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《曲阜师范大学》 2011年
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刺猬嗅球c-Fos、NOS的表达及NO含量的季节性差异

龙娣  
【摘要】:冬眠是某些动物为抵御冬季低温等不利生活条件的一种适应性休眠状态,冬眠现象及机理的研究已经受到越来越多的关注,但是冬眠神经生理调节机制至今仍不是很清楚。本文以刺猬(Erinaceus europaeus)为实验材料,为探索冬眠的神经生理调节机制提供一定的理论基础。 采用HE染色技术对刺猬嗅球的组织形态结构进行研究,以期丰富比较组织学的资料,为刺猬嗅球组织学结构解剖图谱的建立提供一定的基础;利用免疫组化法检测c-Fos蛋白在不同季节刺猬嗅球各层次的表达差异,探索c-Fos、嗅觉、冬眠三者的关系;还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d)组织化学技术检测一氧化氮合酶(NOS)在不同季节刺猬嗅球的分布与数量差异,探索NOS与嗅觉及冬眠的关系;硝酸还原酶法测定不同季节刺猬嗅球内NO含量的变化。照片载入Motic Images Advanced 3.2进行测量,统计结果载入Graphpad prism4软件分析,Microsoft Excel作图。结果表明: 1.横切面上,刺猬嗅球呈同心圆形,从外到内可分为清晰的7层:嗅神经层、嗅小球层、外网丛层、僧帽细胞层、内网丛层、颗粒细胞层和室管膜层。刺猬嗅球各层次的厚度在不同横切面上有所不同,各层次的细胞密度差异较大。 2. c-Fos蛋白在成年刺猬嗅球各层均有不同程度的表达,阴性对照不着色,且表现出明显的季节性差异,即秋季表达最强,冬季表达最弱。表明秋季刺猬嗅球神经元最活跃,嗅觉最灵敏,冬眠期刺猬嗅球活跃性大大降低,嗅觉系统最迟钝。c-Fos在刺猬嗅球中的强表达表明其在嗅觉信息的传递中可能发挥一定作用,c-Fos表达率的显著季节性差异揭示了刺猬嗅球的活跃性与其冬眠具有一定的相关性。 3.不同季节刺猬嗅球一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)表达的差异:NADPH2黄递酶组化方法较为清晰地显示了一氧化氮合酶阳性神经元在嗅球内表达。结果显示:NOS阳性神经元在嗅球内的分布较为广泛,与非冬眠期相比,冬眠期NOS染色更深,表达更强。我们知道,冬眠是睡眠的延伸,由于嗅球有控制动物周期节律的作用,该结果可能说明:冬眠期间,刺猬嗅球可能要产生更多的NO (nitric oxide)以维持冬眠状态。NOS是NO合成的关键酶,因此冬眠期要大量合成NOS,以促进更多的NO生成,维持冬眠状态。 4.不同季节刺猬嗅球NO含量的测定:比较冬眠前、冬眠期、冬眠后三个时期NO在刺猬嗅球中的含量发现,NO含量在冬眠期最低,在冬眠前期最高,但是统计结果表明冬眠期与冬眠前后NO在嗅球中的含量并没有显著地差异。猜测:冬眠期动物合成代谢减弱,L-Arg的量成为了NO合成的限制因素。与此同时,由于冬眠期动物呼吸作用的减弱,体内分子氧的量也成为了NO合成的另一个限制因素。但是NO的量在冬眠前后没有显著的差异说明冬眠期间NO依然表现出较强活跃性。
【学位授予单位】:曲阜师范大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2011
【分类号】:Q41

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