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《山东师范大学》 2011年
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螺旋藻的酶解利用研究

谢倩  
【摘要】:机体衰老可引起多种疾病,而自由基过剩被普遍认为是引起衰老的主要原因(如动脉粥样硬化、心血管疾病、脑神经细胞变性及肿瘤等)。目前多数抗衰老药物为化学合成药品,有实践证明:服用过多的合成药物抗衰老会对人体产生毒副作用,因此,寻找天然抗氧化剂延缓衰老对人类健康具有重大意义。 藻类是一种含量丰富、分布广泛的天然资源,含有大量营养价值极高的微量元素。在藻类中提取的抗氧化剂具有抗氧化作用强、种类丰富、副作用低等优点,而且有研究表明螺旋藻和藻胆蛋白具有抗氧化活性,能抑制机体内自由基积累,延缓机体衰老,抑制肿瘤的发生,并具有降血压活性。另外国内外已有报道称从不同藻类酶解液中得到具有明显降血压作用,抗氧化作用,抗增殖等能力的活性肽。因此合理开发和利用藻类并提高其应用价值具有广泛的发展前景,对人类抗衰老工程具有极其重要的意义。本论文以钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)为研究对象,围绕其高值化开发利用这一研究主题进行研究,结果如下: 螺旋藻为实验室养殖,将螺旋藻收集后清洗,与磷酸盐缓冲液混合后经过反复冻融得到螺旋藻粗蛋白提取液,运用蛋白酶SM98011酶解螺旋藻粗蛋白粗提液得到抗氧化活性增强的产物,提高了螺旋藻的应用价值。酶解螺旋藻蛋白粗提液采用的反应体系为螺旋藻蛋白粗提液、蛋白酶SM98011、磷酸盐缓冲液体系,在50℃下酶解5h后将蛋白酶灭活,离心后通过α-脱氧核糖法测定酶解产物清除自由基的能力为33.28%,较未酶解样品的12.15%有明显增强。另外将螺旋藻粗蛋白酶解液及未酶解样品在经过氨基水杨酸沉淀及盐酸全水解后进行氨基酸分析,发现二者氨基酸组成有显著差异。 通过凝胶过滤层析柱Sephadex G-15(1.6×80cm,medium Pharmacia)对酶解液进行初步分离,得到5个分离峰,经过对其抗氧化活性测定发现峰3具有较高的抗氧化活性,为26.82%。对峰3进行反复收集,冻干浓缩后由高压液相色谱对酶解液中的抗氧化成分进行进一步分离纯化,得到a-j十个分离峰,经测峰d抗氧化活性最高为:13.42%。对峰d反复收集浓缩,利用质谱分析对其氨基酸序列组成进行了解析,初步得出抗氧化活性肽的氨基酸组成可能为LAHICGVP。 藻类蛋白资源是潜在的天然药物与食品资源,而螺旋藻是其中研究较多的一种高价值藻类。关于螺旋藻的报道多体现在其降血压活性以及其作为自然食品所具有的丰富营养,较少有关于从螺旋藻粗蛋白的酶解液中提取关于抗氧化活性的物质。本实验从抗氧化出发,对螺旋藻粗蛋白酶解液的清除自由基能力进行了测定,为今后关于螺旋藻及其他藻类的研究工作提供了又一个研究方向,对藻类产品的高值化发展有一定的帮助。
【学位授予单位】:山东师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:R151

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【参考文献】
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