京农业;2006年12期
中国硕士学位论文全文数据库 前3条
1 舒勤;嗜碱性芽孢杆菌Bacillus sp.AC-2产纤维素酶的研究[D];浙江大学;2004年
2 肖舸;绿色木霉的筛选与产纤维素酶发酵条件优化及部分酶学性质研究[D];四川大学;2004年
3 佟勇;产纤维素酶放线菌及其酶学性质和淡水湖底泥微生物区系研究[D];中国科学院研究生院(上海生命科学研究院);2004年
【相似文献】
中国期刊全文数据库 前10条
1 王泽生,王贤樵;双孢蘑菇重要标记位点研究进展[J];中国食用菌;1994年02期
2 郝光明,周德连,李廷军,曲士贤,曲明珍,王正一;北方双孢蘑菇栽培试验小结[J];食用菌;1997年01期
3 张建武;宋祥军;韩克亚;;双孢蘑菇稻田栽培技术(3)[J];湖南农业;2006年08期
4 赵竹青;;双孢蘑菇速冻加工技术[J];中国果菜;2010年04期
5 范雷法,方菊莲,蔡为明;双孢蘑菇菌株12—1的选育及特性[J];浙江农业科学;1996年02期
6 李荣春;双孢蘑菇遗传多样性分析(英文)[J];云南植物研究;2001年04期
7 康源春,蒋宝贵,袁瑞奇,张水旺,王守刚,孔维丽;双孢蘑菇品种抗逆性与产量相关性试验初报[J];食用菌;2001年02期
8 张美芝 ,李汝峰;双孢蘑菇高产栽培技术[J];中国果菜;2001年03期
9 刘超,徐宏青,王宏;双孢蘑菇辐照保鲜研究[J];安徽农业科学;2002年06期
10 于海萍,魏生龙,王治江,陈叶;双孢蘑菇与西葫芦套种技术研究[J];北方园艺;2005年06期
中国重要会议论文全文数据库 前10条
1 王泽生;廖剑华;陈美元;;中国双孢蘑菇育种研究与产业发展[A];2010年中国菌物学会学术年会论文摘要集[C];2010年
2 胡秋辉;赵立艳;安辛欣;杨芹;;纳米薄膜包装对双孢蘑菇保鲜品质的影响[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
3 王泽生;廖剑华;陈美元;;我国双孢蘑菇育种研究与产业发展[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
4 张璐;边银丙;邢增涛;邵毅;;双孢蘑菇几种特殊营养成分与潜在有害成分的初步研究[A];海峡两岸第十届菌物学暨第三届食药用菌学术研讨会论文摘要集[C];2011年
5 王秉峰;;五个双孢蘑菇菌株品比试验[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
6 王泽生;廖剑华;陈美元;;我国双孢蘑菇育种研究与产业发展[A];第九届全国食用菌学术研讨会论文集[C];2010年
7 王秉峰;;五个双孢蘑菇菌株品比试验[A];第九届全国食用菌学术研讨会论文集[C];2010年
8 王波;赵晓清;贾定洪;;棕色双孢蘑菇杂交育种研究[A];第九届全国食用菌学术研讨会摘要集[C];2010年
9 赵一石;王泽生;廖剑华;程明;;双孢蘑菇保鲜加工技术的研究[A];全国第6届食用菌学术研讨会论文集[C];2001年
10 王波;赵晓清;贾定洪;;棕色双孢蘑菇杂交育种研究[A];第九届全国食用菌学术研讨会论文集[C];2010年
中国重要报纸全文数据库 前10条
1 记者 崔威 通讯员 吴海霞;新坝探索生态高效农业新路[N];连云港日报;2008年
2 ;双孢蘑菇优质高产栽培技术[N];武威日报;2009年
3 晏智 何骏天 记者  汪光辉;建高棚 400亩地种出2000亩蘑菇[N];成都日报;2006年
4 本报通讯员 殷云山;种出俏市品牌菇[N];安徽日报;2006年
5 邹春林詹平相;乐安两万“蘑菇大军”走南闯北创大业[N];抚州日报;2007年
6 高翔;双孢蘑菇的采后贮藏保鲜技术[N];中国食品质量报;2008年
7 通讯员 肖金华;杨河农民闲田种菇增收[N];孝感日报;2007年
8 李鑫徐敬意;淮北农村专业合作经济组织快速发展[N];中国工商报;2008年
9 唐俊实习生 刘婧;村党支书入“风险股” 农民家门口铺就致富路[N];南充日报;2008年
10 王连贵;稻草变金条[N];中国特产报;2006年
中国博士学位论文全文数据库 前8条
1 李琴;双孢蘑菇汤特征风味物质的鉴定及熬制过程风味物质释放规律研究[D];江南大学;2011年
2 陈美元;双孢蘑菇基质降解能力退化分子机理的初步研究[D];福建农林大学;2011年
3 吴进菊;双孢蘑菇多酚氧化酶的研究[D];南昌大学;2010年
4 李树明;中国双孢蘑菇生产的经济效率分析[D];华中农业大学;2011年
5 Camel LAGNIKA;高压惰性气体及其联合处理对白蘑菇冷藏期间货架期延长及机理研究[D];江南大学;2013年
6 杜爱玲;鸡腿菇炭角菌病害发生机理及其防治研究[D];西北农林科技大学;2006年
7 姜天甲;主要食用菌采后品质劣变机理及调控技术研究[D];浙江大学;2010年
8 李黎;中国木耳栽培种质资源的遗传多样性研究[D];华中农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库 前10条
1 邹伟;双孢蘑菇风味料加工工艺研究[D];陕西师范大学;2011年
2 张芳;影响双孢蘑菇褐变代谢机制研究[D];福建农林大学;2012年
3 王锡海;基于水分活度和玻璃化转变理论的冻干双孢蘑菇贮藏稳定性的研究[D];山东理工大学;2012年
4 林建海;漳州市双孢蘑菇产业化发展策略研究[D];福建农林大学;2012年
5 季云琪;双孢蘑菇鲜味剂的提取研究[D];山东轻工业学院;2012年
6 王博;双孢蘑菇营养菌丝老化现象的研究[D];东北农业大学;2010年
7 李燕荣;双孢蘑菇高效栽培及其对秸秆生物降解的研究[D];中南林业科技大学;2010年
8 张亮;双孢蘑菇生长过程中硒与铅的相互作用[D];南京农业大学;2012年
9 胡时荣;湖北省双孢蘑菇重金属残留量及其污染源初步研究[D];华中农业大学;2009年
10 郭仲杰;双孢蘑菇栽培菌株的农艺学性状与DNA指纹分析[D];福建农林大学;2009年
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